制备左旋吡喹酮的中间体及左旋吡喹酮的方法

技术领域

本发明涉及药物制备领域，更特别涉及左旋吡喹酮的R-硝基酸中间体和 左旋吡喹酮((R)-praziquantel）的制备方法。

背景技术

吡喹酮又名环吡喹酮，为广谱抗寄生虫病药物。它抗蠕虫谱很广，对日 本血吸虫、埃及血吸虫、曼氏血吸虫等均有杀灭作用。此外，它对并殖吸虫(肺 吸虫)、华支睾吸虫、包虫、囊虫、孟氏裂头蚴、姜片虫、绦虫等也有杀灭作 用。吡喹酮的作用特点是疗效高、疗程短、剂量小、代谢快、毒性小以及口 服方便。吡喹酮的问世是寄生虫病化疗上的一项重大突破，现在已成为治疗 多种寄生虫病的首选药物。

吡喹酮于1975年由Seubere等人首先合成，德国E-merck和Bayer两药 厂成功开发出该种药品。1980年，E-metck公司以商品名Cesol率先上市， 目前已在世界范围内广泛应用。除用于人体外，它也广泛用于动物、家禽等 的抗寄生虫治疗。在传统的吡喹酮生产过程中需要使用一些有毒、有害的化 学物质，如氰化钾、环己亚酚氯等，而且它的工艺路线较长（参见下式），反 应条件也比较苛刻。

最近，科研人员从合成吡喹酮中拆分获得左旋吡喹酮和右旋吡喹酮光学 异构体。并通过临床前和初期临床试验发现：左旋吡喹酮是吡喹酮的有效杀 虫成分，而右旋吡喹酮是无效甚至有害成分；相同剂量下，左旋吡喹酮临床 疗效比吡喹酮更好。尽管世界卫生组织期望用左旋吡喹酮取代吡喹酮，但多 年来左旋吡喹酮化学合成收率低的工艺难题一直悬而未解。

发明内容

为克服现有技术中的上述问题，本发明提供了一种左旋吡喹酮的中间体 及左旋吡喹酮的制备方法，其避免使用剧毒的氰化钾和氰化钠，工艺安全性 大大提高。

本发明采用的技术方案是：本发明一方面提供了一种制备左旋吡喹酮的 中间体的方法，该中间体的化学式如式（4)所示，该方法包括以下步骤：使 式（2）化合物在脂肪酶的作用下在0-80℃的温度下发生水解反应得到式（4） 化合物左旋吡喹酮的R-硝基酸中间体；

该方法为通过脂肪酶立体选择性酯水解法，外消旋的硝基酯[式(2)化合物] 在脂肪酶的作用下发生水解反应得到R-硝基酸中间体[式（4）化合物]，从而 拆分分离出S-硝基酯中间体[式（3）的化合物]。

式（2）的化合物可以直接购买，也可以自己制备，本发明提供了一种制 备式（2）化合物的方法，包括以下步骤：使式（1）化合物与硝基乙酸乙酯 和环己酰氯在溶剂中发生反应得到式（2）的化合物；

优选地，脂肪酶包括但不限于以下种类：来源于黑曲霉(Aspergillus niger)、皱落假丝酵母(Candida cylindracea)、米黑根毛酶(Rhizomucor miehei)、南极假丝酵母(Candida Antarctica)、洋葱假单胞菌(Pseudomonas cepacia)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)、嗜热真菌(Thermomyces lanuginose)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)、腐皮镰刀菌(Fusarium solani pisi)、 产碱杆菌(Alcaligenes sp)、雪白根霉(Rhizopus niveus)、爪哇毛霉(Mucor javanicus)、米根霉(Rhizopus oryzae)以及茄病镰刀菌(Fusarium solani pisi) 的脂肪酶。

