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【24h】

Spectroscopic study of fast-neutron-irradiated chromatin

机译:快中子辐照染色质的光谱研究

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摘要

The effects produced by fast neutrons (0-100 Gy) on chromatin structure were analyzed by (i) [1H]-NMR spectroscopy, (ii) time resolved spectroscopy, and (iii) fluorescence resonance energy transfer (FRET). Two types of chromatin were tested: (i) a chromatin from a normal tissue (liver of Wistar rats) and (ii) a chromatin from a tumoral tissue (Guerin limphotrope epithelioma, a rat solid tumor). The fast-neutron action on chromatin determines greater values of the [1H]-NMR transverse relaxation time, indicating a more injured structure. Time-resolved fluorescence measurements show that the relative contribution of the excited state lifetime of bound ethidium bromide to chromatin DNA diminishes with increasing irradiation doses. This reflects the damage that occurs in DNA structure: production of single- and double-strand breaks due to sugar and base modifications. By the FRET method, the distance between dansyl chloride and acridine orange coupled at chromatin was determined. This distance increases upon fast-neutron action. The radiosensitivity of the tumor tissue chromatin seems higher than that of the normal tissue chromatin, probably because of its higher (loose) euchromatin/(compact) heterochromatin ratio. As the values of the physical parameters analyzed are specific for a determined dose, the establishment of these parameters may constitute a criterion for the microdosimetry of chromatin radiolesions produced by fast neutrons.Key words: chromatin, spectroscopic study, radiolesions, fast neutrons, microdosimetry.Les effets produits par les neutrons rapides (0-100 Gy) sur la structure de la chromatine ont été analysés par (i) spectroscopie de [1H]-RMN, (ii) spectroscopie résolue en temps et (iii) transfert résonant d'énergie de fluorescence (FRET). Deux types de chromatine ont été testés: (i) une chromatine de tissu normal (le foie de rats Wistar) et (ii) une chromatine de tissu tumoral (Guerin limphotrop épithéliome, une tumeur solide de rats). L'action des neutrons rapides sur la chromatine induit une augmentation des valeurs des temps de relaxation transversale [1H]-RMN, ce qui indique une structure lésée. Par fluorescence résolue en temps on a établi que la contribution relative de la durée de vie de l'état excité du bromure d'éthidium lié à l'ADN diminue avec la dose des neutrons rapides. Cela indique les coupures mono et double brins produites dans la structure d'ADN, à cause des modifications des sucres et des bases. Par la méthode de FRET a été déterminée la distance entre chlorure de dansyl et acridine orange, couplés à la chromatine. Cette distance augmente sous l'action des neutrons rapides. La radiosensibilité de la chromatine de tissu tumoral semble plus forte que celle de la chromatine de tissu normal, probablement à cause de son rapport euchromatine (dispersée)/hétérochromatine (condensée) plus élevé. Comme les valeurs des paramètres physiques analysés sont spécifiques pour une dose déterminée, l'établissement de ces paramètres peut constituer un critère pour la microdosimétrie des radiolésions de la chromatine produites par les neutrons rapides.Mots clés : chromatine, étude spéctroscopique, radiolésions, neutrons rapides, microdosimetrie.
机译:(i)[ 1 H] -NMR光谱,(ii)时间分辨光谱和(iii)荧光共振能分析了快中子(0-100 Gy)对染色质结构的影响转移(FRET)。测试了两种类型的染色质:(i)来自正常组织(Wistar大鼠肝脏)的染色质和(ii)来自肿瘤组织(Guerin limphotrope上皮瘤,大鼠实体瘤)的染色质。快中子对染色质的作用决定了[ 1 H] -NMR横向弛豫时间的较大值,表明该结构受到的损伤更大。时间分辨的荧光测量表明,结合的溴化乙锭的激发态寿命对染色质DNA的相对贡献随着辐照剂量的增加而减小。这反映了DNA结构中发生的损坏:由于糖和碱基的修饰而产生单链和双链断裂。通过FRET方法,确定了在染色质上偶联的丹磺酰氯和a啶橙之间的距离。在中子快速作用下,该距离增加。肿瘤组织染色质的放射敏感性似乎高于正常组织染色质的放射敏感性,可能是由于其(松散的)常染色质/(紧凑型)异染色质比率更高。由于所分析的物理参数值对于确定的剂量而言是特定的,因此这些参数的建立可能构成快速中子产生的染色质放射性损伤的微量剂量标准。关键词:染色质,光谱研究,放射性损伤,快速中子,微量剂量学。高效液相色谱法分析中子的快速中子速度(0-100 Gy)(i)[ 1 H] -RMN的光谱,(ii)临时的光谱(iii)荧光共振转移(FRET)。染色质的补充类型:(i)正常人的染色质(Wistar大鼠)和(ii)肿瘤性的染色质(Guerin limphotropépithéliome,大鼠的整体肿瘤)。 [ 1 H] -RMN的中子反应加速了色氨酸的水平补充,使结构简单易行。相对荧光强度,可从中子快速剂量的ADN溴化铵激发的相对时间和相对强度中获得。单一和双胞胎产品的单质化和单质化,导致了成功的修饰和碱基的修饰。从FRET中提取出的丹参基氯和a啶橙的距离为déterminée的距离,以及色氨酸。中子快速移动距离。正常组织中的染色质染色,加上正常染色的细胞,可能会引起正常染色质的扩散(常分散)/染色质(染色质)加élevé。铬的物理分析,铬的定量分析,放射性的铬酸中子分析迅速,微剂量计。

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