表现出抗癌活性和抗增殖活性的2-氨基嘧啶-6-酮及类似物

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发明领域

本发明公开可通过抑制c-FMS(CSF-1R)、c-KIT和/或PDGFR激 酶用于治疗癌症、自身免疫疾病和骨代谢病症的化合物。这些化合物 还可用于治疗由c-FMS、c-KIT或PDGFR激酶介导的其它哺乳动物 疾病。

背景技术

自身免疫疾病，包括自身免疫性关节炎代表高发病率和患病率的 重要的人类疾病。类风湿性关节炎累及约0.6％的世界人口(Firestein, G.S.,Nature(2003)423:356)。尽管涉及生成与组织抗原反应的自身抗 体的适应性免疫应答参与了这些疾病的病因和初始传播(Edwards, J.C.等，NewEnglandJournalofMedicine(2004)350:2572；Genovese, M.C.等，NewEnglandJournalofMedicine(2005)353:1114)，但组织 和关节损伤的慢性表现在很大程度上由先天免疫应答介导的细胞事 件介导(Firestein,G.S.,Nature(2003)423:356；Paniagua,R.T.等， ArthritisResearch&Therapy(2010)12:R32)。来自先天免疫应答的介 导慢性组织损伤的促成细胞类型包括成纤维细胞样滑膜细胞、巨噬细 胞、肥大细胞和破骨细胞。

激酶代表在哺乳动物细胞功能，包括细胞增殖、存活、运动性、 响应于生长因子，以及细胞因子和其它促炎、促血管生成和免疫调节 物质的分泌中发挥重要作用的蛋白家族。因此，在成纤维细胞样滑膜 细胞、巨噬细胞、肥大细胞和破骨细胞中介导这些事件的激酶的阐明 代表用于治疗自身免疫疾病的新型疗法的合理方法。

伊马替尼是市售的用于治疗癌症慢性髓性白血病(CML,Druker, B.J.等，NewEnglandJournalofMedicine(2001)344:1031)和用于治 疗胃肠道间质肿瘤(GIST,Demetri,G.D.等，NewEnglandJournalof Medicine(2002)347:472)的激酶抑制剂。伊马替尼还在共存在自身 免疫疾病，例如类风湿性关节炎的癌症患者中表现出益处(Ihara,M.K. 等，ClinicalRheumatology(2003)22:362；Eklund,K.K.和Joensuu,H., AnnMedicine(2003)35:362；Ames,P.R.等，JournalofRheumatology (2008)35:1682)。在CML和GIST的治疗中赋予功效的伊马替尼所抑 制的激酶分别为BCR-ABL激酶和c-KIT激酶。除这两种激酶以外， 伊马替尼抑制的其它激酶包括c-FMS、PDGFR-α和PDGFR-β(Dewer, A.L.等，Blood(2005)105:3127；Fabian,M.A.等，NatureBiotechnology (2005)23:329。

最近的研究公开内容已经确定c-FMS激酶与滑膜巨噬细胞的激 活有关，PDGFR激酶与成纤维细胞样滑膜细胞的激活有关，并且 c-KIT激酶与肥大细胞的激活有关(Paniagua,R.T.等，Journalof ClinicalInvestigation(2006)116:2633)。c-FMS激酶还与单核细胞的增 殖和单核细胞分化成巨噬细胞和破骨细胞有关，巨噬细胞和破骨细胞 募集以介导类风湿性关节炎中的关节损伤(Paniagua,R.T.等，Arthritis Research&Therapy(2010)12:R32；Yao,Z.等，JournalofBiological Chemistry(2006)281:11846；Patel,S.和Player,M.R.CurrentTopicsin MedicinalChemistry(2009)9:599；Pixley,F.J.等，TrendsinCellBiology (2004)14:628)。

近年来，肿瘤微环境在癌症运动性、侵袭和转移中的重要性已经 变得更加明确。具体而言，已经对肿瘤相关巨噬细胞(TAM)在肿瘤进 展中的作用进行了研究。这些宿主(基质)巨噬细胞募集到肿瘤部位 或转移前微生境(pre-metastaticniche)以改变肿瘤环境，并使环境更有 助于肿瘤的运动性、侵袭和转移。已知这些TAM在其表面上表达 c-FMS受体酪氨酸激酶(也称为CSF-1R)，并依赖于通过该激酶通过 结合到激活配体CSF-1(也称为巨噬细胞集落刺激因子或MCSF)和 白细胞介素34(IL-34)的信号传导。该c-FMS/MCSF(CSF1-R/CSF-1) 信号轴的激活刺激单核细胞增殖、分化成肿瘤相关巨噬细胞和对巨噬 细胞存活的促进。通过刺激肿瘤微环境的TAM成分，c-FMS激酶的 激活与肿瘤细胞迁移、侵袭和转移相关(J.Condeelis和J.W.Pollard, Cell(2006)124:263；S.Patel和M.R.Player,CurrentTopicsinMedicinal Chemistry(2009)9:599)。在小鼠中，CSF-1，即c-FMS激酶的配体的 消融降低肿瘤的进展并显著降低鼠类乳腺癌模型中的转移；而CSF-1 的过表达加速该模型中的转移(E.Y.Lin等，JournalofExperimental Medicine(2001)193:727)。此外，已经对肿瘤细胞与巨噬细胞之间的 相互作用进行了描述，其中肿瘤生长因子EGF的巨噬细胞分泌和 CSF-1的肿瘤细胞分泌建立促进肿瘤迁移和侵袭的旁分泌环路。此旁 分泌环路通过给药c-FMS激酶的抗体被阻断(J.Wyckoff等，Cancer Research(2004)64:7022)。相关临床数据还表明，肿瘤中CSF-1的过 表达是预后不良的预测因子(R.D.Leek和A.L.Harris,Journalof MammaryGlandBiologyNeoplasia(2002)7:177；E.Y.Lin等，Journalof MammaryGlandBiologyNeoplasia(2002)7:147)。破骨细胞的分化和 激活也需要c-FMS激酶的激活。已报道其参与介导各种癌症，包括 乳腺癌和前列腺癌的骨转移(S.Patel和M.R.Player,CurrentTopicsin MedicinalChemistry(2009)9:599)。已报道了在骨转移性前列腺癌中 CSF-1的高血浆浓度，这表明在前列腺癌骨转移中破骨细胞c-FMS 激酶的激活(H.Ide等，HumanCell(2008)21:1)。已报道，当在转移 性骨疾病模型中进行评价时，c-FMS抑制剂减轻放射线照相致骨病变 (C.L.Manthey等，MolecularCancerTherapy(2009)8:3151；H.Ohno 等，Mol.CancerTherapy(2006)5:2634)。LYVE-1+和LYVE1-巨噬细 胞的MCSF介导的激活也在鼠类癌症模型中介导病理性血管生成和 淋巴管生成，并且c-FMS信号传导的阻断导致肿瘤血管生成/淋巴管 生成的抑制(Y.Kubota等，JournalofExperimentalMedicine(2009) 206:1089)。CSF-1R抑制剂的给药阻断骨髓来源的TAM以及骨髓来 源的单核细胞性髓源性抑制细胞(MDSC)募集到肿瘤部位；该阻断使 得肿瘤血管生成显著减少，并且当与抗VEGFR-2疗法组合时协同抑 制肿瘤生长(S.J.Priceman等，Blood(2010)115:1461)。对小鼠中成 胶质细胞瘤肿瘤的照射被证明导致肿瘤大小的暂时减小，不料随之而 来由表达CD11b和F4/80表面抗原的骨髓来源的单核细胞的募集介 导的反弹性肿瘤血管发生(M.Kioi等，JournalofClinicalInvestigation (2010)120:694)。CD11b+和F4/80+单核细胞也已知表达功能性c-FMS 受体。因此，通过使用c-FMS激酶抑制剂阻断肿瘤浸润性c-FMS+骨 髓来源的单核细胞提供预防肿瘤反弹性血管发生和成胶质细胞瘤肿 瘤进展的可能性。CSF-1R阻断也已显示逆转免疫活性鼠类乳腺癌模 型中的免疫耐受机制，并通过上调CD8+T细胞介导的肿瘤抑制促进 抗肿瘤免疫程序的出现。将抗肿瘤免疫程序的恢复在机制上与TAM 介导的程序性死亡配体1(PDL-1)免疫耐受的c-FMS抑制剂阻断联系 起来(D.G.DeNardo等，CancerDiscovery(2011)1:OF52)。

