具有抗肿瘤活性的紫杉酚衍生物

具体实施方式

现在通过参考例和实施例更详细地说明本发明，但应理解本发明并不限于此。本发明合成路线：

第一步

9β-10-脱乙酰基-9-二氢浆果赤霉素III

氩气氛下，向一个250ml的干燥的三颈烧瓶中加入10-脱乙酰基浆果赤霉素III A(1.4g，2.57mmol，1.0eq)，再加入无水二氯甲烷(40ml)和无水1，4-二氧六环(40ml)的混合溶剂，保持体系温度25℃～30℃，搅拌下加入硼氢化叔丁基铵(2.65g，0.3mmol，4.0eq)，继续搅拌19h后。点板(乙酸乙酯∶甲醇＝40∶1)跟踪反应，原料消失。在冰盐浴下用1N盐酸溶液调pH值至6，迅速加入水，彻去冰水浴，室温下搅拌0.5～1h。用乙酸乙酯萃取反应液(100ml×4)，合并有机相，再分别用蒸馏水洗(25ml×1)，饱和氯化钠溶液洗(25ml×1)，乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥过夜，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法纯化所得残余物(淋洗剂：正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇＝15∶25∶1)得到标题化合物9β-10-脱乙酰基-9-二氢浆果赤霉素III B(1.2g，类白色固体)。产率：85％。

Rf＝0.42(乙酸乙酯∶甲醇＝40∶1(v/v))。

MW＝546，ESI-MS：[M+H]⁺＝547。

¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ8.11-7.4(m，5H，Ar-H)，6.1(d，J＝5.3Hz，1H，C₂-H)，5.1(d，J＝5.7Hz，1H，C₁₀-H)，5.0(d，J＝8.9Hz，1H，C₅-H)，4.8(b，1H，C₁₃-H)，4.6-4.5(d，J＝5.7Hz，1H，C₉-H)，4.3-4.2(d，J＝7.7Hz，1H，C₂₀-H_α)，4.2-4.1(d，J＝7.7Hz，1H，C₂₀-H_β)，3.9(dd，J＝7.3Hz，J’＝9.7Hz，1H，C₇-H)，3.3-3.2(d，J＝4.9Hz，1H，C₃-H)，2.6-2.4(m，1H，C₆-H_α)，2.4-2.3(m，1H，C₁₄-H_α)，2.3-2.2(m，1H，C₁₄-H_β)，2.2(s，3H，Ac-CH₃)，1.9(s，3H，C₁₈-H)，1.9-1.8(m，1H，C₆-H_β)，1.7(s，3H，C₁₆-H)，1.6(s，3H，C₁₉-H)，1.2(s，3H，C₁₇-H).

第二步

9β-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)浆果赤霉素III

氩气氛下，将上述第一步得到的化合物9β-10-脱乙酰基-9-二氢浆果赤霉素III B(1.2g，2.20mmol，1.0eq)悬浮于无水二氯甲烷(60ml)中，搅拌下，于室温向所得溶液中加入丙烯醛缩二乙醇(1.68ml，11.0mmol，5.0eq)，再加入二茂基二氯化钛(0.05g，0.22mmol，0.2eq).保持温度在24～28℃，继续搅拌18h后，点板(乙酸乙酯∶甲醇＝40∶1)跟踪反应，原料基本消失(有时还有少量原料)。滴加三乙胺(调至pH值至7)淬灭反应。减压旋蒸除去溶剂，用硅胶柱色谱法纯化所得残余物(淋洗剂：正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到标题化合物9β-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)浆果赤霉素III C(0.979g，类白色固体)。产率：75.9％。

Rf＝0.44(淋洗剂：正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1(v/v))。

MW＝584，ESI-MS：[M+H]⁺＝585。

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.2-7.4(m，5H，Ar-H)，6.2-5.9(m，1H，CH₂＝CH-H)，6.1-6.0(d，J＝5.7Hz，1H，C₂-H)，5.6-5.5(d，J＝17.4Hz，1H，trans-CH₂＝CH-)，5.5-5.4(d，J＝10.9Hz，1H，cis-CH₂＝CH-)，5.3(d，J＝7.3Hz，1H，C₁₀-H)，5.2(d，J＝6.1Hz，1H，C₅-H)，5.1(s，1H，OH)，4.8(b，1H，C₁₃-H)，4.6(d，J＝8.1Hz，1H，CH₂＝CH-)，4.4(d，J＝8.5Hz，1H，C₂₀-Hα)，4.3(d，J＝8.5Hz，1H，C₂₀-H_β)，4.1(m，1H，C₇-H)，3.9(d，J＝6.9Hz，1H，C₉-H)，3.1-3.0(d，J＝5.3Hz C₃-H)，2.4-2.3(m，1H，C₆-H_α)，2.4-2.3(s，3H，Ac-CH₃)，2.3-2.1(m，2H，C₁₄-H)，2.0-1.9(m，1H，C₆-H_β)，1.9(s，3H，C₁₈-H)，1.8(s，OH)，1.7-1.6(s，3H，C₁₆-H)，1.6(s，3H，C₁₉-H)，1.3-1.2(s，OH)，1.2(s，3H，C₁₇-H).

