一种伐奈莫林盐酸盐的提纯方法

技术领域

本发明涉及一种伐奈莫林盐的提纯方法，特别涉及一种伐奈莫林盐酸盐的提纯方法。

背景技术

伐奈莫林(Valnemulin)作为新一代截短侧耳素(Pleuromutilin)类半合成抗生素，主要用于猪、牛、羊以及家禽的支原体和革兰氏阳性菌感染的防治。伐奈莫林能与病原微生物核糖体的50S亚基结合，抑制蛋白质的合成，其作用机制与泰妙菌素相似。伐奈莫林具有抗菌活性强、广谱、吸收快、休药期短、无繁殖毒性、安全、残留极低等特点。伐奈莫林对支原体、细菌及螺旋体，如关节炎支原体、牛鼻支原体、犬支原体、猫支原体、鸡毒支原体、鸡败血性支原体、肺炎支原体、链球菌、金黄葡萄球菌、放线杆菌、巴氏杆菌、猪痢疾短螺旋体及结肠毛样螺旋体等都有良好的抗菌活性，特别是对支原体和螺旋体高度敏感，是人工的治疗动物支原体病的首选药物之一，在兽医临床上具有广阔的应用前景。

由于伐奈莫林盐酸盐的稳定性相对较好，目前，国内外市场上的伐奈莫林主要以无定形盐酸盐的形式存在，其结构式为：

伐奈莫林盐酸盐是在1984年由瑞士Sandz公司开发；1996年瑞士Norvatis公司将其做成饲料预混剂，用于预防和治疗猪痢疾短螺旋体感染引起的猪痢疾和由肺炎霉型体引起的猪地方性肺炎，是第一个全欧洲批准的兽用药物预混剂，并被列为兽用处方药。

伐奈莫林盐酸盐的制备基本上都是通过对截短侧耳素的多步修饰反应，最后在溶液中通过盐酸调节pH得到相应盐酸盐水溶液，再通过冷冻干燥或者喷粉干燥的方法获得伐奈莫林盐酸盐固体，该制备方法在EP0153277、WO9322288中均有报导，但均未提到具体的提纯方法。在制备过程中不可避免会发生副反应或反应不完全而引入杂质，对产品的质量影响较大。伐奈莫林盐酸盐粗产品中主要含有5种杂质，其中二甲基半胱胺基截短侧耳素（即杂质B）和缬氨酰伐奈莫林（即杂质C）与产品结构很相近，常规提纯方法较难去除。

R=H，即杂质B；

R=D-Val-D-Val，即杂质C。

中国专利CN102001980A公开了一种沃尼妙林盐酸盐（即伐奈莫林盐酸盐）的出料方法，方法内容：①用粗的沃尼妙林盐酸盐或沃尼妙林其他形式的盐的水溶液，与碱反应形成游离的沃尼妙林碱，进行有机溶剂的萃取并进行常规分离；②然后在分离出的有机层中加入无机酸盐或有机酸盐的水溶液，用盐酸反应成盐，取有机层，去水层；③将有机层浓缩后滴加到另一种有机溶剂中，使沃尼妙林盐酸盐结晶获得结晶产品，在出料的同时使产品纯化。此方法存在至少三个不足：一是由于伐奈莫林盐酸盐在水中溶解度相对于有机溶剂中大，它在无机酸盐或有机酸盐的水溶液中仍有一定量的溶解，采用此专利步骤②的去水层操作会造成产品损失，而且过多水分会影响伐奈莫林盐酸盐难结晶；二是在生产中大量使用无机酸盐或有机酸盐溶液，不仅增加生产成本，而且增加废水处理成本；三是由于伐奈莫林盐酸盐为无定形物，伐奈莫林盐酸盐结晶纯化过程中，在水分存在的情况下，伐奈莫林盐酸盐会与水抱团形成黏性液体，直接析晶较难，因此，上述公开的伐奈莫林盐酸盐溶液直接析晶的专利实际操作较难实现，其结晶过程不稳定。

发明内容

本发明提供一种有效稳定的的提纯伐奈莫林盐酸盐的方法，其处理过程简便，不需要对伐奈莫林盐的多次萃取以及引入其他盐类，产品损失少，废水易于处理，解决了伐奈莫林盐酸盐提纯难的问题。

