一种诱导烟草产生对白粉病抗性的植物提取物及制备方法

技术领域

本发明涉及植物病虫害绿色生态防治技术领域，尤其涉及一种诱 导烟草产生对白粉病抗性的植物提取物及制备方法。

背景技术

烟草白粉病俗称“上灰”、“下霜”、“上硝”。该病多为害成 熟老叶，由下向上发展。叶片发病，初为近圆形的黄褐色小斑，后斑 上现白色粉状小点，使病斑呈毯状，斑块扩大，白粉布满整个叶片， 病叶先褪绿变褐，后枯死。严重时为害嫩茎，病茎上也布满白粉。病 叶烘烤后薄如纸，色暗锈褐色，丧失经济价值。中国各烟区均有发生， 其中以华南、西南和华中烟区最为普遍，危害也较重。

病原为烟草白粉病菌，属子囊菌亚门，核菌纲，白粉菌目，白粉 菌属。苗期和成株期均可发生。

烟草白粉病由半知菌亚门的烟草粉孢菌侵染所引起。其有性态则 归入子囊菌亚门的二孢白粉菌，但有性态很少发现。病菌菌丝具分隔， 无色。无性态的分生孢子梗与菌丝垂直，丝状，较短，无分枝，大小 约80～120×12～14微米，顶生分生孢子。分生孢子串生，由上而下顺 次成熟，无色，单胞，圆筒形，大小为30～32×13～15微米。病菌生 长适温22℃～28℃。分生孢子萌发最适温度23℃～25℃，最适相对湿 度60％～80％。在相对湿度20％以下仍有少数孢子可以萌发，但在相对 湿度100％或水滴中却极少能萌发。病菌属专性外寄生菌，全部菌丝 体长在寄主表面，以吸胞伸入寄主表皮细胞内吸取养分。病菌存在生 理分化现象，有许多不同致病型的生理小种，它们对不同寄主的致病 力差异很大。病菌寄主范围广，除烟草外，还能侵染葫芦科、菊科等 100多种植物。

目前的防治方法主要有：

(1)选用抗病品种

(2)摘除染病脚叶

白粉病的发生自烟株下部较成熟的叶片开始，自下而上蔓延，烟 农为了减少损失，往往将下部侵染白粉病的未成熟叶提前采烤，大大 减少了田间传染病源，对降低病情上升率有很好抑制作用。在烘烤过 程中，吊黄后直接进入干筋期温度，避免了定色期棕色反应。勿在低洼 地、连作地种烟；整治排灌系统，实行高畦深沟栽培，雨后及时排除 积水；配方施肥(N：P：K=1：2：3或1：2：2)，适时喷施叶面营养 剂。

(3)药剂防治

20％粉锈宁可湿粉1000～1500倍液，70％托布津+75％百菌清可湿粉 (1：1)1000～1500倍液，50％退菌特可湿粉600倍液，40％三唑酮多 菌灵可湿粉1000倍液，50％三唑酮硫磺悬浮剂800～1000倍液，或45％ 三唑酮福美双可湿粉800～1000倍液，在植株封行时开始，连喷2～3 次，隔7～10天一次，交替施用，喷匀喷足。

(4)绑杆上炕前喷施甲基托布津

白粉病分生孢子发芽最高温度为32℃，烘烤时变黄温度未超过 32℃时，病害可继续发展，往往1级病叶(病斑面积占叶面积5％以 下)进入烤房后，病斑仍继续扩大，甚至布满全叶。绑杆上炕前对病叶 喷施甲基托布津，能有效抑制病斑的扩展蔓延。

(5)烟田积水

往往造成田间湿度大，利于病害流行，应采取高起垄栽培，经常保 持水沟通畅，及时排除田间积水。

(6)及时采烤脚叶

改善田间光照、通风条件，降低田间湿度，减少病害蔓延。

以上防治方法虽然能在一定程度上防治烟草白粉病的发生和蔓 延，但是效果不是很理想，并且也不能从根本上杜绝烟草白粉病的发 生。

植物中的天然活性物质是具有生物活性的天然宝库，具有可产生 超过40万种的次生代谢产物，许多代谢产物具有抗菌活性，并具有 诱导植株产生诱导抗性的功能，且来源于自然，对人、畜安全，无污 染，成为当今新型杀菌剂和诱导抗性剂研究的热点。近几年来，国内 外许多学者对一些植物的抗菌、诱导抗性做了深入的调查和研究，红 葱为鸢尾科红葱属植物，广泛分布于广西、云南。性苦、凉，鳞茎、 全草可入药。