优选地，脂肪酶是疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶(SG165400，100u/mg)，或南极 假丝酵母脂肪酶(SG063906，1u/mg)，或皱褶假丝酵母脂肪酶（SG061360， 2u/mg），或洋葱假单胞菌脂肪酶（SG061357，30u/mg），或荧光假单胞菌脂肪 酶(SG075907，40u/mg)，上述脂肪酶可购自广州和为化工有限公司或者其它 商业来源。特别要强调的是只有S构象的硝基酯能同本专利所用脂肪酶反应 形成S-硝基酸中间体。

优选地，上述水解反应中式（2）化合物与脂肪酶的质量投料比为： 100∶0.5～100∶3。

更优选地，上述水解反应在含磷酸缓冲溶液的溶剂中进行。

再优选地，上述水解反应的时间为1～48小时。

本发明另一方面还提供了一种制备左旋吡喹酮的方法，包括以下步骤：

（a）根据前述方法制备式（4）化合物-左旋吡喹酮的中间体；（b）使式 ((4）化合物在有机溶剂中发生脱羧反应得到式（5）化合物；（c）使式（5） 的化合物在有机溶剂中经催化氢化反应得到式（6）化合物；（d）使式（6） 化合物在有机溶剂中与氯乙酰氯发生反应得到式（7）化合物左旋吡喹酮；

其中的步骤（b）和步骤（c），通过一锅法来进行，化合物（4）不稳定， 因而不分离，直接在溶液中脱羧得到化合物（5）。

其中，式（4）化合物的制备如前所述，系通过脂肪酶立体选择性酯水解 法，外消旋的硝基酯[式(12)化合物]在脂肪酶的作用下发生水解反应得到R- 硝基酸中间体[式（4）化合物]，从而拆分分离出S-硝基酯中间体[式（3）的 化合物]。式（4）化合物通过去羧基得到R-硝基中间体[式（5）化合物]，然 后进一步的催化氢化反应形成正光性的关键中间体R-氨基[式（6）化合物7]， 氢化反应采用的体系包括但不限于Ru/C、H₂/Pd-C体系。式（6）化合物和氯 乙酰氯反应就得到终产物左旋吡喹酮。该方法中的外消旋硝基酯的拆分是脂 肪酶的立体选择性酯水解反应形成S-硝基酸中间体来完成的。

同样优选地，上述脂肪酶包括但不限于以下种类：来源于黑曲霉 (Aspergillus niger)、皱落假丝酵母(Candida cylindracea)、米黑根毛酶 (Rhizomucor miehei)、南极假丝酵母(Candida Antarctica)、洋葱假单胞菌 (Pseudomonas cepacia)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)、嗜热真菌 (Thermomyces lanuginose)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)、腐皮镰刀菌 (Fusarium solani pisi)、产碱杆菌(Alcaligenes sp)、雪白根霉(Rhizopus niveus)、爪哇毛霉(Mucor javanicus)、米根霉(Rhizopus oryzae)以及茄病镰刀 菌(Fusarium solani pisi)的脂肪酶。

更优选地，脂肪酶是疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶(SG165400，100u/mg)，或南 极假丝酵母脂肪酶(SG063906，1u/mg)，或皱褶假丝酵母脂肪酶（SG061360， 2u/mg），或洋葱假单胞菌脂肪酶（SG061357，30u/mg），或荧光假单胞菌脂肪 酶(SG075907，40u/mg)，上述脂肪酶均购自广州和为化工有限公司。是否表述 为上述脂肪酶可购自广州和为化工有限公司或者其它商业来源？）。特别要强 调的是只有S构象的硝基酯能同本专利所用脂肪酶反应形成S-硝基酸中间体。

