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Evaluation of the effect of gamma rays on the venom of Vipera lebetina by biochemical study

机译：生化研究评价γ射线对le蛇毒的毒作用

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Snake bites represent a serious public health problem in many areas of the world. In Algeria, two widespread snakes are Vipera lebetina and Cerastes cerastes. Vipera lebetina venom causes local hemorrhage and necrosis, and it may lead to permanent limb loss. The principal causes of mortality after snakebites are acute renal failure and hemorrhage, which occur not only locally, at the site of the bite, but also systemically, contributing to the cardiovascular shock characteristic of severe envenomation. Gamma radiation has been shown to be effective for attenuating venom toxicity. Vipera lebetina venom was irradiated with two doses of gamma rays (1 and 2 kGy) from a 60Co source, and the venom's toxic, enzymatic, and structural properties were analyzed. Intraperitoneal injection of the irradiated venoms (100–500 µg/20 g mouse body mass) revealed a significant decrease of the toxicity. Irradiated venoms with 1 and 2 kGy doses were four and nine times less toxic, respectively, than the native venom. A biochemical characterization of in vitro enzymatic activities was performed. Vipera lebetina displayed in vitro caseinolytic, amidolytic, esterasic, coagulant, and phospholipase A2 activities. Caseinolytic, amidolytic, esterasic, and coagulative activities were reduced for the irradiated venoms; only phospholipase A2 activity was abolished in the irradiated venom with a dose of 2 kGy. The native and irradiated venoms were separated by gel filtration and electrophoresis. Chromatographic and electrophoretic profiles were drastically changed as compared with the native venom. Vipera lebetina venom detoxified by gamma rays was used for active immunization, and the presence of antibody in the immune sera was detected by ELISA. The immunogenic properties were preserved and the antisera obtained with the irradiated venoms could cross-react. Antisera were able to neutralize the toxic effect of V. lebetina native venom. These results indicate that irradiation of V. lebetina venom with a dose of 2 kGy can promote a significant detoxification, keeping the immunological properties intact.Key words: Vipera lebetina venom, gamma radiation, enzymes, detoxification, immune sera, immunoreactivity.Les morsures de serpents représentent un problème de santé publique à travers le monde. En Algérie, les deux espèces répandues sont Vipera lebetina et Cerastes cerastes. Les morsures de V. lebetina se traduisent par une hémorragie et une nécrose locale qui se développent rapidement et peuvent aboutir à l'amputation du membre mordu. La cause principale de décès par morsures de serpents est due soit à une atteinte rénale soit à des hémorragies qui ne se produisent pas uniquement au niveau du site de morsure mais sont étendues, contribuant au choc cardiovasculaire caractéristique des envenimations sévères. L'irradiation s'est révélée être une bonne méthode pour atténuer les effets toxiques de ce venin. Le venin de V. lebetina a été irradié par deux doses de rayons ionizants gamma (1 et 2 kGy), émis par le 60Co, les propriétés toxique, enzymatique et structurale de ce venin ont été analysées. L'injection intra-péritonéale des venins irradiés (100–500 µg/20 g de souris) a révélé une diminution significative de la toxicité. Les venins irradiés avec des doses de 1 et 2 kGy sont respectivement 4 et 9 fois moins toxiques que le venin natif. Une caractérisation biochimique des activités enzymatiques in vitro a été realisée. Le venin de V. lebetina a révélé in vitro des activités caséinolytique, amidolytique, estérasique, coagulante et phospholipase A2. Les activités enzymatiques de type caséinolytique, amidolytique, estérasique et coagulante ont été réduites pour les venins irradiés, seule l'activité phospholipase A2 est totalement abolie avec la dose de 2 kGy. Les venins natif et irradiés ont été séparés par gel filtration et électrophorèse. Les profils chromatographiques et électrophorètiques se sont révélés totalement modifiés comparés à ceux du venin natif. Les venins irradiés avec des doses de 1 et 2 kGy ont été utilizés dans des protocoles d'immunisation, ils nous ont permis d'obtenir des immuns-sérums ayant un titre élev&eacu
机译：蛇咬伤在世界许多地区代表着严重的公共卫生问题。在阿尔及利亚，两条广泛传播的蛇是Vi蛇蛇蝎（Vipera lebetina）和Cerastes cerastes。 le蛇蛇毒会引起局部出血和坏死，并可能导致永久性肢体脱落。蛇咬伤后死亡的主要原因是急性肾功能衰竭和出血，不仅发生在咬伤部位，而且还全身发生，导致严重的心血管毒性。业已证明，伽玛射线可有效减轻毒液毒性。用来自 60 Co来源的两次剂量的伽玛射线（1和2 kGy）照射le蛇毒蛇毒，并分析了毒蛇毒的毒性，酶学和结构特性。腹腔注射辐照毒液（100–500 µg / 20 g小鼠体重）显示毒性显着降低。剂量为1和2 kGy的辐射毒液的毒性分别比天然毒液低四倍和九倍。进行了体外酶活性的生化表征。 bet蛇显示体外酪蛋白水解，酰胺分解，酯，凝血和磷脂酶A 2 活性。辐射毒液的酪蛋白水解，酰胺水解，酯化和凝血活性降低；剂量为2 kGy的辐照毒液仅消除了磷脂酶A 2 的活性。通过凝胶过滤和电泳分离天然的和辐射的毒液。与天然毒液相比，色谱图和电泳图谱发生了巨大变化。用γ射线解毒的le蛇毒进行主动免疫，并通过ELISA检测免疫血清中抗体的存在。保留了免疫原性，用辐照毒液获得的抗血清可以交叉反应。抗血清能够中和V. lebetina天然毒液的毒性作用。这些结果表明，以2 kGy剂量照射V. lebetina毒液可以促进明显的排毒，保持免疫学特性不变。蛇在世界各地游荡。 EnAlgérie，les deuxespècesrépanduessont Vipera lebetina et Cerastes cerastes。莫桑比克血统和流行病学研究与发展计划书》。蛇法最重要的事由负责的事是因犯罪而产生的，这是因犯罪现场的唯一性，但有意向的法院，法院和法院的法律保护令也很重要。 L'irradiation s'estrévéléeêtreune bonneméthodepouratténuerles effets toxiques de cevenin。 Le venin de V. lebetina aétéirradiépar deux剂量的人造丝离子化剂伽玛（1 et 2 kGy），émispar le 60 Co，lespropriétés毒理学，ce venin onétéanalysées的酶。静脉内放射（100-500 µg / 20 g de souris）注射可明显减轻毒性。静脉毒的剂量分别为1千克和2千克，分别为4千克和9千克。进行体外生物活性化学酶研究。 Le venin de V. lebetina是一种在体外进行的酪蛋白水解酶，酰胺水解酶，雌激素，凝血酶和磷脂酶A 2 的体外活化酶。酶解，酰胺水解，雌性和凝集性酶的活化酶，磷脂酶A 2 的活性合计约为2 kGy。 Les venins natif etirradiésétéséparés凝胶过滤和électrophorèse。比较色谱法和总谱法的总和，可以比照纳蒂夫的地方法院进行比较。静脉注射疫苗的剂量为1公斤和2公斤，免疫接种后的通用疫苗，免疫和血清的滴定度为零。

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