因此，c-FMS激酶、c-KIT激酶或PDGFR激酶的小分子抑制剂 提供用于治疗自身免疫疾病的新型疗法，特别是阻断由先天免疫系统 介导的慢性组织破坏的合理方法。c-FMS激酶的抑制也提供用于治疗 癌症，特别是用于治疗癌症侵袭、肿瘤血管生成或血管发生、癌症转 移、癌症免疫耐受，以及用于治疗倾向于骨转移的癌症的新型疗法的 合理方法。

目前需要提供选择性抑制造成自身免疫疾病中的慢性组织破坏 的激酶(c-FMS、c-KIT、PDGFR)而不抑制由市售癌症治疗剂靶向 的其它激酶(ABL、BCR-ABL、KDR、SRC、LCK、LYN、FGFR以 及其它激酶)的激酶抑制剂。本发明公开抑制c-FMS、c-KIT和/或 PDGFR激酶以用于治疗自身免疫疾病的新型抑制剂，其也通过不强 效地抑制包括ABL、BCR-ABL、KDR、SRC、LCK、LYN、FGFR、 MET以及其它激酶在内的其它激酶而表现出选择性。本发明的抑制 剂还可用于治疗由c-FMS、c-KIT或PDGFR激酶介导的其它哺乳动 物疾病，包括人类疾病。此类疾病包括但不限于癌症、自身免疫疾病 和骨吸收性疾病。

发明内容

在一个方面中，描述式I的化合物：

以及其药学上可接受的盐、对映异构体、立体异构体和互变异构 体，

其中

A取自由-N(R2)R3和G组成的组；

G选自由以下组成的组

并且其中符号(**)是与嘧啶环的连接点；

每个G部分可进一步被1个、2个或3个R4部分取代；

W是C5-C6杂芳基、苯基、-NHC(O)R6、-NHC(O)R7、 -NHC(O)N(R8)R9或-C(O)N(R8)R9，并且其中每个C5-C6杂芳基或苯 基任选地被1个、2个或3个R5部分取代；

X1和X2单独地并独立地为氢或C1-C6烷基；

R1是氢、C1-C6烷基、其中烷基链被部分或完全氘化的氘代 -C1-C6烷基或支化C3-C8烷基；

R2是氢、C1-C6烷基、其中烷基链被部分或完全氘化的氘代 -C1-C6烷基、支化C3-C8烷基、C3-C8环烷基、其中烷基被完全或 部分氟化的氟代C1-C6烷基、-(CH₂)_m-OR8或3-8元杂环，其中每个 亚烷基任选地被C1-C4烷基取代；

R3是氢、C1-C6烷基、其中烷基链被部分或完全氘化的氘代 -C1-C6烷基、支化C3-C8烷基、C3-C8环烷基、其中烷基被完全或 部分氟化的氟代C1-C6烷基或3-8元杂环；

每个R4单独地并独立地为氢、卤素、C1-C6烷基、其中烷基链 被部分或完全氟化的氟代C1-C6烷基、支化C3-C8烷基、C3-C8环 烷基、-(CH₂)_m-OR8、-(CH₂)_m-NR8(R9)、-(CH₂)_m-R7或氰基，其中每 个亚烷基任选地被C1-C4烷基取代；

每个R5单独地并独立地为氢、C1-C6烷基、其中烷基链被部分 或完全氘化的氘代-C1-C6烷基、支化C3-C8烷基、卤素、氰基、其 中烷基链被部分或完全氟化的氟代C1-C6烷基、-(CH₂)_m-C(O)NR8(R 9)、-(CH₂)_m-C(O)R7、-(CH₂)_m-OR8、-(CH₂)_m-NR8(R9)或-(CH₂)_m-R7， 其中每个亚烷基任选地被C1-C4烷基取代；

每个R6单独地并独立地为氢、C1-C6烷基、支化C3-C8烷基、 C3-C8环烷基、-(CH₂)_m-CN、-(CH₂)_m-OR8、-(CH₂)_m-NR8(R9)或 -(CH₂)_m-R7，其中每个亚烷基任选地被C1-C4烷基取代；

每个R7独立地并单独地选自

并且其中符号(##)是与含有R7部分的各个W、R5或R6部分的 连接点；

每个R7任选地被-(R10)_p取代；

每个R8和R9单独地并独立地为氢、C1-C6烷基、其中烷基链 被部分或完全氟化的氟代C1-C6烷基或支化C3-C8烷基；

每个R10单独地并独立地为C1-C6烷基、-(CH₂)_m-CN、 -(CH₂)_m-OR3、-(CH₂)_m-NR8(R9)或-(CH₂)_m-C(O)-R6，其中每个烷基或 亚烷基任选地被1个或2个C1-C6烷基取代；

其中每个亚烷基任选地被C1-C4烷基取代

每个m单独地并独立地为0、1、2或3；并且

每个p是0、1、2或3。

在式I的一个实施方案中，A是-N(R2)R3。

在式I的一个实施方案中，A是G。

在式I的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的C5-C6杂芳基。

在式I的一个实施方案中，W是-NHC(O)R6、-NHC(O)R7或 -NHC(O)N(R8)R9。

在式I的一个实施方案中，W是-NHC(O)R6。

在式I的一个实施方案中，W是-NHC(O)R7。

在式I的一个实施方案中，W是-NHC(O)N(R8)R9。

在式I的一个实施方案中，W是-C(O)N(R8)R9。

在式I的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的苯基。

在式I的一个实施方案中，X1和X2单独地并独立地为氢或 C1-C6烷基。

在式I的一个实施方案中，X1和X2是氢。

在式I的一个实施方案中，X1和X2中的一个是氢，并且另一个 是C1-C6烷基。

在式I的一个实施方案中，R1是氢、C1-C6烷基、其中烷基链 被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基或支化C3-C8烷基。

在式I的一个实施方案中，R1是氢。

在式I的一个实施方案中，R1是C1-C6烷基。

在一个实施方案中，式I的化合物是式Ia的化合物，其中：W 是C5-C6杂芳基、苯基、-NHC(O)R6、-NHC(O)R7、-NHC(O)N(R8)R9 或-C(O)N(R8)R9，并且其中每个C5-C6杂芳基或苯基任选地被1个、 2个或3个R5部分取代；或其药学上可接受的盐、对映异构体、立 体异构体或互变异构体。