进一步地，在步骤（b)中，该有机溶剂选自DMSO，N-甲基吡咯烷酮， 乙腈，1，4-二氧六环中的一种或几种。

更进一步地，在步骤（c)中，该有机溶剂选自无水甲醇，无水乙醇，乙酸 乙酯，四氢呋喃中的一种或几种。

再进一步地，在步骤（d)中，该有机溶剂选自二氯甲烷，甲基叔丁基醚， 乙酸乙酯中的一种或几种。

与现有技术相比，本发明具有下列优点：该方法是利用脂肪酶的高度立体、 位点、区域选择性、催化化学制备的外消旋体反应，其中R构型硝基酯中间 体发生水解形成R-硝基酸中间体，而S构型的未发生水解反应，从而被分离 出去，再利用该R-硝基酸中间体来制备左旋吡喹酮。拆分法主要用于制备手 性醇、酸、胺、酯、腈、酰胺等化合物。该方法工艺非常简单、原料易得、成 本较低。简化和优化并可以大规模生产左旋体吡喹酮，产品纯度可达到>98％， 提升了质量标准，为创制优质原料药和制剂打下基础，由此解决了近30年来 悬而未解的纯化吡喹酮工业难题。本发明采用生物酶催化的核心技术，开发 了高收率的手性合成左旋吡喹酮的工艺，为进一步进行临床前和临床成药性 评价，大规模产业化生产左旋吡喹酮并进入国际市场铺平了道路。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步详细的说明，但本发明并不限于 以下实施例。

实施例1

本实施例提供一种左旋吡喹酮的R-硝基酸中间体及左旋吡喹酮的的制备 方法，具体包括以下化合物的制备。

I、式（2）化合物的制备

将异喹啉（42.62g，0.33mol）和氯化锂（6.99g，0.165mol，0.5eq）及硝 基乙酸乙酯（65.88g，0.495mol，1.5eq）加入300mL乙腈中，在激烈搅拌下 将环己酰氯（53.21g，0.363mol，1.1eq）滴加到上述混合溶液中，保持反应 混合物温度不超过25度。滴加完毕后，在室温下继续搅拌8-12小时。HPLC 检测原料反应完全，反应混合物减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析（乙酸乙酯∶ 正己烷=1∶20）得到105.6g油状产物，即式（2）的化合物，收率达86％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ(ppm）：1.28-1.31(t，3H，CH₃)，1.49-1.86(m，1 0H，5xCH₂)，3.71-3.78（1H，m，CH），4.19-4.24(m，2H，-CH₂CH₃)，5.15(d，1H，C H)，5.37(d，1H，CH)，6.06(d，1H，CH)，6.60(d，1H，CH)，6.85-7.28(m，4H，ArH)。

II、式（7）化合物左旋吡喹酮的制备

（一）制备式（5）化合物

((i）利用嗜热真菌脂肪酶【疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶(SG165400，100u/mg， 购自广州和为化工有限公司】制备式（5）化合物

①将式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉（3.72g，10mmol）和正辛烷（3.72g， 30mmol）溶于DMSO（20mL）中，然后在室温搅拌下将此溶液加入到磷酸缓 冲溶液（40mL，pH7.8）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入疏棉状嗜 热丝孢菌脂肪酶粉SG165400（2mg，100u/mg）启动反应；在室温下搅拌16 小时，水解达60％时停止反应。经快速色谱分离纯化得到1.23g产物，即式 ((5）的化合物，收率41％，ee值96％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78(m，1H，CH)，4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

②将式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉（3.72g，10mmol）和正辛烷（3.72g， 30mmol）溶于N-甲基吡咯烷酮（20mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到 磷酸缓冲溶液（40mL，pH7.8）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入疏 棉状嗜热丝孢菌脂肪酶粉SG165400（1mg，100u/mg）启动反应；在50℃下搅 拌30小时，水解达51％时停止反应。经快速色谱分离纯化得到0.96g产物， 即式（5）化合物，收率32％，ee值91％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78(m，1H，CH)，4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

③将式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉（3.72g，10mmol）和正辛烷（3.72g， 30mmol）溶于DMSO（20mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到磷酸缓冲溶 液（40mL，pH7.8）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入疏棉状嗜热丝 孢菌脂肪酶粉SG165400（4mg，100u/mg）启动反应；在75℃下搅拌4小时， 水解达51％时停止反应。经快速色谱分离纯化得到1.2g产物，即式（5）化 合物，收率40％，ee值99％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78(m，1H，CH)，4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

