...
首页> 外文期刊>Биотехнология >Получение и очистка рекомбинантного домена III альфа-фетопротеина человека
【24h】

Получение и очистка рекомбинантного домена III альфа-фетопротеина человека

机译:Получение и очистка рекомбинантного домена III альфа-фетопротеина человека

获取原文
获取原文并翻译 | 示例
           

摘要

Ранее была продемонстрирована возможность использования рекомбинантного альфа-фетопротеина или его рецепторсвязывающего домена,несущего на С-конце 6-гистидиновый тег(рАФПЗД-His6),в качестве векторов для адресной доставки противоопухолевых агентов.Эти рекомбинантные белки содержат нежелательную для дальнейших доклинических испытаний последовательность из шести остатков гистидина,в связи с чем появилась необходимость в получении рекомбинантного белка рАФПЗД без этой аффинной метки с последующей оценкой его функциoнальной активности.Белок продуцировался в штамме Escherichia coli BL21(DЕ3)в виде телец включения.Подобраны оптимальные условия отмывки телец включения и рефолдинга целевого белка.Первичную очистку продукта проводили высаливанием примесных белков с использованием насьпценного раствора(NH4)2SO4.На второй стадии очистки проводили гидрофобную хроматографию на колонке с бутил-целлюлозой.Аутентичность структуры подтверждена методом тандемной масс-спектрометрии,а также анализом мотивов вторичной структуры методом кругового дихроизма.Флуоресцентно меченный белок рАФПЗД активно проникал в опухолевые клетки линии MCF7.На основании полученных данных можно сделать вывод о возможности применения рАФПЗД для адресной доставки лекарственных средств.

著录项

获取原文

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号