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ポストカラム吸光誘導体化HPLC法による糖類の高感度分析

机译:柱后吸收衍生化HPLC法高灵敏度分析糖

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摘要

For highly sensitive determination of carbohydrates in HPLC, we have developed a post-column UV photometric derivatization system, for which arginine was directly added in the mobile phase as a reaction reagent.rnCarbohydrates were separated as their borate complexes with borate in the mobile phase by anion-exchange chromatography. Then, the column effluent was led to a reaction coil and heated in a chemical reaction box. The UV absorbing derivatives, which had been produced by the reaction of carbohydrates and arginine (previously added in the mobile phase) under heating, were detected with a UV photometric detector. Post-column reaction and detection conditions, such as detection wavelength, arginine concentration, reaction coil length, and reaction temperature, were optimized for higher sensitivity. Under the optimized conditions, good linearity of calibration curve was obtained over a range of 20 to 1000 pmol. The detection limit of glucose was approximately 10 pmol (SN ratio : 3).rnWe conclude that the post-column UV photometric derivatization system is a powerful tool for highly sensitive determination of carbohydrates because of its simple configuration requiring no reagent pump.%HPLCにおける糖類の高感度分析のために,アルギニンを反応試薬として移動相に直接添加するポストカラrnム吸光誘導体化システムを開発した。rn糖類はほう酸塩移動相を用いたほう酸錯体として陰イオン交換クロマトグラフィーにより分離し,カラム溶rn出液を反応コイルに導き化学反応槽内で加熱した。そして,糖類と移動相中にあらかじめ添加されているアルrnギニンとの過熱反応により生成した紫外吸収性誘導体化物をUV検出器で検出した。高感度検出のために,反rn応検出条件(検出波長,アルギニン濃度,反応コイル長さ,反応温度)の最適化検討を行った。最適化されたrn条件において,絶対注入量20~1000pmolの範囲で検量線は良好な直線性が得られ,またグルコースの検出限rn界(SN比3)は約10pmolであった。rn本ポストカラム吸光誘導体化法を用いたシステムは,反応試薬送液ポンプを必要としないシンプルな装置構成により,糖類の高感度分析ができる有用なシステムであることがわかった。
机译:为了在HPLC中高度灵敏地测定碳水化合物,我们开发了一种柱后UV光度衍生化系统,该系统将精氨酸直接作为流动试剂添加到流动相中。阴离子交换色谱。然后,将柱流出物引入反应盘管并在化学反应箱中加热。用紫外线光度检测器检测由碳水化合物和精氨酸(先前在流动相中添加)反应生成的吸收紫外线的衍生物。优化了柱后反应和检测条件,例如检测波长,精氨酸浓度,反应线圈长度和反应温度,以提高灵敏度。在最佳条件下,在20至1000 pmol的范围内可获得良好的校准曲线线性。葡萄糖的检出限约为10 pmol(信噪比:3)。我们得出结论,柱后UV光度衍生化系统是一种高度灵敏地测定碳水化合物的强大工具,因为它的简单配置不需要试剂泵。%HPLCにおける糖类の高感度分析のために,アルギニンを反応试薬として移动相に直接添加するポストカランム吸光诱导体化システムを开発した。そして,糖类と移动相中にあらかじめ添加されているアルrnギニンとの超级反応により生成した紫外吸收性诱导体化物をUV検出器で検出した。绝対注入量20〜1000pmolの范囲で検量线は良好な直线性が得られ,またグルコースの検出限rn界(SN比3)は约10pmolであった。システムは,反応试薬送液ポンプを必要としないシンプルな装置构成により,糖类の高感度分析ができる有用なシステムであることがわかった。

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