（ii）利用来源于皱落假丝酵母的脂肪酶（SG061360，2u/mg，购自广州 和为化工有限公司)，制备式（5）化合物

①式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉（1.86g，5mmol）和正辛烷（1.86g， 15mmol）溶于DMSO（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到磷酸缓冲溶 液（20mL，pH7.3）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入脂肪酶粉（9mg， 2u/mg）启动反应。在室温下搅拌48小时，水解达31％时停止反应。经快速 色谱分离纯化得到0.42g产物，即式（5）化合物，收率为28％，ee值73％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm）：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71 -3.78(m，1H，CH)，4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

②式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉（1.86g，5mmol）和正辛烷（1.86g， 15mmol）溶于乙腈（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到磷酸缓冲溶液 ((20mL，pH7.3）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入脂肪酶粉（30mg， 2u/mg）启动反应。在50℃下搅拌24小时，水解达50％时停止反应。经快速 色谱分离纯化得到0.675g产物，即式（5）化合物，收率为45％，ee值91％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm）：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71 -3.78(m，1H，CH)，4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

③式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉（1.86g，5mmol）和正辛烷（1.86g， 15mmol）溶于DMSO（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到磷酸缓冲溶 液（20mL，pH7.3）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入脂肪酶粉（50mg， 2u/mg）启动反应。在75℃下搅拌16小时，水解达48％时停止反应。经快速 色谱分离纯化得到0.57g产物，即式（5）化合物，收率为38％，ee值87％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm）：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71 -3.78(m，1H，CH)，4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

（iii）利用来源于洋葱假单胞菌的脂肪酶（SG061357，30u/mg，购自广州 和为化工有限公司），制备式（5）化合物

①式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉化合物（1.86g，5mmol）和正辛烷 （1.86g，15mmol）溶于DMSO（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到 磷酸缓冲溶液（20mL，pH7.0）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入脂 肪酶粉（3mg，30u/mg）启动反应。在0℃下搅拌36小时，水解达34％时停 止反应。经快速色谱分离纯化得到产物，即式（5）化合物0.39g收率26％， ee值68％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78(m，1H，CH)，4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

②式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉化合物（1.86g，5mmol）和正辛烷 ((1.86g，15mmol）溶于1，4-二氧六环（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液 加入到磷酸缓冲溶液（20mL，pH7.0）中得到混合溶液；向上述混合溶液中 加入脂肪酶粉（10mg，30u/mg）启动反应。在室温下搅拌20小时，水解达 48％时停止反应。经快速色谱分离纯化得到产物，即式（5）化合物0.645g收 率43％，ee值88％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78(m，1H，CH)，4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

③式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉化合物（1.86g，5mmol）和正辛烷 ((1.86g，15mmol）溶于DMSO（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到 磷酸缓冲溶液（20mL，pH7.0）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入脂 肪酶粉（20mg，30u/mg）启动反应。在50℃下搅拌6小时，水解达49％时停 止反应。经快速色谱分离纯化得到产物，即式（5）化合物0.645g收率43％， ee值88％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78(m，1H，CH)，4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

（iv）利用荧光假单胞菌的脂肪酶（SG075907，40u/mg，购自广州和为化 工有限公司)，制备式（5）化合物

①将式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉（1.86g，5mmol）和正辛烷（1.86g， 15mmol）溶于DMSO（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到磷酸缓冲溶 液（20mL，pH7.2）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入脂肪酶粉（3mg， 40u/mg）启动反应；在室温下搅拌36小时，水解达46％时停止反应。经快速 色谱分离纯化得到产物，即式（5）化合物0.525g，收率达35％，ee值80％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78（m，1H，CH），4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

②将式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉（1.86g，5mmol）和正辛烷（1.86g， 15mmol）溶于N-甲基吡咯烷酮（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到 磷酸缓冲溶液（20mL，pH7.2）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入脂 肪酶粉（10mg，40u/mg）启动反应；在50℃下搅拌13小时，水解达48％时 停止反应。经快速色谱分离纯化得到产物，即式（5）化合物0.465g，收率达 31％，ee值97％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78（m，1H，CH），4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