第三步

9β-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)-7-O-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III

氩气氛下，在一个500ml的干燥的三颈烧瓶中加入上述第二步得到的化合物9β-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)浆果赤霉素III C(2.298g，3.93mmol，1.0eq)，溶解在无水二氯甲烷(378ml)中，干冰-丙酮浴冷却，搅拌下加入2，6-二叔丁基吡啶(1.27g，5.62mmol，1.56eq)，保持体系温度为-78℃，小心滴入三乙基硅三氟甲磺酸酯(1.38ml，6.13mmol，1.56eq)。滴加完毕后，继续在-78℃反应40min，点板(正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)跟踪反应，原料消失，向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(50ml)淬灭反应，撤去干冰-丙酮浴，自然升温至室温，分出有机相，水相用乙酸乙酯萃取(100ml×4)，合并有机相，有机相用饱和氯化钠溶液洗(25ml×1)，无水硫酸钠干燥过夜，过滤，滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱法纯化所得残余物(淋洗剂：正己烷∶乙酸乙酯＝3∶1)，得到标题化合物9β-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)-7-O-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III D(2.208g，泡沫状固体，或者蜡状固体)。产率：80.8％。

Rf＝0.49(正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1(V/V))。

MW＝698，ESI-MS：[M+H]⁺＝699。

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.2-7.4(m，5H，Ar-H)，6.3-6.1(m，1H，CH₂＝CH-H)，5.9(d，J＝5.3Hz，1H，C₂-H)，5.6-5.5(d，J＝17.8Hz，1H，trans-CH₂＝CH-)，5.5-5.4(d，J＝10.7Hz，1H，cis-CH₂＝CH-)，5.4-5.3(d，J＝8.5Hz，1H，C₁₀-H)，5.1(d，J＝6.1Hz，1H，C₅-H)，4.9-4.7(m，1H，C₉-H)，4.8-4.7(b，1H，C₁₃-H)，4.6(b，1H，OH)，4.4-4.3(d，AB-type，J＝8.5Hz，2H，C₂₀-H)，4.0-3.9(m，1H，C₇-H)，3.2(d，J＝5.3Hz，1H，C₃-H)，2.3(s，3H，Ac-CH₃)，2.5-2.0(m，4H，C₆-H，C₁₄-H)，2.0-1.9(s，1H，C₁₈-H)，1.8-1.7(s，1H，OH)，1.6(s，3H，C₁₆-H)，1.6-1.5(s，3H，C₁₉-H)，1.1(s，3H，C₁₇-H)，1.1-0.9(t，J＝7.7Hz，9H，SiCH₂CH₃)，0.7-0.6(q，J＝7.7Hz，6H，SiCH₂CH₃).

第四步

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(三乙基甲硅烷氧基)-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)-7-O-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III

氩气氛下，将上述第三步得到的化合物9β-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)-7-O-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III D(1.85g，2.65mmol，1.0eq)溶于无水四氢呋喃(68.5ml)中，冷却至-55℃，缓慢搅拌下，滴加六甲基二硅基胺锂的无水四氢呋喃溶液(4ml，1M/L，1.5eq)，继续在-55C下搅拌0.5h，滴加(3R，4R)-1-(叔丁氧羰基)-3-(三乙基甲硅烷氧基)-4-苯基氮杂环丁-2-酮(3.02g，8.0mmol，3.0eq)的无水四氢呋喃(21.5ml)溶液。滴加完毕后，撤去干冰-丙酮浴，改用冰盐浴，继续搅拌0.5～1h。向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(180ml)淬灭反应。反应液用乙酸乙酯萃取(180ml×4)，合并有机相，有机相用饱和氯化钠溶液洗(50ml×1)，无水硫酸钠干燥过夜，过滤，滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱法纯化所得残余物(淋洗剂：正己烷∶乙酸乙酯＝8∶1)，得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(三乙基甲硅烷氧基)-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)-7-O-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III E(2.432g，类白色固体)。产率：85.6％。

