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長崎大学医学部·歯学部附属病院検査部におけるメタローβラクタマーゼの検出法と1991年から2005年の15年間におけるメタロ-beta-ラクタマーゼ産生菌の分離状況

机译:长崎大学医学院牙科医院检验部门医学院的Metalo-β-内酰胺酶检测方法及1991年和2005年15岁的金属β-内酰胺酶生产细菌的隔离情况

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摘要

プラスミド伝達性のメタロβ-ラクタマーゼ(MBL)産生緑膿菌が日本で発見され,現在では世界各国からMBLsを産生するグラム陰性梓菌が分離され問題となっている,日常の微量液体希釈法で薬剤感受性結果が得られると同時にMBL藍生性の有無を判定する方法を開発した.1996年から2005年の調査期間中に,サーマルサイクラー内での加熱溶菌による簡易DNA抽出とPCR.および増幅産物のenzymatic detection法の組み合わせによる検出法(ED-PCR法),通常のPCR法,MBL阻害剤であるメルカプト酢酸ナトリウム(sodium mercaptoacetate;SMA)およびジピコリン酸(dipicolinic acid:DPA)を用いた微量液体希釈法を比較検討した.DNAの簡易抽出法とED-PCR法の組み合わせは96株単位で臨床分離株からのblaI_(IMP)の検出が可能であった.SMAを用いた微量液体希釈法によるMBL産生菌の検出はPCR法と良好な相関があったが,DPAを用いた場合,SMAと同様の400pg/mLでは偽陽性が見られ175Llg/mLに低下させることで良好な結果が得られた.
机译:在日本发现生产Panza-laSahygena的质粒 - 传递金属β-乳酰胺酶(MBL),目前,来自世界各地的革兰阴性产生MBL是有问题的,在每日痕量液体稀释方法发育中在获得药物敏感性结果的同时确定MBL敏感性的存在或不存在的方法。在1996年至2005年的调查期间,通过在热循环仪中加热裂解,简化了DNA提取和PCR。酶促检测方法的组合方法(ED-PCR方法),正常PCR方法,硫酸钠(巯基乙酸钠; SMA)和二聚体酸(DPA),其是MBL抑制剂的痕量液体稀释方法进行了比较。 DNA的简单提取方法和ED-PCR方法的组合能够以96份的单位检测来自临床分离株的BLAI_(IMP)。通过痕量液体稀释使用SMA检测MBL的细菌与PCR方法具有良好的相关性,但是当使用DPA时,将400pg / ml类似于SMA的阳性并且通过进行效果呈阳性并且降低至175μg/ mL的良好结果。

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