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Protein Tailoringのーモデル： リゾチームーモノメトキシポリエチレングリコールコンジュゲート

机译：蛋白质定制模型：溶菌酶-单甲氧基聚乙二醇缀合物

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We have been studying a hen egg-white lysozyme derivative, mPEG-lysozyme, in which a monomethoxypolyethylene glycol (mPEG) is covalently bound to the its e-amino group of Lys33. Spectroscopic analysis and enzyme kinetics data indicate that the conformation and the enzyme activity of lysozyme for glycol chitin remains unchanged after modification with mPEG. On the contrary, the antimicrobial activity of mPEG-lysozyme for Gram-negative bacteria, Pseudomonas aeruginosa, was 2.4 times greater than that of native lysozyme. Based on the finding that covalent attachment of mPEG to Lys33 increased the surface hydrophobicity of the lysozyme molecule and enhanced the interaction of lysozyme with lipopolysaccharides, a model to support the action profile of mPEG-lysozyme for Gram-negative bacteria was constructed. Further characterization of the lysozyme derivative provided evidence to explain the low immunogenicity and thermostable nature of mPEG-lysozyme, as compared to native lysozyme. From the results, it is suggested that mPEG-lysozyme can be advantageously used for protein tailoring of lysozyme.%高分子化合物の優れた性質をタンパク質分子に導入するタンパク質コソジュゲートの創製は， タンパク質の機能の弱点をピンポイントで補い，食品・医薬など多分野への幅広い応用を可能にするため の有効な手法として期待されている．平均分子量5000の両親媒性合成高分子化合物モノメトキシポリエ チレングリコール（mPEG）誘導体を用いて，溶菌酵素ニワトリ卵白リゾチームへの修飾条件と反応生成物 の分離条件を設定し，33位のリジン残基の側鎖ε-プミノ基に特異的にmPEGが共有結合した修飾酵素 （mpEG-リゾチーム）を得た．リゾチームのグラム陽性菌に対する中性pH領域における溶菌活性は末修 飾リゾチームより低かったが，逆にグラム陰性菌に対する抗菌力を増強させた．これはリゾチーム分子表 面に獲得した疎水性領域とグラム陰性菌外膜間の新規の疎水的相互作用に起因するものと考えた．さらに mPEGの導入によりリゾチームの免疫原性が軽減され，熱安定性も著しく向上することを明らかにした．
机译：我们一直在研究一种鸡蛋蛋白溶菌酶衍生物，mPEG-溶菌酶，其中单甲氧基聚乙二醇（mPEG）共价结合到其Lys33的e-氨基上。光谱分析和酶动力学数据表明，经mPEG修饰后，溶菌酶对乙二醇几丁质的构象和酶活性保持不变。相反，mPEG溶菌酶对革兰氏阴性菌铜绿假单胞菌的抗菌活性是天然溶菌酶的2.4倍。基于mPEG与Lys33的共价结合增加了溶菌酶分子的表面疏水性并增强了溶菌酶与脂多糖的相互作用的发现，构建了支持mPEG溶菌酶对革兰氏阴性细菌作用的模型。溶菌酶衍生物的进一步表征为解释mPEG溶菌酶与天然溶菌酶相比具有较低的免疫原性和热稳定性提供了证据。从该结果表明，mPEG溶菌酶可以有利地用于溶菌酶的蛋白质剪裁。平均分子量5000の両亲媒性合成高分子化合物のノメングリコール（mPEG）诱导体を用いて，溶菌酵素素ワー修饰の修饰条件と反応生成物の分离条件を设定し，33位のリジン残基の侧锁ε-プミノ基に特异的にmPEGが共有结合した修饰酵素（mpEG-リゾチーム）を得た。 mPEGの引入によりリゾチームの免疫原性が軽减され，热安定性も着しく向上することを明らかにした。

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