Rf＝0.34(正己烷∶乙酸乙酯＝8∶1(V/V))。

MW＝1075，ESI-MS：[M+H]⁺＝1076。

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.2-7.2(m，10H，Ar-H)，6.3-6.0(m，2H)，5.9(d，J＝5.3Hz，1H，C₂-H)，5.6-5.5(d，J＝17.5Hz，1H，trans-CH₂＝CH-)，5.5-5.4(d，J＝10.4Hz，1H，cis-CH₂＝CH-)，5.6-5.4(m，1H，C₉-H)，5.3-5.2(d，J＝9.1Hz，1H，C₁₀-H)，5.1-5.0(d，J＝5.9Hz，1H，C₅-H)，4.9-4.8(m，1H)，4.6(d，J＝8.8Hz，1H)，4.6-4.5(b，1H，OH)，4.5-4.3(d，AB-type，J＝8.5Hz，2H，C₂₀-H)，4.0-3.9(dd，1H，J＝5.1Hz，J’＝10.5Hz)，3.2(d，J＝5.6Hz，1H)，2.5(s，3H，Ac-CH₃)，2.5-2.0(m，5H)，1.8(s，3H)，1.6-1.5(s，12H，t-Bu，CH₃)，1.4-1.3(s，3H)，1.3-1.2(s，3H)，1.1-0.9(t，J＝7.8Hz，9H)，0.8-0.7(t，J＝8.0Hz，9H)，0.7-0.6(m，6H)，0.5-0.3(m，6H).

第五步

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)浆果赤霉素III

氩气氛下，在一个100ml的干燥的三颈烧瓶中加入上述第四步得到的化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(三乙基甲硅烷氧基)-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)-7-O-三乙基甲硅烷基浆果赤霉素III E(0.819g，0.761mmol，1.0eq)，溶解在无水四氢呋喃(10ml)中。在冰盐浴下，搅拌滴加三水合四丁基氟化铵(0.96g，3.04mmol，4.0eq)的无水四氢呋喃(10ml)溶液，反应0.5h后，向三颈烧瓶中倒入饱和氯化钠溶液(40ml)和乙酸乙酯(40ml)，用乙酸乙酯萃取反应液(100ml×4)。合并有机相，无水硫酸钠干燥过夜，过滤，滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱法纯化所得残余物(淋洗剂：正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇＝25∶15∶1)，得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)浆果赤霉素III

F(0.596g，类白色固体)。产率92.4％。

Rf＝0.38(正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇＝25∶15∶1(V/V))。

MW＝847，ESI-MS：[M+H]⁺＝848。

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.2-7.2(m，10H，Ar-H)，6.2-5.9(m，3H)，5.7-5.6(d，J＝9.9Hz，1H)，5.6-5.5(d，J＝16.9Hz，1H，trans-CH₂＝CH-)，5.5-5.4(d，J＝10.5Hz，1H，cis-CH₂＝CH-)，5.4-5.2(m，1H)，5.3(d，J＝7.2Hz，1H)，5.2(d，J＝6.4Hz，1H，CH₂＝CH-)，5.1(b，1H，OH)，4.7-4.6(b，1H)，4.6-4.5(d，J＝7.8Hz，1H)，4.4-4.2(dd，AB-type，J＝8.6Hz，2H，C₂₀-H)，4.2(b，1H)，4.1(m，1H)，3.9-3.8(d，J＝7.0Hz，1H)，2.9(d，J＝4.8Hz，1H)，2.4-2.3(dd，J＝9.8Hz，J’＝15.2Hz，1H)，2.3(s，3H，Ac-CH₃)，2.3-2.0(m，3H)，1.9(s，1H)，1.7(s，3H，CH₃)，1.6(s，3H，CH₃)，1.6-1.5(s，3H，CH₃)，1.4(s，9H，t-Bu)，1.3(s，3H，CH₃)。

第六步

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2，3-二羟基亚丙基)浆果赤霉素III

氩气氛下，在一个100ml的三颈烧瓶中加入上述第五步得到的化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-亚丙烯基)浆果赤霉素III F(0.596g，0.703mmol，1.0eq)，于室温下加入N-甲基-吗啉-N-氧化物(0.412g，3.51mmol，5.0eq)，溶解在四氢呋喃(15ml)、丙酮(15ml)及蒸馏水(15ml)的混合溶剂中，搅拌下，加入四氧化锇的叔丁醇(0.725ml，35.7mg，0.2eq)溶液，28℃下反应过夜，用10％的硫代硫酸钠(90ml)溶液淬灭反应，并搅拌10min，反应液用乙酸乙酯萃取(100ml×3)，合并有机相，用饱和碳酸氢钠溶液洗(25ml×1)，饱和氯化钠溶液洗(25ml×1)，无水硫酸钠干燥过夜，过滤，滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱法纯化所得残余物(淋洗剂：二氯甲烷∶甲醇＝20∶1)，得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2，3-二羟基亚丙基)浆果赤霉素III G(0.610g，类白色固体)。产率：98％。

