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首页> 外文期刊>Canadian Journal of Physiology and Pharmacology >Distribution of phenotypically disparate myocyte subpopulations in airway smooth muscle
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Distribution of phenotypically disparate myocyte subpopulations in airway smooth muscle

机译：表型不同的心肌细胞亚群在气道平滑肌中的分布

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Phenotype and functional heterogeneity of airway smooth muscle (ASM) cells in vitro is well known, but there is limited understanding of these features in vivo. We tested whether ASM is composed of myocyte subsets differing in contractile phenotype marker expression. We used flow cytometry to compare smooth muscle myosin heavy chain (smMHC) and smooth muscle--actin (sm--actin) abundance in myocytes dispersed from canine trachealis. Based on immunofluorescent intensity and light scatter characteristics (forward and 90° side scatter), 2 subgroups were identified and isolated. Immunoblotting confirmed smMHC and sm--actin were 10- and 5-fold greater, respectively, in large, elongate myocytes that comprised ~60% of total cells. Immunohistochemistry revealed similar phenotype heterogeneity in human bronchial smooth muscle. Canine tracheal myocyte subpopulations isolated by flow cytometry were used to seed primary subcultures. Proliferation of subcultures established with myocytes exhibiting low levels of smMHC and sm--actin was ~2× faster than subcultures established with ASM cells with a high marker protein content. These studies demonstrate broad phenotypic heterogeneity of myocytes in normal ASM tissue that is maintained in cell culture, as demonstrated by divergent proliferative capacity. The distinct roles of these subgroups could be a key determinant of normal and pathological lung development and biology.Key words: flow cytometry, phenotype, heterogeneity, asthma, differentiation.L'hétérogénéité phénotypique et fonctionnelle des cellules du muscle lisse des voies aériennes (MLVA) in vitro est bien connue; toutefois, notre compréhension de ces caractéristiques in vivo est encore floue. Nous avons examiné si le MLVA est composé de sous-populations de myocytes ayant des profils différents d'expression des marqueurs phénotypiques contractiles. Nous avons utilisé la cytométrie de flux pour comparer la quantité de chaînes lourdes de myosine (CLMml) et d'-actine-ml du muscle lisse dans des myocytes dispersés de la trachée de chien. Nous nous sommes basés sur l'intensité d'immunofluorescence et les caractéristiques de diffusion de la lumière (frontale et latérale à 90°) pour identifier et isoler 2 sous-groupes. L'immunotransfert a confirmé que les taux de CLMml et d'-actine-ml étaient d'un facteur 10 et 5 plus élevés, respectivement, dans les gros myocytes allongés où se trouvaient ~60 % de la totalité des cellules. L'immunohistochimie a révélé une hétérogénéité phénotypique similaire dans le muscle lisse bronchique humain. Les sous-polulations de myocytes de la trachée canine, isolées par cytométrie de flux, ont été utilisées pour ensemencer des sous-cultures primaires. La prolifération des sous-cultures établies avec les myocytes affichant de faibles taux de CLMml et d'-actine-ml a été ~2 fois plus rapide que celle des sous-cultures établies avec les cellules MLVA ayant une forte teneur en protéines marqueurs. Ces études démontrent la très grande hétérogénéité phénotypique des myocytes dans le tissu MLVA normal maintenu en culture cellulaire, tel que démontré par une capacité proliférative divergente. Les rôles distincts de ces sous-groupes pourraient être un déterminant majeur de la biologie et du développement du poumon sain et pathologique.Mots clés : cytométrie de flux, phénotype, hétérogénéité, asthme, différenciation.[Traduit par la Rédaction]
机译：气道平滑肌（ASM）细胞的表型和功能异质性在体外是众所周知的，但在体内对这些特征的了解有限。我们测试了ASM是否由收缩表型标记表达不同的肌细胞亚群组成。我们使用流式细胞仪比较了犬气管中散布的平滑肌肌球蛋白重链（smMHC）和平滑肌肌动蛋白（sm-actin）的丰度。根据免疫荧光强度和光散射特征（前向和90°侧向散射），鉴定并分离了2个亚组。免疫印迹证实，在占细胞总数约60％的大型细长心肌细胞中，smMHC和sm-actin分别高10倍和5倍。免疫组织化学显示在人支气管平滑肌中相似的表型异质性。通过流式细胞术分离的犬气管肌细胞亚群被用于种子原代培养。用显示出低水平smMHC和sm-actin水平的心肌细胞建立的亚培养物的增殖比用具有高标记蛋白含量的ASM细胞建立的亚培养物的增殖快约2倍。这些研究表明，正常ASM组织中的心肌细胞具有广泛的表型异质性，这种差异在细胞培养物中得以维持，这由不同的增殖能力所证实。这些亚组的独特作用可能是正常和病理学肺发育和生物学的关键决定因素。关键词：流式细胞仪，表型，异质性，哮喘，分化。 ）体外est bien connue；香椿，体内的香气和香气。普通肌无力检查正常人群的肌组织，不同变形体的收缩表达。肌肉细胞流动性比较器（CLMml）和肌细胞肌动蛋白-肌细胞的分布。免疫荧光和化学发光原理（正面和横向成90度）倒入标识符和等号2个sous-groups。免疫转移确认了CLMml和d'-actine-ml d'unacteur 10和5的确定性抗体，并分别补充了约60％的单质细胞。免疫组织化学类似普通话的肌肉相似性支气管肺炎。犬的沙门氏菌变种，通透性的细胞变质，初等教育用的实用法。优良的文化常备能使CLMml和dact-actine-ml抗体的肌细胞亲和力提高约2倍，而普通文化的速成细胞则能使MLVA先进的肌腱细胞得以保留。正常情况下，肌细胞的单倍表达能力是正常的，主要的文化细胞是纤维素细胞，而能力则是多种多样的。生理学和病理学专业硕士研究生学位课程由社会团体来进行分类。

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