在式Ia的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的C5-C6杂芳基。

在式Ia的一个实施方案中，W是吡唑基、咪唑基、异噁唑基、 噁唑基、噻唑基、三唑基或吡啶基，并且其中各W任选地被1个、2 个或3个R5取代。

在式Ia的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的吡唑基。

在式Ia的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的咪唑基。

在式Ia的一个实施方案中，W是任选地被1个或2个R5取代的 异噁唑基。

在式Ia的一个实施方案中，W是任选地被1个或2个R5取代的 噁唑基。

在式Ia的一个实施方案中，W是任选地被1个或2个R5取代的 噻唑基。

在式Ia的一个实施方案中，W是任选地被1个或2个R5取代的 三唑基。

在式Ia的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的吡啶基。

在式Ia的一个实施方案中，W是-NHC(O)R6、-NHC(O)R7或 -NHC(O)N(R8)R9。

在式Ia的一个实施方案中，W是-NHC(O)R6。

在式Ia的一个实施方案中，W是-NHC(O)R7。

在式Ia的一个实施方案中，W是-NHC(O)N(R8)R9。

在式Ia的一个实施方案中，W是-C(O)N(R8)R9。

在式Ia的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的苯基。

在式Ia的一个实施方案中，X1和X2单独地并独立地为氢或 C1-C6烷基。

在式Ia的一个实施方案中，X1和X2是氢。

在式Ia的一个实施方案中，X1和X2中的一个是氢，并且另一 个是C1-C6烷基。

在式Ia的一个实施方案中，R1是氢、C1-C6烷基、其中烷基链 被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基或支化C3-C8烷基。

在式Ia的一个实施方案中，R1是氢。

在式Ia的一个实施方案中，R1是C1-C6烷基。

在式Ia的一个实施方案中，R2是氢、C1-C6烷基、其中烷基链 被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基、支化C3-C8烷基、C3-C8环 烷基、其中烷基被完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、-(CH₂)_m-OR8 或3-8元杂环，其中每个亚烷基任选地被C1-C4烷基取代。

在式Ia的一个实施方案中，R2是C1-C6烷基、支化C3-C8烷基、 C3-C8环烷基、-(CH₂)_m-OR8或3-8元杂环，其中每个亚烷基任选地 被C1-C4烷基取代。

在式Ia的一个实施方案中，R2是C1-C6烷基。

在式Ia的一个实施方案中，R2是支化C3-C8烷基。

在式Ia的一个实施方案中，R2是C3-C8环烷基。

在式Ia的一个实施方案中，R2是-(CH₂)_m-OR8，其中每个亚烷基 任选地被C1-C4烷基取代。

在式Ia的一个实施方案中，R2是3-8元杂环。

在式Ia的一个实施方案中，R3是氢、C1-C6烷基、其中烷基链 被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基、支化C3-C8烷基、C3-C8环 烷基、其中烷基被完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基或3-8元杂环。

在式Ia的一个实施方案中，R3是氢。

在式Ia的一个实施方案中，R3是C1-C6烷基。

在式Ia的一个实施方案中，R1是氢，R2是C1-C6烷基、支化 C3-C8烷基或C3-C8环烷基，并且R3是氢。

在式Ia的一个实施方案中，R1是C1-C6烷基，R2是C1-C6烷 基、支化C3-C8烷基或C3-C8环烷基，并且R3是氢。

在式Ia的一个实施方案中，R1是甲基，R2是C1-C6烷基、支 化C3-C8烷基或C3-C8环烷基，并且R3是氢。

在一个实施方案中，式I的化合物是式Ib的化合物，其中：X1 和X2单独地并独立地为氢或C1-C6烷基；或其药学上可接受的盐、 对映异构体、立体异构体或互变异构体。

在式Ib的一个实施方案中，X1和X2是氢。

在式Ib的一个实施方案中，X1和X2中的一个是氢，并且另一 个是C1-C6烷基。

在式Ib的一个实施方案中，R1是氢、C1-C6烷基、其中烷基链 被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基或支化C3-C8烷基。

在式Ib的一个实施方案中，R1是氢。

在式Ib的一个实施方案中，R1是C1-C6烷基。

在式Ib的一个实施方案中，R2是氢、C1-C6烷基、其中烷基链 被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基、支化C3-C8烷基、C3-C8环 烷基、其中烷基被完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、-(CH₂)_m-OR8 或3-8元杂环，其中每个亚烷基任选地被C1-C4烷基取代。

在式Ib的一个实施方案中，R2是C1-C6烷基、支化C3-C8烷基、 C3-C8环烷基、-(CH₂)_m-OR8或3-8元杂环，其中每个亚烷基任选地 被C1-C4烷基取代。

在式Ib的一个实施方案中，R2是C1-C6烷基。

在式Ib的一个实施方案中，R2是支化C3-C8烷基。

在式Ib的一个实施方案中，R2是C3-C8环烷基。

在式Ib的一个实施方案中，R2是-(CH₂)_m-OR8，其中每个亚烷 基任选地被C1-C4烷基取代。

在式Ib的一个实施方案中，R2是3-8元杂环。

在式Ib的一个实施方案中，R1是氢，并且R2是C1-C6烷基、 支化C3-C8烷基或C3-C8环烷基。

在式Ib的一个实施方案中，R1是C1-C6烷基，并且R2是C1-C6 烷基、支化C3-C8烷基或C3-C8环烷基。

在式Ib的一个实施方案中，R1是甲基，并且R2是C1-C6烷基、 支化C3-C8烷基或C3-C8环烷基。

在式Ib的一个实施方案中，R5是氢、C1-C6烷基、其中烷基链 被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基、支化C3-C8烷基、卤素、氰 基、其中烷基链被部分或完全氟化的氟代C1-C6烷基、-(CH₂)_m-C(O) NR8(R9)、-(CH₂)_m-C(O)R7、-(CH₂)_m-OR8、-(CH₂)_m-NR8(R9)或-(CH₂) _m-R7，其中每个亚烷基任选地被C1-C4烷基取代。

在式Ib的一个实施方案中，R5是氢、C1-C6烷基、或其中烷基 链被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基或支化C3-C8烷基。

在式Ib的一个实施方案中，R5是C1-C6烷基或其中烷基链被部 分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基。

在式Ib的一个实施方案中，R5是C1-C6烷基。

在一个实施方案中，式I的化合物是式Ic的化合物，其中：W 是C5-C6杂芳基、苯基、-NHC(O)R6、-NHC(O)R7、-NHC(O)N(R8)R9 或-C(O)N(R8)R9，并且其中每个C5-C6杂芳基或苯基任选地被1个、 2个或3个R5部分取代；或其药学上可接受的盐、对映异构体、立 体异构体或互变异构体。

在式Ic的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的C5-C6杂芳基。

在式Ic的一个实施方案中，W是吡唑基、咪唑基、异噁唑基、 噁唑基、噻唑基、三唑基或吡啶基，并且其中各W任选地被1个、2 个或3个R5取代。

在式Ic的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的吡唑基。

在式Ic的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的咪唑基。

在式Ic的一个实施方案中，W是任选地被1个或2个R5取代的 异噁唑基。

在式Ic的一个实施方案中，W是任选地被1个或2个R5取代的 噁唑基。

在式Ic的一个实施方案中，W是任选地被1个或2个R5取代的 噻唑基。

在式Ic的一个实施方案中，W是任选地被1个或2个R5取代的 三唑基。

在式Ic的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的吡啶基。

在式Ic的一个实施方案中，W是-NHC(O)R6、-NHC(O)R7或 -NHC(O)N(R8)R9。

在式Ic的一个实施方案中，W是-NHC(O)R6。

在式Ic的一个实施方案中，W是-NHC(O)R7。

在式Ic的一个实施方案中，W是-NHC(O)N(R8)R9。

在式Ic的一个实施方案中，W是-C(O)N(R8)R9。

在式Ic的一个实施方案中，W是任选地被1个、2个或3个R5 取代的苯基。

在式Ic的一个实施方案中，X1和X2单独地并独立地为氢或 C1-C6烷基。

在式Ic的一个实施方案中，X1和X2是氢。

在式Ic的一个实施方案中，X1和X2中的一个是氢，并且另一 个是C1-C6烷基。

在式Ic的一个实施方案中，R1是氢、C1-C6烷基、其中烷基链 被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基或支化C3-C8烷基。