Rf＝0.24(二氯甲烷∶甲醇＝20∶1(V/V))。

MW＝881，ESI-MS：[M+H]⁺＝882。

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.2-7.2(m，10H，Ar-H)，6.2-6.1(m，H)，6.1-6.0(d，J＝5.4Hz，1H)，5.7-5.6(m，1H)，5.4-5.2(m，2H)，5.1(s，1H)，4.9(d，J＝6.5Hz，1H)，4.9-4.7(m，1H)，4.6(s，1H)，4.5-4.2(dd，AB-type，J＝8.5Hz，2H)，4.2-4.0(m，2H)，4.0-3.7(m，5H)，2.9(d，J＝6.8Hz，1H)，2.5-2.3(dd，J＝9.8Hz，J’＝15.2Hz，1H)，2.3(s，3H)，2.3-2.2(m，2H)，2.2-2.0(m，2H)，1.9(b，1H)，1.7(s，3H，CH₃)，1.65(s，3H，CH₃)，1.4(s，9H，t-Bu)，1.4-1.3(s，3H，CH₃，两个异构体).

第七步

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-乙醛基浆果赤霉素III

室

温下，向一个100ml的三颈烧瓶中加入上述第六步得到的化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2，3-二羟基亚丙基)浆果赤霉素IIIG(0.556g，0.63mmol，1.0eq)，溶解在四氢呋喃(7ml)、甲醇(7ml)及水(7ml)的混合溶剂中，搅拌下加入高碘酸钠(0.887g，4.16mmol，6.6eq)，在室温下反应2h。点板(二氯甲烷∶甲醇＝20∶1)跟踪，原料基本反应完全，向反应液中加入蒸馏水(50ml)及饱和氯化钠溶液(50ml)，乙酸乙酯萃取水相(80ml×3)，合并有机相，用蒸馏水洗(25ml×1)，饱和氯化钠溶液洗(25ml×1)，无水硫酸镁干燥。过滤，滤液减压浓缩蒸干溶剂，得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-乙醛基浆果赤霉素III H(0.582g，类白色固体)。直接投下一步反应。

Rf＝0.42(二氯甲烷∶甲醇＝20∶1(V/V))

实施例1

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(2S，4S)-亚甲基桥联吗啉代亚乙基]浆果赤霉素III

氩

气氛下，向一个100ml的三颈烧瓶中加入上述第七步得到的化合物H(0.545g，0.63mmol，1.0eq)，加入无水甲醇(30ml)使其溶解，再加入少量干燥的分子筛(4)，搅拌下加入(s，s)-亚甲基桥联吗啉盐酸盐(0.568g，4.16mmol，6.6eq)，室温下反应0.5h，再加入氰基硼氢化钠(0.261g，4.16mmol，6.6eq)，继续搅拌1.5h后，点板(二氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶1)跟踪，原料基本消失。向反应液加入饱和碳酸氢钠溶液(70ml)淬灭反应.反应液用乙酸乙酯萃取(100ml×4)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗(25ml×1)，无水硫酸镁干燥。过滤，滤液减压浓缩蒸干溶剂，用硅胶柱色谱法纯化所得残余物(淋洗剂：先用正己烷∶二氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇＝20∶10∶10∶2，再用二氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇＝30∶10∶2)，得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(2S，4S)-亚甲基桥联吗啉代亚乙基]浆果赤霉素III I(0.412g，类白色固体)。产率：70％。

Rf＝0.29(二氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶1(V/V))。

MW＝933，ESI-MS：[M+H]⁺＝933.9。

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.1(d，J＝7.5Hz，2H，Ar-H)，7.7-7.5(t，J＝7.0Hz，1H，Ar-H)，7.5-7.2(m，7H)，6.1-6.0(m，2H)，5.7-5.6(d，J＝9.4Hz，1H)，5.3(d，J＝9.4Hz，1H)，5.2(d，J＝7.0Hz，1H)，5.1(s，1H)，5.0-4.9(b，1H)，4.7-4.6(d，J＝8.2Hz，1H)，4.6(b，1H)，4.4(b，1H)，4.4-4.2(dd，AB-type，J＝8.4Hz，2H)，4.2-4.0(m，2H)，4.0(d，J＝7.9Hz，1H)，3.8(d，J＝7.1Hz，1H)，3.7-3.6(d，J＝7.8Hz，1H)，3.6(b，1H)，3.1-3.0(m，2H)，3.0-2.9(m，1H)，2.9(d，J＝4.7Hz，1H)，2.7(m，J＝10.2Hz，1H)，2.4(dd，J＝9.7Hz，J’＝14.6Hz，1H)，2.3(s，3H，CH₃)，2.3-2.2(m，1H)，2.2-2.0(m，2H)，1.9(b，1H)，1.9-1.8(m，1H)，1.8-1.7(m，1H)，1.65(s，3H，CH₃)，1.60(s，3H，CH₃)，1.55(s，3H，CH₃)，1.4(s，9H，t-Bu)，1.3(s，3H，CH₃).

