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オニグモ縦糸タンパク質を導入した遺伝子組換えカイコ絹糸の高次構造解析

机译:引入蜘蛛经蛋白的转基因蚕丝的高阶结构分析

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摘要

2000年にトランスポゾンpiggyBacを用いることで遺 伝子組換えカイコ(TGカイコ)の作出が可能となった. 筆者らは,改変絹タンパク質を絹糸中に発現するTG カイコを作出することで絹糸の力学物性を改変するこ とが可能であると考え,研究を進めている.これまで にオニグモ(Araneus ventricosus)の縦糸遺伝子cDNA を絹糸の一部として発現するTGカイコの作出に成功し ている.%Secondary structure of silk fiber containing spider (Araneus ventricosus) fiber protein produced by transgenic silkworm (KH29) was analyzed by ~(13)C CP/MAS NMR and compared with that of wild-type silk fiber. The NMR spectrum showed that the secondary structure of KH29 silk were the same as that of wild-type silkworm silk even though spider fiber protein existed in silk. In addition, since the peak signal around 15.7 ppm, indicating the α-helix of Ala C_β, was not observed in the NMR spectrum of KH29 silk, in KH29 silk may form a β-sheet structure instead of an a-helix structure after spinning process of silkworm. These results indicate that physical properties of silk can be modified by the incorporation of foreign fiber proteins by the use of transgenic silkworm technology.
机译:2000年,使用转座子piggyBac能够生产转基因蚕(TG蚕)。作者认为,可以通过制造在蚕丝中表达修饰的蚕丝蛋白的TG蚕来改变蚕丝的机械性能,并且正在进行研究。到目前为止,我们已经成功地生产了一种TG蚕,该蚕表达了作为丝线一部分的蜘蛛(Araneus ventricosus)的纵向基因cDNA。用〜(13)C CP / MAS NMR分析了转基因蚕(KH29)产生的含有蜘蛛(Araneus ventricosus)纤维蛋白的蚕丝纤维的二级结构,并与野生型蚕丝进行了比较。尽管蚕丝中存在蜘蛛纤维蛋白,但KH29蚕丝的二级结构与野生型蚕丝的二级结构相同。此外,由于在15.7 ppm左右的峰信号未见,表明AlaC_β的α-螺旋。蚕的纺丝过程中,KH29蚕丝的NMR谱图可能会形成β-折叠结构而不是a-螺旋结构,这些结果表明蚕丝的物理性质可以通过掺入外来纤维蛋白而改变。转基因蚕技术。

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