在式Ic的一个实施方案中，R1是氢。

在式Ic的一个实施方案中，R1是C1-C6烷基。

在式Ic的一个实施方案中，G选自由以下组成的组

其中符号(**)是与嘧啶环的连接点；

并且其中每个G部分可进一步被1个、2个或3个R4部分取代。

在式Ic的一个实施方案中，R1是氢，并且G选自由以下组成的 组

其中符号(**)是与嘧啶环的连接点；

并且其中每个G部分可进一步被1个、2个或3个R4部分取代。

在式Ic的一个实施方案中，R1是C1-C6烷基，并且G选自由以 下组成的组

其中符号(**)是与嘧啶环的连接点；

并且其中每个G部分可进一步被1个、2个或3个R4部分取代。

在式Ic的一个实施方案中，R1是甲基，并且G选自由以下组成 的组

其中符号(**)是与嘧啶环的连接点；

并且其中每个G部分可进一步被1个、2个或3个R4部分取代。

在一个实施方案中，式I的化合物是式Id的化合物，其中：X1 和X2单独地并独立地为氢或C1-C6烷基；或其药学上可接受的盐、 对映异构体、立体异构体或互变异构体。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：X1和 X2是氢。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：X1和 X2中的一个是氢，并且另一个是C1-C6烷基。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：R1是 氢、C1-C6烷基、其中烷基链被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基 或支化C3-C8烷基。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：R1是 氢。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：R1是 C1-C6烷基。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：G选 自由以下组成的组

其中符号(**)是与嘧啶环的连接点；

并且其中每个G部分可进一步被1个、2个或3个R4部分取代。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：R1是 氢，并且G选自由以下组成的组

其中符号(**)是与嘧啶环的连接点；

并且其中每个G部分可进一步被1个、2个或3个R4部分取代。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：R1是 C1-C6烷基，并且G选自由以下组成的组

其中符号(**)是与嘧啶环的连接点；

并且其中每个G部分可进一步被1个、2个或3个R4部分取代。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：R1是 甲基，并且G选自由以下组成的组

其中符号(**)是与嘧啶环的连接点；

并且其中每个G部分可进一步被1个、2个或3个R4部分取代。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：R5是 氢、C1-C6烷基、其中烷基链被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基、 支化C3-C8烷基、卤素、氰基、其中烷基链被部分或完全氟化的氟 代C1-C6烷基、-(CH2)m-C(O)NR8(R9)、-(CH2)m-C(O)R7、-(CH2)m -OR8、-(CH2)m-NR8(R9)或-(CH2)m-R7，其中每个亚烷基任选地被C 1-C4烷基取代。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：R5是 氢、C1-C6烷基、或其中烷基链被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷 基或支化C3-C8烷基。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：R5是 C1-C6烷基或其中烷基链被部分或完全氘化的氘代-C1-C6烷基。

在一个实施方案中，式Id的化合物是其中如下的化合物：R5是 C1-C6烷基。

在一些实施方案中，本发明包含选自以下的化合物：2-(乙基氨 基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基) 嘧啶-4(3H)-酮、2-(二甲基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(异丙基氨基)-5-(6-甲基 -5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)- 酮、2-(乙基氨基)-5-(6-甲基-5-((6'-甲基-[2,3'-联吡啶]-4-基)氧基)吡啶 -2-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(乙基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(4-甲基-1H-咪唑 -1-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-((2-甲氧基乙基)氨 基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基) 嘧啶-4(3H)-酮、5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基) 吡啶-2-基)-2-(甲基氨基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(乙基氨基)-5-(5-((2-(1-甲基 -1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、5-(6-甲基 -5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(吡咯烷-1- 基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(异丙基氨基)-3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H- 吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、4-((6-(2-(异丙基 氨基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-5-基)吡啶-3-基)氧基)-N-甲基吡啶酰胺、 5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2- 吗啉并嘧啶-4(3H)-酮、5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4- 基)氧基)吡啶-2-基)-2-(哌啶-1-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(环丙基氨基)-5-(6- 甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶 -4(3H)-酮、2-(环戊基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶 -4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基 -1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(吡咯烷-1-基)嘧啶 -4(3H)-酮、2-(环丙基氨基)-3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(异丙基氨基)-5-(4-甲 基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)- 酮、N-(4-((6-(2-(异丙基氨基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-5-基)-2-甲基吡啶 -3-基)氧基)吡啶-2-基)乙酰胺、5-(4-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(吡咯烷-1-基)嘧啶-4(3H)-酮、5-(5-((2-(1- 乙基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)-6-甲基吡啶-2-基)-2-(异丙基氨基) 嘧啶-4(3H)-酮、(R)-2-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1- 甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、 (R)-2-(2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑 -4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、(S)-2-(3-(二甲基氨基) 吡咯烷-1-基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基) 吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(乙基氨基)-3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-((2-甲氧 基乙基)氨基)-3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基) 氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-4(3H)- 酮、2-(叔丁基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基) 氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(新戊基氨基)嘧啶-4(3H)-酮和2-(3,3-二 氟吡咯烷-1-基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基) 吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮。

在某些实施方案中，本发明包含治疗至少部分由c-FMS、 PDGFR-β或c-KIT激酶的激酶活性介导的哺乳动物疾病的方法，其 中激酶是野生型形式、突变体致癌形式、异常融合蛋白形式或其同质 多象变体，该方法包括向有需要的哺乳动物给药有效量的式I的化合 物。

在其它实施方案中，本发明包含药物组合物，其包含式I的化合 物和药学上可接受的载体。

在某些实施方案中，组合物包含选自佐剂、赋形剂、稀释剂或稳 定剂的添加剂。

在一些实施方案中，本发明包括治疗癌症、胃肠道间质肿瘤、过 度增殖性疾病、代谢疾病、神经变性疾病、实体肿瘤、黑素瘤、成胶 质细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、肝癌、 骨肉瘤、多发性骨髓瘤、宫颈癌、原发肿瘤部位的转移、转移到骨的 癌症、乳头状甲状腺癌、非小细胞肺癌、结肠癌、类风湿性关节炎、 骨关节炎、多发性硬化、自身免疫性肾炎、狼疮、克罗恩氏病(Crohn’s disease)、哮喘、慢性阻塞性肺病、骨质疏松症、肥大细胞增多症或 肥大细胞白血病的方法，该方法包括向有需要的患者给药有效量的式 I的化合物。