实施例2

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(2R，4R)-亚甲基桥联吗啉代亚乙基]浆果赤霉素III

使用上述第七步中所得到的化合物H作原料，按照本发明实施例1所述相同方式进行该原料与(R，R)-亚甲基桥联吗啉盐酸盐的反应，则得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(2R，4 R)-亚甲基桥联吗啉代亚乙基]浆果赤霉素III J(0.4g，类白色固体)。产率：68％。

Rf＝0.32(二氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶1(V/V))。

MW＝933，ESI-MS：[M+H]⁺＝933.9。

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.11(d，J＝7.3Hz，2H，Ar-H)，7.59(t，J＝7.3Hz，1H，Ar-H)，7.19-7.53(m，7H)，6.1-6.0(m，2H)，5.6(d，J＝9.0Hz，1H)，5.3(d，J＝7.1Hz，1H)，5.2(d，J＝7.0Hz，1H)，5.1(s，1H)，5.0(b，1H)，4.7-4.6(d，J＝7.8Hz，1H)，4.6(s，1H)，4.5-4.4(s，1H)，4.4-4.3(dd，AB-type，J＝8.2Hz，2H)，4.2-4.0(m，3H)，3.8(d，J＝7.0Hz，1H)，3.7(d，J＝8.5Hz，1H)，3.6(b，1H)，3.1(m，1H)，3.1-2.9(m，2H)，2.9(d，J＝4.7Hz，1H)，2.7(m，1H)，2.4(dd，J＝9.8Hz，J’＝14.9Hz，1H)，2.3(s，3H，CH₃)，2.3-2.2(m，1H)，2.2-2.0(m，2H)，1.9(b，1H)，1.8(m，1H)，1.7-1.6(m，1H)，1.7(s，3H，CH₃)，1.65(s，3H，CH₃)，1.6(s，3H，CH₃)，1.4(s，9H，t-Bu)，1.3(s，3H，CH₃).

实施例3

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-甲氧基甲氨基亚乙基)浆果赤霉素III

使用上述第七步中所得到的化合物H作原料，按照本发明实施例1所述相同方式进行该原料与O，N-二甲基-盐酸羟胺的反应，则得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-甲氧基甲氨基亚乙基)浆果赤霉素III K(0.48g，类白色固体)。产率：85％。

Rf＝0.39(正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇＝20∶20∶1(V/V))。

MW＝895，ESI-MS：[M+H]⁺＝895.7，[M+Na]⁺＝917.6。

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.1(d，J＝7.4Hz，2H，Ar-H)，7.6(t，J＝7.1Hz，1H，Ar-H)，7.5-7.2(m，7H)，6.2-6.0(m，2H)，5.7-5.6(m，1H)，5.3(d，J＝6.6Hz，1H)，5.2(d，J＝6.3Hz，1H)，5.1(b，1H)，5.1-5.0(b，1H)，4.7-4.4(m，1H)，4.6(b，1H)，4.4-4.2(dd，AB-type，J＝8.6Hz，2H)，4.2(m，1H)，4.1(m，1H)，3.8(d，J＝6.6Hz，1H)，3.6-3.5(s，3H，OCH₃)，3.1-3.0(m，2H)，2.95(b，1H)，2.9(m，1H)，2.85(b，1H)，2.7-2.6(s，3H，NCH₃)，2.4-2.3(dd，J＝10.8Hz，J’＝14.1Hz，1H)，2.3(s，3H，CH₃)，2.3-2.0(m，1H)，1.9(b，1H)，1.7(s，3H，CH₃)，1.60(s，3H，CH₃)，1.55(s，3H，CH₃)，1.4(s，9H，t-Bu)，1.3(s，3H，CH₃).

实施例4

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(4-四氢吡咯)-哌啶代亚乙基]浆果赤霉素III

使用上述第七步中所得到的化合物H作原料，按照本发明实施例1所述相同方式进行该原料与4-四氢吡咯-1-基-哌啶的反应，则得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(4-四氢吡咯)-哌啶代亚乙基]浆果赤霉素III L(0.402g，类白色固体)。产率：64.5％。

