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遺伝子診断の実際と問題点

机译:基因诊断的实践和问题

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摘要

今から20年前,核酸を取り扱う仕事は,高額な機器を備え,核酸取り扱いを熟知した研究者を擁する大学の研究室や特殊な研究機関だけに許された特権であり,一般の研究室や検査室で遺伝子診断を行なうことなど想像もつかないことであった。 ところが,少量の核酸から特定の塩基配列を自分の思い通りに増やす簡便な方法(遺伝子増幅法Polymerase chain reaction:PCR法)が1985年にアメリカのMullisらによって考案されたことで1),遺伝子診断は我々のぐっと身近なものとなった。 この画期的な考案によってMullisはノーベル化学賞(1993年)に輝いている。 実験動物の感染症診断においても,これまで行なわれてきた病原体の培養検査,酵素抗体(ELISA)法などによる抗体検査に加え,PCR法による病原微生物の遺伝子検査が日常検査法として,その地位を確立しつつある。 実験動物の感染症診断でPCR法の対象となる病原体は主にウイルスと,培養困難なまたはコロニー発育までに時間を要する細菌などである。 前者には乳酸脱水素酵素ウイルス2),マウス肝炎ウイルス(MHV)およびパルボウイルス3)など,後者にはCilia-associated respiratory(CAR)bacillus,ティザー菌(Clostridium piliforme)およびマイコプラズマ(Mycoplasma pulmonis)などがある。 本稿ではPCR法の実際とその問題点について概説する。
机译:二十年前,核酸的工作仅授予配备了昂贵设备并拥有熟悉核酸处理研究人员的大学实验室和专门研究机构的特权。在实验室进行基因诊断是不可想象的。但是,Mullis等人于1985年在美国设计了一种简单的方法(基因扩增法聚合酶链反应:PCR法),以从少量核酸中增加特定碱基序列,从而进行了基因诊断。它离我们越来越近了。这种突破性的设备获得了Mullis的诺贝尔化学奖(1993年)。在实验动物的传染病诊断中,除了常规的病原体培养试验和使用酶抗体(ELISA)方法的抗体试验外,使用PCR方法的病原微生物基因检测也已成为日常测试方法。它正在建立中。用于诊断实验动物中传染病的PCR方法的目标病原体主要是病毒和细菌,难以培养或需要很长时间才能生长菌落。前者包括乳酸脱氢酶病毒2),小鼠肝炎病毒(MHV)和细小病毒3),而后者包括纤毛相关呼吸道(CAR)杆菌,菌状梭状芽胞杆菌和肺炎支原体。在那儿。本文概述了PCR方法的实践及其存在的问题。

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