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【24h】

Oxidative stress in primary culture hepatocytes isolated from partially hepatectomized rats

机译:从部分切除肝的大鼠中分离的原代培养肝细胞中的氧化应激

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摘要

The aim of this study was to evaluate the influence of partial hepatectomy prior to cell isolation on hepatocytes in vitro. We characterized the possible changes of various stress oxidative parameters within the first 24h after seeding. Male Wistar rats served as donors. Hepatocytes were isolated by collagenase digestion from either liver of simulated surgery (SH) or from liver 1h after 70% hepatectomy (PH), and the changes in stress parameters were analyzed after 1, 3, 18, and 24 h in culture. At 24h, only hepatocytes from PH maintained significantly increased reactive oxygen species production, oxidized glutathione percentage, and Cu/Zn superoxide dismutase and catalase activities. Our results show that hepatocytes suffer significant cell injury as a result of the isolation procedure, but primary cultured cells from SH metabolically recover from this stress after 18h. After this time, primary culture hepatocytes primed by PH maintain their in vivo-like metabolic activities (increase in both oxidative stress and antioxidant status).La présente étude a eu pour but d'évaluer l'effet d'une hépatectomie partielle sur des hépatocytes avant l'isolement des cellules in vitro. Nous avons caractérisé les modifications potentielles de certains paramètres du stress oxydatif dans les 24h qui ont suivi l'ensemencement. Des rats Wistar mâles ont servi de donneurs. Nous avons isolé par digestion à la collagénase des hépatocytes de foies provenant d'une chirurgie simulée (SH) ou 1 heure après une hépatectomie de 70% (HP). Nous avons effectué les examens 1, 3, 18, et 24 h après la mise en culture. Après 24h, seuls les hépatocytes de l'HP maintiennent une production d'espèces oxygénées radicalaires, un taux de glutathion oxydé et des activités de la superoxyde dismutase Cu/Zn et de la catalase significativement élevés. Nos résultats montrent que les hépatocytes présentent une lésion cellulaire importante causée par la technique d'isolement, mais que les cellules en culture primaire provenant de la SH retrouvent leur équilibre métabolique après 18 h. Après cette période, les hépatocytes en culture primaire provenant de l'HP maintiennent leurs activités métaboliques de type in vivo (stress oxydatif et statut antioxydant élevés).
机译:这项研究的目的是评估体外分离肝部分切除术对肝细胞的影响。我们表征了播种后的最初24小时内各种胁迫氧化参数的可能变化。雄性Wistar大鼠充当供体。通过胶原酶消化从模拟手术的肝脏(SH)或70%肝切除术(PH)后1h的肝脏中分离出肝细胞,并在培养1、3、18和24 h后分析应激参数的变化。在第24小时,仅来自PH的肝细胞保持了显着增加的活性氧生成,氧化的谷胱甘肽百分比以及Cu / Zn超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性。我们的结果表明,由于分离过程,肝细胞遭受了严重的细胞损伤,但是18小时后,来自SH的原代培养细胞从这种应激中代谢恢复。在这段时间之后,由PH引发的原代培养肝细胞保持其体内类似的代谢活性(氧化应激和抗氧化状态均增加)。肝细胞的特异评价体外细胞分离。修改《反倾销协定》的必要条件24小时的集体诉讼。由Wistar提供服务。食用模拟人肝细胞中的异种消化法(SH)或70%(HP)肝素中的一种。在1、3、18等24小时后进行文化改造。 4月24日,HP维护性肝细胞和产氧双歧杆菌,谷胱甘肽氧化酶和超氧化物歧化酶Cu / Zn和过氧化氢酶的重要意义。蒙特洛斯国家肝细胞研究中心的重要原因是由于技术隔离,历史悠久的原始细胞培养和抗逆转录病毒研究已经达到了18小时。体内的单核细胞,体外培养的原代肝细胞主要代谢物(应激类抗氧化剂)。

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