Rf＝0.29(二氯甲烷∶甲醇∶三乙胺＝40∶4∶0.25(V/V))。

MW＝988，ESI-MS：[M+H]⁺＝988.9

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.1(d，J＝7.6Hz，2H，Ar-H)，7.6(t，J＝7.4Hz，1H，Ar-H)，7.5-7.2(m，7H)，6.1(b，2H)，6.0(d，J＝4.7Hz，1H)，5.7(d，J＝9.8Hz，1H)，5.2(d，J＝7.4Hz，1H)，5.1(b，1H)，5.0(t，J＝4.4Hz，1H)，4.7(d，J＝8.2Hz，1H)，4.6(b，1H)，4.4-4.2(dd，AB-type，J＝8.6Hz，2H)，4.1-4.0(m，1H)，3.8(d，J＝7.4Hz，1H)，3.2-3.0(m，6H)，2.9(b，1H)，2.8-2.7(m，2H)，2.3(s，3H，CH₃)，2.3-1.9(m，12H)，1.9(s，1H)，1.9-1.8(m，1H)，1.65(s，3H)，1.55(s，3H)，1.5(s，3H)，1.4(s，9H，t-Bu)，1.3(s，3H)，1.4-1.3(m，2H)，1.3-1.2(m，2H).

实施例5

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(S)-(2-四氢吡咯-1-甲基)-吡咯烷代亚乙基]浆果赤霉素III

使用上述第七步中所得到的化合物H作原料，按照本发明实施例1所述相同方式进行该原料与(S)-(+)-1-(2-四氢吡咯甲基)吡咯的反应，则得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(S)-(2-四氢吡咯-1-甲基)-吡咯烷代亚乙基]浆果赤霉素III M(0.457g，类白色固体)。产率：73.3％。

Rf＝0.2(二氯甲烷∶甲醇∶三乙胺＝40∶2∶0.25(V/V))。

MW＝988，ESI-MS：[M+H]⁺＝988.8

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.1(d，J＝7.6Hz，2H)，7.6(t，J＝7.4Hz，1H)，7.5-7.2(m，7H)，6.1(b，1H)，6.0(d，J＝5.1Hz，1H)，5.7-5.6(d，J＝9.8Hz，1H)，5.2(d，J＝7.5Hz，1H)，5.1(b，1H)，5.0(t，J＝4.5Hz，1H)，4.6(b，1H)，4.4-4.2(dd，AB-type，J＝8.6Hz，2H)，4.1-4.0(b，1H)，3.8(d，J＝7.0Hz，1H)，3.3-3.2(m，2H)，3.0-2.8(m，6H)，2.8-2.6(m，2H)，2.6-2.4(m，1H)，2.4-2.3(dd，J＝9.8Hz，J’＝15.3Hz，1H)，2.3(s，3H，CH₃)，2.3-2.0(m，4H)，1.9(b，5H)，1.9-1.7(m，4H)，1.7(s，3H，CH₃)，1.6(m，5H)，1.4(s，9H，t-Bu)，1.4-1.3(t，2H)，1.3(s，3H，CH₃).

实施例6

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-(2-氟乙基)-甲氨基亚乙基]浆果赤霉素III

使用上述第七步中所得到的化合物H作原料，按照本发明实施例1所述相同方式进行该原料与2-氟-乙基-甲胺乙酸盐的反应，则得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-(2-氟乙基)-甲氨基亚乙基]浆果赤霉素III N(0.322g，类白色固体)。产率：56％。

Rf＝0.17(正己烷∶二氯甲烷甲醇＝10∶10∶1(V/V))。

MW＝911，ESI-MS：[M+H]⁺＝911.8

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.1(d，J＝7.0Hz，2H)，7.6(t，J＝7.0Hz，1H)，7.5-7.2(m，7H)，6.1-6.0(m，2H)，5.7(d，J＝9Hz，1H)，5.3(d，J＝8Hz，1H)，5.1(b，1H)，5.0(b，1H)，4.6(b，2H)，4.5(t，J＝5Hz，1H)，4.4-4.2(dd，AB-type，J＝8Hz，1H)，4.1(b，1H)，3.8(d，J＝7Hz，1H)，3.0-2.8(m，6H)，2.5(s，3H，CH₃)，2.4(dd，J＝9Hz，J’＝15Hz，1H)，2.3(s，3H，CH₃)，2.3-2.0(m，4H)，1.9(b，1H)，1.7(s，3H，CH₃)，1.6(s，3H，CH₃)，1.55(s，3H，CH₃)，1.4(s，9H，t-Bu)，1.3(s，3H，CH₃).

实施例7

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(R)-((2-四氢吡咯-1-甲基)-吡咯烷代亚乙基]浆果赤霉素III

使用上述第七步中所得到的化合物H作原料，按照本发明实施例1所述相同方式进行该原料与(R)-(+)-1-(2-四氢吡咯甲基)吡咯的反应，则得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(R)-((2-四氢吡咯-1-甲基)-吡咯烷代亚乙基]浆果赤霉素III O(0.362g，类白色固体)。产率：58％。

Rf＝0.28(正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶三乙胺＝20∶20∶1∶1(V/V))。