本发明的技术方案是通过以下技术方案实现的：一种伐奈莫林盐酸盐的提纯方法，具体操作包括以下步骤： 

（1）取伐奈莫林盐溶于水中，加入有机溶剂，用碱液调节pH至8~9后，静置分层，有机层经水洗涤后减压浓缩至干；

（2）将步骤（1）中所得固体加醇溶解后，加入磷酸充分搅拌成盐，减压蒸干后再用醇溶解；

（3）将有机溶剂在搅拌下滴加到步骤（2）所得醇溶液中，产生磷酸盐沉淀，经过滤、有机溶剂洗涤滤饼后，将滤饼溶解于甲基叔丁基醚/水混合溶液中；

（4）将步骤（3）中所得溶液用碱液调节pH 至7~9，分层、弃去水层、水洗涤，再加入水，用稀盐酸调节pH 至2.5~4，分层，水层冷冻干燥，得伐奈莫林盐酸盐；

其中，所述步骤（1）和步骤（3）中的有机溶剂为二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、乙醚、异丙醚、甲基叔丁基醚、茴香醚、甲乙醚、石油醚、正己烷中的一种或几种。

其中所述步骤（1）中伐奈莫林盐以截短侧耳素为原料，经磺酰化、半胱胺取代、及与D-缬氨酸钾盐缩合、酸化而得。

本发明加酸成盐体系采用含伐奈莫林碱的有机层浓缩后加醇溶解，再加磷酸成盐，成盐后又减压蒸干再用醇溶解，整个过程除去了水，避免了产品溶于水而损失。本方法处理过程简便，避免了伐奈莫林盐酸盐的再次萃取以及其他饱和盐水的引入，产品损失少，废水易于处理。

本发明先将伐奈莫林盐转换成磷酸盐产品，较好的改变了产品物性，解决了伐奈莫林盐直接析晶难的问题，并在析晶过程中有效的提高了产品纯度，再将纯化后的伐奈莫林磷酸盐通过常规的酸碱中和转换成盐酸盐产品的水溶液，最后通过冷冻干燥法得到高纯度的沃尼妙林盐酸盐产品。

作为优选，所述步骤（1）中伐奈莫林盐为：盐酸盐、磷酸盐、酒石酸盐、硫酸盐、乙酸盐。

作为优选，所述步骤（1）具体为：称取X g伐奈莫林盐，溶于8X~12X ml的水中，加入8X~12X ml体积的有机溶剂，用碱液调节pH至8～9，静置分层、弃去水层，有机层经水洗涤后减压浓缩至干。

作为优选，步骤（2）具体为：将步骤（1）中所得固体用体积为2X~4X ml的醇溶解，加入磷酸充分搅拌成盐，减压蒸干后再用体积为1X~2X ml的醇溶解，其中X为所述伐奈莫林盐的质量的数值，质量单位为g 。

作为优选，步骤（3）具体为：在搅拌下向步骤（2）所得醇溶液中滴加体积为10X~20X ml的有机溶剂，产生磷酸盐沉淀，经过滤、有机溶剂洗涤滤饼后，将滤饼溶解于体积为10X~20X ml的甲基叔丁基醚/水混合溶液中，其中X为所述伐奈莫林盐的质量的数值，质量单位为g 。

作为优选，步骤（1）、步骤（4）中碱液为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、氨水中的一种。