③将式（2）化合物硝甲烷乙酯异喹啉（1.86g，5mmol）和正辛烷（1.86g， 15mmol）溶于DMSO（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到磷酸缓冲溶 液（20mL，pH7.2）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入脂肪酶粉（20mg， 40u/mg）启动反应；在75℃下搅拌3小时，水解达53％时停止反应。经快速 色谱分离纯化得到产物，即式（5）化合物0.39g，收率达26％，ee值69％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78（m，1H，CH），4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

（v）利用南极假丝酵母脂肪酶(SG063906，1u/mg，购自广州和为化工有 限公司)，制备式（5）化合物

①式（2）的化合物硝甲烷乙酯异喹啉（1.86g，5mmol）和正辛烷（1.86g， 15mmol）溶于N-甲基吡咯烷酮（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到 磷酸缓冲溶液（20mL，pH7.2）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入脂 肪酶粉（18mg，1u/mg）启动反应；在0℃下搅拌48小时，水解达36％时停 止反应。经快速色谱分离纯化得到0.48g产物，即式（5）化合物，收率达32％， ee值93％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78（m，1H，CH），4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

②式（2）的化合物硝甲烷乙酯异喹啉（1.86g，5mmol）和正辛烷（1.86g， 15mmol）溶于DMSO（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到磷酸缓冲溶 液（20mL，pH7.2）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入脂肪酶粉（39mg， 1u/mg）启动反应；在室温下搅拌48小时，水解达50％时停止反应。经快速 色谱分离纯化得到0.57g产物，即式（5）化合物，收率达38％，ee值95％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78（m，1H，CH），4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

③式（2）的化合物硝甲烷乙酯异喹啉（1.86g，5mmol）和正辛烷（1.86g， 15mmol）溶于乙腈（10mL）中，然后在搅拌下将此溶液加入到磷酸缓冲溶液 ((20mL，pH7.2）中得到混合溶液；向上述混合溶液中加入脂肪酶粉（55mg， 1u/mg）启动反应；在50℃下搅拌35小时，水解达50％时停止反应。经快速 色谱分离纯化得到0.63g产物，即式（5）化合物，收率达42％，ee值96％。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz，δppm)：1.49-1.86(m，10H，5xCH₂)，3.71- 3.78（m，1H，CH），4.42(dd，1H，CH₂)，4.74(dd，1H，CH₂)，5.38(dd，1H， CH)，6.01(d，1H，CH=CH)，6.58(dd，1H，CH=CH)，6.99-7.12(m，4H，Ar H)。

（二）制备式（6）化合物

①向密闭容器中加入式（5）化合物（3g，0.01mol）、无水甲醇（60mL） 及含钌5％催化剂Ru/C（0.2g），氢气置换容器内空气后，通入氢气（1.5Mpa）， 升温至35-45℃，搅拌反应6-8小时，检测反应完全，过滤回收催化剂；反应 液经减压浓缩，剩余物经快速色谱分离纯化得到固体式（6）化合物，经乙醚 /正己烷重结晶得到2.4g淡黄色晶体纯品，即式（6）化合物，收率达86％， 熔点111-112度，ee值大于99％。

1H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.16-1.27(m，4H，CH₂)，1.35-1.47(m， 2H，CH₂)，1.64-1.85(m，4H，CH₂)，2.73-2.85(m，2H，CH₂)，3.03-3.06 (m，1H，CH₂)，3.13-3.18(m，1H，CH₂)，3.32-3.37(m，1H，CH₂)，3.52-3. 62(m，1H，CH₂)，3.73-3.81(m，1H，CH₂)，4.10(dd，1H，CH)，6.30(br s， 1H，NH)，7.08-7.20(m，4H，Ar-H)，MS(ESI，+ve)：m/z：273[M+H] ⁺。

②向密闭容器中加入式（5）化合物（3g，0.01mol）、无水乙醇（60mL） 及含钯10％催化剂Pd/C（0.3g），氢气置换容器内空气后，通入氢气（3Mpa）， 升温至45-50℃，搅拌反应12小时，检测反应完全，过滤回收催化剂；反应 液经减压浓缩，剩余物经快速色谱分离纯化得到固体式（6）化合物，经乙醚 /正己烷重结晶得到0.22g淡黄色晶体纯品，即式（6）化合物，收率达81％， 熔点111-112℃，ee值大于99％。