MW＝988，ESI-MS：[M+H]⁺＝988.9

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.1(d，J＝7.6Hz，2H)，7.6(t，J＝7.4Hz，1H)，7.5-7.2(m，7H)，6.1-6.0(m，2H)，5.7-5.6(d，J＝9.4Hz，1H)，5.3(d，J＝10.3Hz，1H)，5.2(d，J＝7.3Hz，1H)，5.1(s，1H)，5.0(dd，AB-type，J＝3.4Hz，J’＝6.4Hz，1H)，4.7(b，1H)，4.6(s，1H)，4.4-4.3(dd，AB-type，J＝8.6Hz，1H)，4.2(b，1H)，4.1(m，1H)，3.8(d，J＝7.3Hz，1H)，3.3-3.2(m，2H)，2.9(m，1H)，2.8-2.4(m，1H)，2.4-2.3(m，1H)，2.3(s，3H，CH₃)，2.3-1.9(m，4H)，1.9(s，1H)，1.9-1.7(m，1H)，1.7(s，3H，CH₃)，1.6(m，5H)，1.4(s，9H，t-Bu)，1.3(s，3H，CH₃).

实施例8

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(4-吗啉)-哌啶代亚乙基]浆果赤霉素III

使

用上述第七步中所得到的化合物H作原料，按照本发明实施例1所述相同方式进行该原料与4-哌啶-4-基-吗啉的反应，则得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(4-吗啉)-哌啶代亚乙基]浆果赤霉素III P(0.47g，类白色固体)。产率：74.4％。

Rf＝0.18(正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶三乙胺＝30∶10∶3∶2(V/V))。

MW＝1004，ESI-MS：[M+H]⁺＝1004.9。

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.1(d，J＝7.5Hz，2H)，7.6(t，J＝7.4Hz，1H)，7.5-7.2(m，7H)，6.1-6.0(m，2H)，5.6(d，J＝9.8Hz，1H)，5.3(d，J＝6.6Hz，1H)，5.2(d，J＝6.3Hz，1H)，5.1(b，2H)，5.0(b，1H)，4.7(d，J＝8.2Hz，1H)，4.6(b，1H)，4.4-4.3(dd，AB-type，J＝8.5Hz，2H)，4.0(m，1H)，3.8(d，J＝7.2Hz，1H)，3.8-3.7(m，4H)，3.2-3.0(m，2H)，2.9-2.8(m，1H)，2.8-2.7(m，2H)，2.6-2.5(m，4H)，2.4-2.3(dd，J＝9.8Hz，J’＝15.3Hz，1H)，2.3(s，3H，CH₃)，2.3-2.0(m，6H)，1.9(b，1H)，1.9-1.7(m，2H)，1.7(s，3H，CH₃)，1.65(s，3H，CH₃)，1.55(s，3H，CH₃)，1.4(s，3H)，1.3(s，9H，t-Bu).

实施例9

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(环丙基氨基)哌啶亚乙基]浆果赤霉素III

使用上述第七步中所得到的化合物H作原料，按照本发明实施例1所述相同方式进行该原料与环丙烷-哌啶-4-基-胺的反应，则得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-[2-N-(环丙基氨基)哌啶亚乙基]浆果赤霉素III Q(0.29g，白色固体)。产率：47％。

Rf＝0.20(正己烷∶二氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇＝30∶10∶2∶3(V/V))。

MW＝974，ESI-MS：[M+H]⁺＝974.9。

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.1(d，J＝7.3Hz，2H)，7.6(t，J＝7.3Hz，1H)，7.5-7.2(m，7H)，6.1-6.0(m，2H)，5.6(d，J＝9.8Hz，1H)，5.3(d，J＝7.5Hz，1H)，5.2(d，J＝6.4Hz，1H)，5.1(b，1H)，5.0(t，J＝3.9Hz，1H)，4.7(d，J＝8.3Hz，1H)，4.6(b，1H)，4.4-4.2(dd，AB-type，J＝18.5Hz，J’＝9.8Hz，2H)，4.2-4.1(m，1H)，4.1-4.0(m，1H)，3.8(d，J＝7.2Hz，1H)，3.1-2.7(m，5H)，2.6-2.5(m，3H)，2.4-2.3(dd，J＝9.8Hz，J’＝15.3Hz，1H)，2.3(s，3H，CH₃)，2.3-1.9(m，9H)，1.9-1.8(m，3H)，1.6(s，3H，CH₃)，1.55(s，3H，CH₃)，1.5(s，3H，CH₃)，1.4(s，9H，t-Bu)，1.3(s，3H，CH₃).

