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Thyrotropin and iodide regulate sulfate concentration in thyroid cells. Relationship to thyroglobulin sulfation

机译:促甲状腺素和碘化物调节甲状腺细胞中的硫酸盐浓度。与甲状腺球蛋白硫酸化的关系

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摘要

Thyroglobulin (Tg), the thyroid hormone precursor, is sulfated both on tyrosines and on carbohydrates. We showed recently that sulfated tyrosines were involved in thyroid hormone synthesis. Moreover, we also reported that Tg sulfation is downregulated by thyrotropin (TSH), especially on tyrosines. This control may occur at each step in the sulfation process. In this paper, we studied the regulation of the concentration of cytosolic inorganic sulfate, the first substrate, in porcine thyroid cells stimulated by TSH with or without iodide. The amounts of cytosolic sulfate and the cytosolic volumes measured showed that the sulfate concentration depends only on cytosolic volume changes in response to TSH and iodide treatment. After the cells were labelled with [35S]-sulfate, the specific radioactivity (SRA) of cytosolic sulfate was determined. When cells were treated with only TSH, the concentration and SRA of cytosolic sulfate decreased by 30%, and by about 15% when cells were incubated with both TSH and iodide. TSH decreased more conspicuously the rate of [35S]-sulfate incorporation into Tg (by 57% without iodide, by 43% with iodide) than the concentration and SRA of cytosolic sulfate, while iodide altered these parameters to the same extent (15%). These findings suggest that TSH regulates other steps in the sulfation process, such as specific substrate and enzyme levels, while iodide controls mainly the sulfate concentration.Key words: cytosolic inorganic sulfate measurement, capillary electrophoresis, intracellular sulfate concentration, thyroglobulin sulfation, primary culture thyroid cells.La thyroglobuline (Tg), le précurseur des hormones thyroïdiennes, est sulfatée sur les tyrosines et les oligosaccharides. Nous avons récemment montré que les tyrosines sulfatées sont impliquées dans la synthèse des hormones thyroïdiennes et que la thyrotropine (TSH) diminue la sulfatation de la Tg, particulièrement sur les tyrosines. Ce contrôle peut s'exercer à chaque étape du processus de sulfatation. Ici nous étudions la régulation de la concentration du sulfate minéral cytosolique, le premier substrat, dans des cellules thyroïdiennes de porc stimulées par la TSH, en présence et en absence d'iodure. Les mesures de la quantité de sulfate cytosolique et du volume cytosolique ont montré que la concentration de sulfate dépend seulement des variations du volume cytosolique se produisant sous l'effet de la TSH et de l'iodure. Aprés incubation des cellules avec du [35S]-sulfate, on détermine la radioactivité spécifique (SRA) du sulfate cytosolique. Quand les cellules sont traitées par la TSH seule, la concentration et la SRA du sulfate cytosolique sont diminuées de 30 %, et environ de 15 % quand les cellules sont incubées avec la TSH et l'iodure. La TSH diminue plus efficacement le taux d'incorporation de [35S]-sulfate dans la Tg (57 % sans iodure, 43 % avec iodure) que la concentration et la SRA du sulfate cytosolique, tandis que l'iodure modifie ces paramètres dans la même proportion (15 %). Ces résultats suggèrent que la TSH régule d'autres étapes du processus de sulfatation, tels que les niveaux des enzymes et des substrats spécifiques alors que l'iodure contrôle principalement la concentration de sulfate cytosolique.Mots clés : mesure du sulfate minéral cytosolique, électrophorèse capillaire, concentration du sulfate intracellulaire, sulfatation de la thyroglobuline, primoculture de cellules thyroïdiennes.
机译:甲状腺激素前体甲状腺球蛋白(Tg)在酪氨酸和碳水化合物上均被硫酸化。我们最近发现,硫酸化酪氨酸参与甲状腺激素的合成。此外,我们还报道了促甲状腺激素(TSH),尤其是酪氨酸上调了Tg硫酸盐的含量。该控制可以在硫酸化过程的每个步骤中进行。在本文中,我们研究了含或不含碘化物的TSH刺激的猪甲状腺细胞中胞质无机硫酸盐(第一底物)浓度的调节。所测量的胞质硫酸盐的量和胞质体积表明,硫酸盐浓度仅取决于响应TSH和碘化物处理的胞质体积变化。用[ 35 ]硫酸盐标记细胞后,测定胞质硫酸盐的比放射性(SRA)。当仅用TSH处理细胞时,细胞溶质硫酸盐的浓度和SRA降低了30%,而当将细胞与TSH和碘化物一起孵育时,其降低了约15%。 TSH降低了[ 35 S]-硫酸盐掺入Tg的速率(不含碘的情况下降低了57%,含碘的情况下降低了43%),而碘化物改变了这些参数,达到相同程度(15%)。这些发现表明,TSH调节了硫酸化过程中的其他步骤,例如特定的底物和酶水平,而碘化物主要控制着硫酸盐的浓度。关键词:胞质无机硫酸盐的测定,毛细管电泳,细胞内硫酸盐的浓度,甲状腺球蛋白硫酸化,原代培养甲状腺甲状腺球蛋白(Tg),甲状腺激素的去甲肾上腺素,酪氨酸和低聚糖中的硫酸盐。硫酸酪氨酸的蒙特雷定律暗示了甲状腺素和甲状腺索洛平(TSH)的硫酸缩合甘油三酯的合成,以及酪氨酸的硫代化。硫酸化过程中的控制权。硫酸盐对细胞溶质的调节作用,主要基质,TSH刺激性胸腺单核细胞,增强或不增强作用。硫酸盐溶质和定量溶质的定量测定方法,以及由于TSH溶质产生量的固体溶质的变化而导致的硫酸盐溶出度的变化。 [ 35 S]-硫酸盐在déterminelaradioactivitéspécifique(SRA)硫酸盐细胞溶胶上的孵育。 TSH含量等于或等于30%的硫酸盐溶液溶质,以及TSH含量等于或高于15%的硫酸纤维素溶质。 [ 35 S]-硫酸盐丹参的TSH减量和增效作用(57%的纯碘,43%的纯碘),浓度和SRA硫酸盐溶质,棕褐色修饰参数参数(15%)。硫酸盐处理过程中的硫酸盐推荐品,酶和碱性物质的补充说明,硫酸盐溶质的主要成分,硫酸盐溶胶质溶性的说明。 ,浓缩硫酸纤维素内膜,硫酸化甲状腺球蛋白,原代培养的甲状腺细胞。

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