植物拥有丰富的天然活性化合物，目前，国内外对植物源抑菌剂 的研究较多。植物杀菌剂来源于自然、安全、无污染已成为当今新型 杀菌剂创制研究的热点。其结构类型涉及萜类、生物碱类、黄酮类等 化合物。但是对植物可能产生的诱导抗性的研究才刚刚开始，本研究 发明第一次印证了红葱在烟草植物上产生的诱导抗性活性。

发明内容

本发明发现红葱提取物能够诱导烟草植株产生对白粉病抗性，从 而避免烟草发生白粉病。

本发明采用如下技术方案：

本发明的诱导烟草产生对白粉病抗性的植物提取物是红葱提取 物。

该植物提取物还包括皂角提取物和水。

该植物提取物中红葱和皂角的重量比为1-10：2。

优选：2-5：2。

更优选：3：2。

该植物提取物中红葱、皂角和水的重量比为1-10：2：2-10。

优选：2-5：2：3-7。

更优选：3：2：5。

制备本发明的植物提取物的方法如下：

(1)红葱提取物的制备，将红葱全株晾干，粉碎，用甲醇按1：5浸提 两次，过滤，滤液在30℃以下用旋转蒸发仪减压浓缩，得浸膏，低 温保存备用；

(2)皂角提取物的制备，将皂角的果实晾干，粉碎，用甲醇按1：5 浸提两次，过滤，滤液在30℃以下用旋转蒸发仪减压浓缩，得浸膏， 低温保存备用；

(3)混配，在使用时让步骤(1)和步骤(2)制备的红葱提取物和 皂角提取物加入水，按配比混合均匀即可使用。

本发明的积极效果如下：

本发明发现红葱提取物能够诱导烟草植株产生对白粉病抗性，所 以可以预防和防止烟草产生白粉病，能够从根本上解决白粉病对烟草 的困扰，不仅安全环保，而且具有巨大的经济意义。

具体实施方式

下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。

实施例1

1实验准备

1.1测试菌株

病原为烟草白粉病

1.2诱导抗性植物组合

红葱，皂角。

1.3仪器

超声波清洗器HS-10260D，旋转蒸发仪R-215()，电子天 平AL204-IC(梅特勒-托利多仪器有限公司)，三用紫外分析仪 WFH-203(上海精科实业有限公司)，HPLC分析仪(Waters)，超净工 作台SW-CJ-IF(苏净集团安泰公司制造)，全自动高压灭菌锅 MLS-2420(SANYO Electric Co，Ltd.)，电热恒温培养箱DHP-360(北 京市永光明医疗仪器厂)。

2红葱提取物的诱导抗性活性

2.1植物活性物质的提取

将红葱全株晾干，粉碎。称取500g用甲醇按1：5浸提两次，过滤。 滤液在30℃以下用旋转蒸发仪减压浓缩，得浸膏，低温保存备用。

将皂角的果实晾干，粉碎。称取500g用甲醇按1：5浸提两次，过 滤。滤液在30℃以下用旋转蒸发仪减压浓缩，得浸膏，低温保存备 用。

2.2诱导抗性活性测定

实验室采用盆栽法，田间直接喷施于烟田烤烟植株。测定样品对 烟草植株产生诱导抗性以后，对白粉病发病的抑制作用。

实验室盆栽法：将红葱粗提物用水溶解，配制为20mg／mL的样品 溶液，以纯水空白对照，每个样品设3个重复。用病斑面积率，计算 诱导抗性抑制率(％)，并对数据进行统计分析。按下式计算抑制率：

诱导抗性活性效果(％)=(对照病斑面积-处理病斑面积)／对照病 斑面积×100

阳性对照采用75％百菌清可湿性粉剂(WP)：用水溶解，配制为 20mg／mL的阳性对照液。

田间诱导抗性效果：把红葱提取物、皂角提取物和水按照1：2：7、 3：2：5、5：2：3的比例混合，用喷雾器喷施于13片叶的烟草植株，10 天之后调查诱导抗性的效果。

2.3诱导抗性活性结果

实验室的测定结果表明，红葱具有明显的对烟草白粉病的诱导抗 性活性效果。

表1：红葱提取物对烟草白粉病的诱导抗性活性作用

注：表中数据为3次重复平均值。

2.4诱导抗性田间应用效果

田间测定结果表明，红葱具有明显的对烟草白粉病的诱导抗性活 性效果。考虑成本等因素，红葱与皂角的比例以3：2混合的作为最适 合配比。

表2：植物提取物对烟草白粉病的诱导抗性活性作用

注：表中数据为3次重复平均值。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术 人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这 些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权 利要求及其等同物限定。