实施例10

9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-吗啉代亚乙基)浆果赤霉素III

使用上述第七步中所得到的化合物H作原料，按照本发明实施例1所述相同方式进行该原料与吗啉的反应，则得到标题化合物9β-13-O-[(2R，3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]-10-脱乙酰基-9-二氢-9，10-O-(2-吗啉代亚乙基)浆果赤霉素III R(0.517g，类白色固体)。产率：89％。

Rf＝0.22(正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶三乙胺＝20∶20∶1∶1(V/V))。

MW＝921，ESI-MS：[M+H]⁺＝921.7

¹H-NMR(CD₃Cl₃，400MHz)：δ8.1(d，J＝7.3Hz，2H)，7.59(t，J＝7.3Hz，1H)，7.5-7.2(m，7H)，6.1-6.0(m，2H)，5.6(d，J＝10.0Hz，1H)，5.3(d，J＝10.0Hz，1H)，5.2(d，J＝6.9Hz，1H)，5.1(s，1H)，5.0(t，J＝3.9Hz，1H)，4.7(d，J＝8.3Hz，1H)，4.6(s，1H)，4.4(d，J＝8.3Hz，1H)，4.3(d，J＝8.3Hz，1H)，4.2-4.0(m，2H)，3.9-3.6(m，5H)，2.9(d，J＝4.9，1H)，2.8-2.7(dd，AB-type，J＝18.4Hz，J’＝4.4Hz，2H)，2.7-2.5(m，4H)，2.3(s，3H)，2.5-1.9(m，4H)，1.9(s，1H)，1.65(s，3H)，1.6(s，3H)，1.4(s，9H)，1.3(s，6H).

实验例1

SHR-110008，多西他赛对人非小细胞肺癌A549裸小鼠移植瘤的疗效实验动物：

动物种属：BALB/cA-nude裸小鼠

各组动物数：对照组9只，用药组5只

饲养环境：SPF级

实验步骤：

动物经1周适应后，皮下接种人肺癌细胞A549，待肿瘤生长100-300mm³后，将动物随机分组(d0)。给药剂量SHR-110008为10mg/kg，16mg/kg；多西他赛为12mg/kg，19mg/kg。静脉给药。给药时间SHR-110008 10mg/kg，多西他赛12mg/kg均为d0，d4，d8天，共3次；SHR-110008 16mg/kg，多西他赛19mg/kg为d0，d7给药，共2次。每周测2-3次瘤体积，称鼠重，记录数据。肿瘤体积(V)计算公式为：

V＝1/2×a×b²    其中a、b分别表示长、宽。

结果：

表1.静脉注射(i.v)SHR-110008，多西他赛对人非小细胞肺癌A549裸小鼠移植瘤的疗效

d0：分笼给药时间；dn：第1次给药后14天。*P＜0.01vs对照

表2.静脉(i.v)SHR-110008，多西他赛均对人肺癌A549裸小鼠移植瘤的疗效(称重法计算抑瘤率)

d0：分笼给药时间；dn：第1次给药后14天。*P＜0.01vs对照

结论：

参见表1和表2以及图1，在合适的给药方案下，SHR110008的疗效及毒性均优于多西他赛。

实验例2

Shr1021-47对人非小细胞肺癌A549裸小鼠移植瘤的疗效

实验动物：

动物种属：BALB/cA-nude裸小鼠

各组动物数：对照组12只，用药组6只

实验步骤：

细胞培养：体外培养人肺癌细胞A549，使细胞一直处于对数生长期。

移植：取制备好的细胞接种于裸小鼠皮下。

接种：在无菌条件下，将肿瘤瘤块接种于小鼠一侧腋下。

分组和剂量设置：裸小鼠移植瘤用游标卡尺测量直径，待肿瘤生长到100-250mm³后，将动物随机分组。Shr1021-47 8mg/kg，12mg/kg，16mg/kg；多西他赛12mg/kg。

给药途径和时间：静脉注射给药，Shr1021-47和多西他赛均为d0，d7给药，共2次。每周测2-3次瘤体积，称鼠重，记录数据。

评价标准：

肿瘤体积(V)计算公式为

V＝1/2×a×b²

其中a、b分别表示长、宽。根据测量结果计算出相对肿瘤体积(relativetumor volume，RTV)，公式为：

RTV＝V_t/V₀。

其中V₀为分笼给药时(即d0)所测得的肿瘤体积；V_t为每次测量时的肿瘤体积。抗肿瘤活性指标为T/C(％)，公式为：

T/C(％)＝T_RTV/C_RTV×100

T_RTV：治疗组RTV；C_RTV：阴性对照RTV

结果：

表3.静脉注射Shr1021-47对人非小细胞肺癌A549裸小鼠移植瘤的疗效

d0：分笼给药时间

dn：实际治疗疗效最佳的时间，本实验为第1次给药后14天

结论：

参见图2和表3，Shr1021-47明显抑制人肺癌A549裸小鼠移植瘤的生长；Shr1021-47虽然毒性较大，但小鼠对其能够较好地耐受；在本试验条件下，其疗效比多西他赛好。