在一些实施方案中，本发明包括治疗成胶质细胞瘤、乳腺癌、胰 腺癌、原发肿瘤部位的转移或转移到骨的癌症的方法，该方法包括向 有需要的患者给药有效量的式I的化合物。

在本发明的方法的某些实施方案中，化合物口服、胃肠外、通过 吸入或皮下给药。

在一些实施方案中，本发明提供式I的化合物或其药学上可接受 的盐用于治疗癌症、胃肠道间质肿瘤、过度增殖性疾病、代谢疾病、 神经变性疾病、实体肿瘤、黑素瘤、成胶质细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、 前列腺癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、肝癌、骨肉瘤、多发性骨髓瘤、宫 颈癌、原发肿瘤部位的转移、转移到骨的癌症、乳头状甲状腺癌、非 小细胞肺癌、结肠癌、类风湿性关节炎、骨关节炎、多发性硬化、自 身免疫性肾炎、狼疮、克罗恩氏病、哮喘、慢性阻塞性肺病、骨质疏 松症、肥大细胞增多症或肥大细胞白血病的用途，该方法包括向有需 要的患者给药有效量的式I的化合物。

在一些实施方案中，本发明提供式I的化合物或其药学上可接受 的盐用于治疗成胶质细胞瘤、乳腺癌、胰腺癌、原发肿瘤部位的转移 或转移到骨的癌症的用途，方法包括向有需要的患者给药有效量的式 I的化合物。

在一些实施方案中，本发明提供式I的化合物或其药学上可接受 的盐用于制备用以治疗癌症、胃肠道间质肿瘤、过度增殖性疾病、代 谢疾病、神经变性疾病、实体肿瘤、黑素瘤、成胶质细胞瘤、卵巢癌、 胰腺癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、肝癌、骨肉瘤、多发性骨 髓瘤、宫颈癌、原发肿瘤部位的转移、转移到骨的癌症、乳头状甲状 腺癌、非小细胞肺癌、结肠癌、类风湿性关节炎、骨关节炎、多发性 硬化、自身免疫性肾炎、狼疮、克罗恩氏病、哮喘、慢性阻塞性肺病、 骨质疏松症、肥大细胞增多症或肥大细胞白血病的药品的用途。

在某些实施方案中，本发明提供式I的化合物或其药学上可接受 的盐用于制备用以治疗成胶质细胞瘤、乳腺癌、胰腺癌、原发肿瘤部 位的转移或转移到骨的癌症的药品的用途。

在下文的随附描述中陈述本发明的细节。尽管在本发明的实践或 测试中可使用与本文所述方法和材料类似或等效的方法和材料，但现 在仍对例示性方法和材料进行描述。根据描述和权利要求书，本发明 的其它特征、目的和优点将显而易见。在说明书和随附的权利要求书 中，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也包括复数形式。除非 另有定义，否则本文中所用的所有技术和科学术语都具有与本发明所 属领域的一般技术人员所通常理解的含义相同的含义。

在整个公开内容中，引用了多个专利、专利申请和出版物。这些 专利、专利申请和出版物的公开内容通过引用全文并入本发明中，以 更全面地描述本领域的技术人员已知的技术到本发明之日时的发展 水平。在专利、专利申请和出版物与本发明之间存在任何不一致的情 况下，以本发明为准。

为了方便，在本说明书、实施例和权利要求书中使用的某些术语 集中于此。除非另有定义，否则本发明中所用的所有技术和科学术语 都具有与本发明所属领域的一般技术人员所通常理解的含义相同的 含义。除非另外说明，否则针对本发明中提供的基团或术语而提供的 最初定义适用于整篇本发明中单独或者作为另一基团的一部分的基 团或术语。

本发明的化合物包括任何和所有可能的同分异构体、立体异构 体、对映异构体、非对映异构体、互变异构体和药学上可接受的盐。 因此，本发明中所用的术语“化合物”、“测试化合物”是指本发明的化 合物以及其任何和所有可能的同分异构体、立体异构体、对映异构体、 非对映异构体、互变异构体和药学上可接受的盐。

定义

本文中所用的术语“烷基”是指直链烷基，其中烷基链长度由数字 范围表示。在示例性实施方案中，“烷基”是指含有1个、2个、3个、 4个、5个或6个碳的如上文所定义的烷基链(即，C1-C6烷基)。烷 基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、丁基、戊基和己基。

本文中所用的术语“支化烷基”是指其中链中存在分支点的烷基 链，并且链中碳的总数由数字范围表示。在示例性实施方案中，“支 化烷基”是指含有3个、4个、5个、6个、7个或8个碳的如上文所 定义的烷基链(即，支化C3-C8烷基)。支化烷基的实例包括但不限 于异丙基、异丁基、仲丁基和叔丁基、2-戊基、3-戊基、2-己基和3- 己基。

本文中所用的术语“烷氧基”是指-O-(烷基)，其中“烷基”如上文所 定义。

本文中所用的术语“支化烷氧基”是指-O-(支化烷基)，其中“支化 烷基”如上文所定义。

本文中所用的术语“亚烷基”是指介于两个其它原子之间的烷基 部分。在示例性实施方案中，“亚烷基”是指含有1个、2个或3个碳 的如上文所定义的烷基部分。亚烷基的实例包括但不限于-CH₂-、 -CH₂CH₂-和-CH₂CH₂CH₂-。在示例性实施方案中，亚烷基是支化的。

本文中所用的术语“炔基”是指含有一个碳碳三键的碳链。在示例 性实施方案中，“炔基”是指含有2或3个碳的如上文所述的碳链(即， C2-C3炔基)。炔基的实例包括但不限于乙炔和丙炔。

本文中所用的术语“芳基”是指其中环的特征在于环成员间共享 离域π电子(芳香性)并且其中环原子的数目由数字范围表示的环状 烃。在示例性实施方案中，“芳基”是指含有6个、7个、8个、9个或 10个环原子的如上文所述的环状烃(即，C6-C10芳基)。芳基的实 例包括但不限于苯、萘、四氢萘、茚和茚满。

本文中所用的术语“环烷基”是指单环饱和碳环，其中环原子的数 目由数字范围表示。在示例性实施方案中，“环烷基”是指含有3个、 4个、5个、6个、7个或8个环原子的如上文所定义的碳环(即， C3-C8环烷基)。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊 基、环己基、环庚基和环辛基。

本文中所用的术语“卤素”或“卤代”是指氟、氯、溴和碘。

本文中所用的术语“杂环”或“杂环基”是指其中至少一个环原子 是O、N或S的环状烃，其中环原子的数目由数字范围表示。本文中 所定义的杂环基部分具有C或N键合部(bondinghand)，杂环通过其 连接到毗邻部分。例如，在一些实施方案中，杂环基的环N原子是 杂环部分的键合原子。在示例性实施方案中，“杂环基”是指含有4个、 5个、6个、7个或8个环原子的单环烃(即，C4-C8杂环基)。杂环 基的实例包括但不限于氮丙啶、环氧乙烷、硫杂丙环、氮杂环丁烷、 氧杂环丁烷、硫杂环丁烷、吡咯烷、四氢呋喃、吡喃、硫代吡喃、硫 代吗啉、硫代吗啉S-氧化物、硫代吗啉S-二氧化物、噁唑啉、四氢 噻吩、哌啶、四氢吡喃、硫杂环己烷(thiane)、咪唑烷、噁唑烷、噻唑 烷、二氧戊环、二硫戊环、哌嗪、噁嗪、二噻烷和二噁烷。

本文中所用的术语“杂芳基”是指其中至少一个环原子是O、N或 S，环的特征在于环成员间共享离域π电子(芳香性)并且其中环原 子的数目由数字范围表示的环状烃。本文中所定义的杂芳基部分具有 C或N键合部，杂芳基环通过其连接到毗邻部分。例如，在一些实施 方案中，杂芳基的环N原子是杂芳基部分的键合原子。在示例性实 施方案中，“杂芳基”是指含有5或6个环原子的如上文所述的环状烃 (即，C5-C6杂芳基)。杂芳基的实例包括但不限于吡咯、呋喃、噻 吩、噁唑、噻唑、异噁唑、异噻唑、咪唑、吡唑、噁二唑、噻二唑、 三唑、四唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、哒嗪和三嗪。