1H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.16-1.27(m，4H，CH₂)，1.35-1.47(m， 2H，CH₂)，1.64-1.85(m，4H，CH₂)，2.73-2.85(m，2H，CH₂)，3.03-3.06 (m，1H，CH₂)，3.13-3.18(m，1H，CH₂)，3.32-3.37(m，1H，CH₂)，3.52-3. 62(m，1H，CH₂)，3.73-3.81(m，1H，CH₂)，4.10(dd，1H，CH)，6.30(br s， 1H，NH)，7.08-7.20(m，4H，Ar-H)，MS(ESI，+ve)：m/z：273[M+H] ⁺。

（三）制备式（7）化合物左旋吡喹酮

①将式（6）化合物（0.27g，1mmol）溶于二氯甲烷（20mL）中，再向 二氯甲烷溶液中加入50％质量分数的氢氧化钠溶液（0.48mL，6mmol），随后 滴加氯乙酰氯（0.13g，1.1mmol）溶于10mL二氯甲烷中的溶液，反应混合物 温度控制在室温；加完继续搅拌1小时，HPLC检测反应完全；向反应混合 物中加入催化剂苄基三乙基氯化铵（22.7mg，0.1mmol），加热至回流反应4-5 小时，HPLC检测反应完全；反应混合物倒入10毫升冰水中，以二氯甲烷萃 取（10mLx2）有机相水洗（2x2mL），5％HCl（2mL）洗涤，再水洗（2mL）， 无水硫酸钠干燥，有机相旋转蒸发去除溶剂，剩余物经硅胶柱层析（氯仿/甲 醇=98∶2）得到0.25g目标产物左旋吡喹酮，即式（7）化合物，收率达80％， 熔点113-115度，ee值99％。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.21-1.96(m，10H，5xCH₂)，2.45-2.50(m， 1H，CH)，2.78-3.05(m，4H，CH₂)，4.10(d，1H，CH₂)，4.48(d，1H，CH₂)， 4.79-4.85(m，2H，CH₂)，5.20(d，1H，CH)，7.12-7.30(m，4H，Ar-H).MS(ESI， +ve)：m/z：313[M+H]⁺。

②将式（6）（8.1g，30mmol）溶于甲基叔丁基醚（100mL）中，再向甲 基叔丁基醚溶液中加入50％质量分数的氢氧化钠溶液（14.5mL，180mmol）， 随后滴加氯乙酰氯（3.9g，33mmol）溶于20mL甲基叔丁基醚中的溶液，反 应混合物温度控制在室温；加完继续搅拌1小时，HPLC检测反应完全；向 反应混合物中加入催化剂苄基三乙基氯化铵（0.68g，3mmol），加热至回流反 应7-8小时，HPLC检测反应完全；反应混合物倒入200毫升冰水中，以甲基 叔丁基醚萃取（100mLx2）有机相水洗（2x60mL），5％HCl（60mL）洗涤， 再水洗（60mL），无水硫酸钠干燥，有机相旋转蒸发去除溶剂，剩余物经硅 胶柱层析（氯仿/甲醇=98∶2）得到7.6g目标产物左旋吡喹酮，即式（7）化 合物，收率达81％，熔点113-115度，ee值99％。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.21-1.96(m，10H，5xCH₂)，2.45-2.50(m， 1H，CH)，2.78-3.05(m，4H，CH₂)，4.10(d，1H，CH₂)，4.48(d，1H，CH₂)， 4.79-4.85(m，2H，CH₂)，5.20(d，1H，CH)，7.12-7.30(m，4H，Ar-H).MS(ESI， +ve)：m/z：313[M+H]⁺。

以上对本发明的特定实施例进行了说明，但本发明的保护内容不仅仅限 定于以上实施例，在本发明的所属技术领域中，只要掌握通常知识，就可以 在其技术要旨范围内进行多种多样的变更。