作为优选，步骤（2）中醇为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、异丁醇中的一种或几种。

作为优选，步骤（2）中磷酸质量分数为10%~30%。

综上所述，本发明的有益效果如下：

1、本发明提供的方法对伐奈莫林盐酸盐的提纯效果显著，提纯后的产品，根据欧洲标准EP6.0的方法检测，杂质B和杂质C的含量相对于提纯前均有明显下降；

2、本发明处理过程中避免了伐奈莫林盐酸盐溶于水而损失，同时避免了其它饱和盐水的引入，产品得率高，废水易于处理；

3、本发明提纯步骤简便，操作容易，溶剂经回收后可重复利用，成本低，比较适合于工业化生产。

具体实施方式

为了更清楚地说明本发明，下文中采用非限定实施例对本发明作更进一步的说明，但不限于此。

以下实施例中含量为质量百分含量，采用欧洲标准EP6.0提供的方法检测。

实施例1

准确称量含量80%的伐奈莫林盐酸盐 64.6g溶于600ml水中，加入600ml的二氯甲烷，用氢氧化钠水溶液调节pH=8.2，静置分层，水层弃去，有机层用600ml水洗涤后减压抽干。抽干后的固体加入200ml甲醇，完全溶解后，加入10%的磷酸84.2g，搅拌0.5h，蒸干后，再加入100ml甲醇重新溶解。向所得甲醇溶液中，剧烈搅拌下慢慢滴加甲基叔丁基醚1100ml并搅拌至沉淀完全，过滤，滤饼用少量二氯甲烷洗涤，滤液经蒸馏处理，分别回收溶剂重复利用。滤饼用体积比1/1的甲基叔丁基醚/水混合溶液1200ml溶解后，用碱液调节pH=7.2，静置分层、水层弃去，醚层中加入600ml水，稀盐酸调节pH =3.0，充分搅拌后分层，水层冷冻干燥，得伐奈莫林盐酸盐固体50.7g，含量为99.52%，得率97.6%，，杂质含量符合欧洲标准EP6.0要求。

实施例2

准确称量含量为85%伐奈莫林硫酸盐80g，溶于960ml水中，加入960ml甲基叔丁基醚，用氢氧化钾水溶液调节pH =9.0，静置分层，水层弃去，有机层用960ml水洗涤后减压抽干。抽干后的固体加入230ml乙醇，完全溶解后，加入20%的磷酸50.2g，搅拌0.5h，蒸干后，再加入120ml乙醇重新溶解。向所得乙醇溶液中，剧烈搅拌下慢慢滴加甲基叔丁基醚1400ml并搅拌至沉淀完全，过滤，滤饼用少量甲基叔丁基醚洗涤，滤液经精馏处理分别回收醚和甲醇重复利用。滤饼用体积比1/1的甲基叔丁基醚/水混合溶液1600ml溶解后，用碱液调节pH=8.0；静置分层、水层弃去，醚层中加入800ml水，稀盐酸调节pH =2.5，充分搅拌后分层，水层冷冻干燥，得伐奈莫林盐酸盐固体61.0g，含量为98.85%，得率97.7%，杂质含量符合欧洲标准EP6.0要求。

实施例3

准确称量含量90%的伐奈莫林酒石酸盐 100 g溶于1000ml水中，加入1000ml的体积比为1：1的正己烷和石油醚混合溶剂，用氨水调节pH=8.0，静置分层，水层弃去，有机层用1000ml水洗涤后减压抽干。抽干后的固体加入400ml甲醇，完全溶解后，加入30%的磷酸41.1g，搅拌0.5h，蒸干后，再加入100ml甲醇重新溶解。向所得甲醇溶液中，剧烈搅拌下慢慢滴加体积比为1：1的正己烷和石油醚混合溶液1000ml并搅拌至沉淀完全，过滤，滤饼用少量石油醚洗涤，滤液经精馏处理分别回收溶剂和甲醇。滤饼用体积比1/1的甲基叔丁基醚/水混合溶液2000ml溶解后，用碱液调节pH =7.5，静置分层、水层弃去，醚层中加入1000ml水，稀盐酸调节pH =3.5，充分搅拌后分层，水层冷冻干燥，得含量为99.35%的伐奈莫林盐酸盐固体74.3g，得率97.5%，杂质含量符合欧洲标准EP6.0要求。

实施例4

准确称量含量为95%的伐奈莫林乙酸盐60g溶于480ml水中，加入480ml环己烷，用氢氧化钾水溶液调节pH=8.0，静置分层，水层弃去，有机层用480ml水洗涤，再减压抽干。抽干后的固体加入120ml甲醇，完全溶解后，加入25%磷酸35.7g，搅拌0.5h，蒸干后再加入120ml甲醇重新溶解。向所得甲醇溶液中在剧烈搅拌条件下，慢慢滴加环己烷/甲基叔丁基醚混合溶液1200ml并搅拌至沉淀完全，过滤，滤饼用少量甲基叔丁基醚洗涤，滤液经精馏处理分别回收醚和甲醇。滤饼用体积比1/1的甲基叔丁基醚/水混合溶液960ml溶解，用碱液调节pH=7.5；静置分层、水层弃去，醚层中加入480ml水，稀盐酸调节pH=3.0，充分搅拌后分层，水层冷冻干燥，得固体伐奈莫林盐酸盐固体54.0g，含量为99.50%，得率97.9%，杂质含量符合欧洲标准EP6.0要求。

上述实施例中伐奈莫林盐酸盐的主要杂质为杂质B和杂质C，在提纯前后，分别用欧洲标准EP6.0中的检测方法检测，结果列于下表：

对比表中对有关物质的含量检测数据，可以看出，通过本发明提供的提纯方法处理后，伐奈莫林盐酸盐中主要杂质B和杂质C都有明显下降，提纯效果比较理想。