本文中所用的与部分(moiety)有关的术语“取代的”是指在部分上 的任何可接受的位置上连接到该部分的其它取代基。除非另外说明， 否则部分可通过碳、氮、氧、硫或任何其它可接受的原子键合。

本文中所用的术语“盐”包括通常用于形成游离酸的碱金属盐和 用于形成游离碱的加成盐的药学上可接受的盐。盐的性质并不重要， 条件是它是药学上可接受的。合适的药学上可接受的酸加成盐可从无 机酸或有机酸制备。示例性药用盐公开于Stahl,P.H.,Wermuth,C.G. 编.HandbookofPharmaceuticalSalts:Properties,SelectionandUse； VerlagHelveticaChimicaActa/Wiley-VCH:Zurich,2002中，其全部内 容通过引用并入本文中。无机酸的具体非限制性实例是盐酸、氢溴酸、 氢碘酸、硝酸、碳酸、硫酸和磷酸。合适的有机酸包括但不限于脂肪 族、脂环族、芳香族、芳基脂肪族和含有杂环基的羧酸和磺酸，例如 甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、苹果酸、酒石 酸、柠檬酸、抗坏血酸、葡糖醛酸、马来酸、富马酸、丙酮酸、天冬 氨酸、谷氨酸、苯甲酸、邻氨基苯甲酸、甲磺酸、硬脂酸、水杨酸、 对羟基苯甲酸、苯乙酸、扁桃酸、扑酸(双羟萘酸)、甲磺酸、乙磺 酸、苯磺酸、泛酸、甲苯磺酸、2-羟基乙磺酸、磺胺酸、环己基氨基 磺酸、海藻酸、3-羟基丁酸、粘酸和半乳糖醛酸。本文中所公开的含 有游离酸的化合物的合适的药学上可接受的盐包括但不限于金属盐 和有机盐。示例性金属盐包括但不限于合适的碱金属(第Ia族)盐、 碱土金属(第IIa族)盐和其它生理学上可接受的金属盐。此类盐可 由铝、钙、锂、镁、钾、钠和锌制备。示例性有机盐可由伯胺、仲胺、 叔胺和季铵盐，例如氨基丁三醇、二乙胺、四-N-甲铵、N,N'-二苄基 乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基葡 糖胺)和普鲁卡因制备。

本文中所用的术语“给药”是指将化合物或化合物的药学上可接 受的盐或组合物直接给药到受试者。

本文中所用的术语“载体”涵盖载体、赋形剂和稀释剂，并且是指 参与将药剂由机体的一个器官或部分携带或运送到机体的另一个器 官或部分的材料、组合物或媒介物，例如液体或固体填料、稀释剂、 赋形剂、溶剂或囊封材料。

除非另外说明，否则术语“紊乱”在本发明中用以指术语疾病、病 症或病情，并且可与这些术语互换使用。

术语“有效量”和“治疗有效量”在本发明中可互换使用，并且是指 当给药到受试者时能够减轻受试者病症的症状的化合物的量。包含 “有效量”或“治疗有效量”的实际量会根据多种情况而变化，多种情况 包括但不限于所治疗的特定病症、病症的严重程度、患者的体格和健 康状况以及给药途径。熟练的医疗从业者可容易地使用医疗领域中已 知的方法确定合适的量。

本文中所用的术语“分离的”和“纯化的”是指组分与反应混合物 或天然来源的其它组分分离。在某些实施方案中，以分离物的重量计， 分离物含有至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、 至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、 至少约95％或至少约98％的化合物或化合物的药学上可接受的盐。

本文中所用的短语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范 围内适合用于接触人类和动物的组织而无过度的毒性、刺激性、过敏 反应或者其它问题或并发症，并且与合理的利益/风险比相称的那些 化合物、材料、组合物和/或剂型。

本发明中所用的术语“患者”或“受试者”包括但不限于人类或动 物。示例性动物包括但不限于哺乳动物，例如小鼠、大鼠、天竺鼠、 狗、猫、马、牛、猪、猴、黑猩猩、狒狒或恒河猴。

术语“治疗”意欲包括对患者所患癌症的全谱干预，例如给药活性 化合物以减轻、减缓或逆转一种或多种症状，以及延缓癌症的进展， 即使癌症实际上未消除。治疗可为病症的治愈、改善或至少部分好转。

结构、化学和立体化学的定义广泛地取自IUPAC的建议，并且 更具体而言取自由Müller,P.PureAppl.Chem.1994,66，第1077-1184 页所概括的PhysicalOrganicChemistry(IUPACRecommendations 1994)以及由Moss,G.P.PureAppl.Chem.1996,68，第2193-2222页所 概括的BasicTerminologyofStereochemistry(IUPAC Recommendations1996)中所用的术语词汇表。

阻转异构体定义为可作为单独的化合物物质分离并且由单个键 的受阻旋转而形成的构象异构体的子集。

区域异构体或结构异构体定义为涉及相同原子采用不同排列方 式的异构体。

对映异构体定义为彼此为镜像并且非镜像重合的一对分子实体 中的一者。

非对映异构体或非对映立体异构体定义为除对映异构体以外的 立体异构体。非对映异构体或非对映立体异构体是不互为镜像的立体 异构体。非对映立体异构体的特征在于物理性质不同，并且对非手性 试剂以及手性试剂的化学行为有一些差异。

本发明中所用的术语“互变异构体”是指通过其中分子的一个原 子的质子位移到另一个原子的现象产生的化合物。参见March, AdvancedOrganicChemistry:Reactions,MechanismsandStructures，第 4版，JohnWiley&Sons，第69-74页(1992)。互变异构定义为通式

的异构，其中同分异构体(称为互变异构体)容易相互转化；连 接基团X、Y和Z的原子通常为C、H、O或S中的任一种，并且G 是在异构化过程中变成离电体或离核体的基团。最常见的情况，当离 电体为H⁺时，其也称为“质子移变”。互变异构体定义为由互变异构 形成的同分异构体，而与同分异构体是否是可分离的无关。

本发明的示例性化合物优选使用药学上可接受的载体配制为药 物组合物，并通过各种途径给药。优选地，此类组合物用于口服给药。 此类药物组合物和其制备方法在本领域中已知。参见例如 REMINGTON:THESCIENCEANDPRACTICEOFPHARMACY(A. Gennaro等编，第19版，Mack出版公司，1995)。

式I的化合物或其药学上可接受的盐可通过多种本领域已知的方 法，以及下文所述的那些方法来制备。具体合成步骤可以不同方式组 合以制备式I的化合物或其药学上可接受的盐。

在式Ia的化合物的合成中用作起始材料的化合物众所周知，并 且在某种程度上不能商业获得，使用提供的特定参考文献，通过本领 域普通技术人员常用的标准程序容易地合成或者可见于一般的参考 文件。

已知程序和方法的实例包括描述于一般参考文件中的那些，例如 ComprehensiveOrganicTransformations,VCHPublishers公司,1989； CompendiumofOrganicSyntheticMethods，第1-10卷，1974-2002, WileyInterscience；AdvancedOrganicChemistry,ReactionsMechanisms, andStructure，第5版，MichaelB.Smith和JerryMarch,Wiley Interscience,2001；AdvancedOrganicChemistry，第4版，部分B， ReactionsandSynthesis,FrancisA.Carey和RichardJ.Sundberg, KluwerAcademic/PlenumPublishers,2000等，以及其中引用的参考 文献。

使用ChemDraw第10或12版(CambridgeSoft公司，Cambridge, MA)来命名中间体和示例性化合物的结构。

在本发明中使用以下缩写，并且其具有以下定义：“ADP”是腺苷 二磷酸，“浓”是浓缩的，“DBU”是1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯， “DCE”是1,2-二氯乙烷，“DCM”是二氯甲烷，“DIEA”是N,N-二异丙 基乙胺，“DMA”是N,N-二甲基乙酰胺，“DMAP”是4-(二甲基氨基) 吡啶，“DMF”是N,N-二甲基甲酰胺，“dppf”是1,1′-双(二苯基膦基)二 茂铁，“DMEM”是达尔伯克改良型伊格尔培养基(Dulbecco'sModified EagleMedia)，“DMSO”是二甲基亚砜，“DPPA”是二苯基磷酰基叠氮 化物，“ESI”是电喷雾电离，“Et₂O”是二乙醚，“EtOAc”是乙酸乙酯， “EtOH”是乙醇，“GST”是谷胱甘肽S-转移酶，“h”是小时，“Hex”是己 烷，“IC₅₀”是半数最大抑制浓度，“LiMHDS”是双(三甲基甲硅烷基) 氨基锂，“mCPBA”是3-氯过苯甲酸，“MeCN”是乙腈，“MeOH”是甲 醇，“Me₄tBuXPhos”是二-叔丁基(2',4',6'-三异丙基-3,4,5,6-四甲基-[1,1'- 联苯]-2-基)膦，“MHz”是兆赫，“min”是分钟，“MS”是质谱，“MTBE” 是甲基叔丁基醚，“NADH”是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，“NBS”是N- 溴琥珀酰亚胺，“NMR”是核磁共振，“PBS”是磷酸盐缓冲盐水，“Pd/C” 是碳载钯，“Pd₂(dba)₃”是三(二亚苄基丙酮)二钯(0)，“Pd(PPh₃)₄”是四 (三苯基膦)钯(0)，“prep-HPLC”是制备型高效液相色谱，“RT”是室温， 其也称为“环境温度”，其应理解为由15-25℃的标准实验室温度范围 组成，“satd.”是饱和的，“TEA”是三乙胺，“TFA”是三氟乙酸，“THF” 是四氢呋喃，“Tris”是三(羟甲基)氨基甲烷，“Xantphos”是4,5-双(二苯 基膦基)-9,9-二甲基氧杂蒽，并且“X-Phos”是2-二环己基膦基-2′,4′,6′- 三异丙基联苯。

一般化学

式I的化合物通过下文方案和随附实施例中所示的一般合成方法 制备。对于这些方案中的步骤合适的反应条件在本领域是已知的，并 且溶剂和共试剂的适当替代在本领域的技术范围内。本领域技术人员 应理解，可根据需要或期望通过已知技术分离和/或纯化合成中间体， 并且各种中间体可在后续合成步骤中直接使用而很少或不进行纯化。 此外，本领域技术人员应理解，在一些情况下，部分的引入顺序并不 重要。如普通化学技术人员所理解，制备式1的化合物所需步骤的特 定顺序取决于所合成的特定化合物、起始化合物以及取代部分的相对 不稳定性。除非另外说明，否则所有取代基如上文所定义。

式I的化合物可在W和A位置含有-NH或-OH部分。本领域技 术人员应理解，在一些情况下，可能有利的是在合成过程中使用胺保 护基，以暂时掩蔽一个或多个-NH或-OH部分。保护基可使用实现保 护基的移除的标准条件从合成顺序的任何后续中间体移除，条件为本 领域技术人员所熟悉。当未在方案中指定时，本领域技术人员应理解， 下文方案中表示的W和A部分可任选地含有标准氨基或羟基保护 基，其可在合成顺序中在任何适当的时间移除。

本发明的化合物1(式I，其中R1是H)可如方案1中所示而制 备。在一个实施方案中，二-吡啶2可与硼酸酯3或硼酸4反应，以 提供中间体5。2与3或4的反应通常在存在钯催化剂(例如Pd(PPh₃)₄) 和碱(例如碳酸钾)的情况下通过加热而进行。5向7的进一步转化 通过5与试剂M-W(6)的反应而实现，其中M是三烷基甲锡烷基或 硼酸或硼酸酯(当W是杂芳基时)或者其中M是H(当W是 -NHC(O)R6、-NHC(O)R7、-NHC(O)N(R8)R9时)。5向7的转化条件 取决于W-部分的性质，但是通常包括使用钯催化剂，例如Pd(PPh₃)₄或Pd₂(dba)₃，任选地在存在另外的配体例如4,5-双二苯基膦-9,9-二甲 基氧杂蒽(Xantphos)的情况下。完成这些转化的一般条件是本领域技 术人员公知的，并进一步在所附的实施例中示出。最后，7的甲酯的 裂解(例如通过用HBr或三甲基碘硅烷处理)提供式1的化合物， 其中R1是H。

在方案1的另一个实施方案中，化合物7可通过与3或4反应而 直接由8(Z是溴或碘)制备。

在方案1的另一个实施方案中，中间体7可通过以下方式由2制 备：按顺序以2与9或10的反应开始以提供11。11与如上所述的 M-W(6)反应提供12。在另一个实施方案中，8与9或10的反应直接 得到12。12与胺A-H13的反应提供7。在一个实施方案中，12向7的转化通过以下方式完成：依序用氧化剂(诸如间氯过氧苯甲酸)处 理以实现12的硫代甲基部分氧化成甲基亚砜或甲基砜中间体，然后 将中间体用A-H13处理。

方案1

方案2示出式18(式I，其中R1是烷基或支化烷基)的化合物 的制备。以与方案1类似的方式，化合物2可与14或15和钯催化剂 反应以获得16。16与如上所述的M-W(6)进一步反应提供17。中间 体17还可通过8(Z是溴或碘)与14或15和钯催化剂反应而制备。 17与胺A-H(13)的反应得到18。在一个实施方案中，将17的硫代甲 基部分氧化成甲基亚砜或甲基砜，再用胺A-H13处理。

方案2

一般中间体2如方案3中所示而制备。将羟基吡啶19用碘在存 在碳酸盐碱的情况下处理得到碘化物20。将20用2,4-二氯吡啶(21) 在存在碱(例如碳酸钾)的情况下进一步处理提供2。

方案3

一般中间体8如方案4中所示而制备。因此，使中间体22(Y 是卤素)与2-氯-4-羟基吡啶(23)在存在碱(例如碳酸钾)的情况下反 应以提供硝基醚24。24的硝基部分的还原提供胺25。实现24向25的转化的条件是本领域技术人员已知的并包括在诸如甲醇的质子溶 剂中在存在氯化铵的情况下使用锌粉。25与如上所述的M-W(6)进一 步反应提供26。在一个实施方案中，使24向26的转化的步骤顺序 颠倒，以使得24首先与M-W6反应。然后将含有硝基部分的所述反 应产物还原以提供26。胺26向8的转化通过以下方式完成：将26的氨基部分转化成重氮盐，并将重氮部分用卤素原位置换。实现26向8(Z是溴)的转化的条件包括在二溴甲烷中用亚硝酸叔丁酯处理 26和四丁基溴化铵的混合物。实现26向8(Z是碘)的转化的条件 包括在二溴甲烷中用亚硝酸叔丁酯处理26和碘化钾的混合物。

方案4

方案5示出硼酸酯/硼酸3/4、9/10和14/15的合成。在方案5的 一个实施方案中，使氯-嘧啶27与胺A-H13反应，以获得28。转化 条件包括将27和13在例如THF的溶剂中合并，并加热混合物以实 现反应。28与双(频哪醇合)二硼(34)在存在钯催化剂(例如 PdCl₂(dppf))和弱碱(例如乙酸钾)的情况下通过加热而进行的进一 步反应提供敏感性硼酸酯3和/或硼酸4。在实践中，无需分离3和4的潜在混合物即可进一步使用，并通常将28和34的反应产物不进一 步纯化而以粗形式使用。在另一个实施方案中，使29和34在相同的 条件下反应，以提供9和/或10。在实践中，可将29和34的反应产 物不进一步纯化而以粗形式使用。

方案5

在方案5的另一个实施方案中，可将嘧啶酮30用R1-X(31，X 是卤素)烷基化以提供32。在一个实施方案中，所述烷基化通过以 下方式实现：在诸如THF或DMF的溶剂中用例如双(三甲基硅基)氨 基锂的强碱处理29，然后添加31。32的溴化提供33。在一个实施方 案中，使30向33的转化的步骤顺序颠倒，以使得先溴化30再用R1-X 31烷基化。最后，33与34的反应提供硼酸酯14和/或硼酸15。在实 践中，可将33和34的反应产物不进一步纯化而以粗形式使用。

一般中间体38(实施例8，其中W是-C(O)N(R8)R9)如方案6 中所示而制备。因此，使羟基吡啶35与氯吡啶酰胺36在存在例如叔 丁醇钾的碱的情况下反应，以提供醚37。37的氨基部分在存在碘化 物的情况下的重氮化得到碘吡啶38。

方案6

使用本文所述的合成程序和方法以及本领域技术人员已知的方 法，制备了以下化合物：2-(乙基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡 唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(二甲基氨 基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基) 嘧啶-4(3H)-酮、2-(异丙基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(乙基氨基)-5-(6-甲基 -5-((6'-甲基-[2,3'-联吡啶]-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(乙基 氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2- 基)嘧啶-4(3H)-酮、2-((2-甲氧基乙基)氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基 -1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、5-(6-甲基 -5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(甲基氨基) 嘧啶-4(3H)-酮、2-(乙基氨基)-5-(5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4- 基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(吡咯烷-1-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(异丙 基氨基)-3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基) 吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、4-((6-(2-(异丙基氨基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶 -5-基)吡啶-3-基)氧基)-N-甲基吡啶酰胺、5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H- 吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-吗啉并嘧啶-4(3H)-酮、5-(6- 甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(哌啶 -1-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(环丙基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑 -4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(环戊基氨基)-5-(6- 甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶 -4(3H)-酮、3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基) 氧基)吡啶-2-基)-2-(吡咯烷-1-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(环丙基氨基)-3-甲 基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基) 嘧啶-4(3H)-酮、2-(异丙基氨基)-5-(4-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、N-(4-((6-(2-(异丙基氨基)-6- 氧代-1,6-二氢嘧啶-5-基)-2-甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)乙酰胺、 5-(4-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2- 基)-2-(吡咯烷-1-基)嘧啶-4(3H)-酮、5-(5-((2-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)吡 啶-4-基)氧基)-6-甲基吡啶-2-基)-2-(异丙基氨基)嘧啶-4(3H)-酮、 (R)-2-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、(R)-2-(2-(甲氧基甲基) 吡咯烷-1-基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基) 吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、(S)-2-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-5-(6-甲 基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)- 酮、2-(乙基氨基)-3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶 -4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮、2-((2-甲氧基乙基)氨基)-3-甲基 -5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧 啶-4(3H)-酮、5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基) 吡啶-2-基)-2-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-4(3H)-酮、2-(叔丁基氨 基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基) 嘧啶-4(3H)-酮、5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基) 吡啶-2-基)-2-(新戊基氨基)嘧啶-4(3H)-酮和2-(3,3-二氟吡咯烷-1- 基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基) 嘧啶-4(3H)-酮。

实施例

通过以下实施例进一步说明本发明，但这些实施例不应被解释为 将本发明的范围或实质限制为本文中描述的具体程序。要理解的是， 提供这些实施例来说明某些实施方案，因此不旨在限制本发明的范 围。要进一步理解的是，可以采取本领域技术人员能想到的各种其它 实施方案、其变化形式和等效形式，而不偏离本发明的实质和/或所 附权利要求书的范围。

实施例A1：将3-羟基-2-甲基吡啶(20.0g,183mmol)和Na₂CO₃(38.8g,367mmol)在H₂O(320mL)和MeOH(200mL)中的溶液用I₂(46.5g,183mmol)处理并在RT下搅拌1小时。将混合物用HCl(2M) 酸化，用EtOAc(2x)萃取，并将合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩至干。将材料悬浮在1:1EtOAc/Hex中，超声处理，并通 过过滤而收集固体，干燥。将滤液浓缩至干，用DCM处理，通过过 滤收集固体，并与第一固体合并获得6-碘-2-甲基吡啶-3-醇(20.5g, 48％)。MS(ESI)m/z：236.0(M+H⁺)。

将6-碘-2-甲基吡啶-3-醇(6.8g,28.9mmol)、2,4-二氯吡啶(8.56g, 57.9mmol)和K₂CO₃(4.00g,28.9mmol)在DMA(50mL)中的混合物 在110℃和氩气下加热16小时。将混合物冷却到RT，用H₂O处理， 用EtOAc(2x)萃取并将合并的有机物用H₂O然后用盐水洗涤，经 Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法(EtOAc/Hex)纯化，获得作 为白色固体的3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-碘-2-甲基吡啶(7.35g, 73％)。MS(ESI)m/z：346.9(M+H⁺)。

实施例A2：将H₂SO₄的0℃溶液(12mL)用H₂O₂(9.72mL,95 mmol)处理，搅拌10分钟，用2-氨基-5-氟-4-甲基吡啶(2g,15.86mmol) 在H₂SO₄(8mL)中的溶液处理，搅拌15分钟，然后升温到RT并搅 拌3小时。将混合物再次冷却到0℃，用固体NaHCO₃缓慢中和，并 通过过滤收集所得的固体，干燥获得5-氟-4-甲基-2-硝基吡啶(2g, 81％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.57(s,1H),8.42(d,J＝5.3 Hz,1H),2.42(d,J＝1.9Hz,3H)；MS(ESI)m/z：157.1(M+H⁺)。

将5-氟-4-甲基-2-硝基吡啶(2g,12.81mmol)和2-氯-4-羟基吡啶 (1.66g,12.81mmol)在DMF(26mL)中的混合物用Ar鼓泡，用K₂CO₃(2.66g,19.22mmol)处理，在88℃加热24小时，然后在50℃加热2 天。将混合物用水处理，并通过过滤收集所得的固体，干燥获得5-((2- 氯吡啶-4-基)氧基)-4-甲基-2-硝基吡啶(2.72g,80％)。¹HNMR(400 MHz,DMSO-d₆)：δ8.49(s,1H),8.47(s,1H),8.35(d,J＝5.7Hz,1H), 7.24(d,J＝2.3Hz,1H),7.12(dd,J＝5.7,2.3Hz,1H),2.32(s,3H)； MS(ESI)m/z：266.0(M+H⁺)。

将5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-4-甲基-2-硝基吡啶(1.5g,5.65mmol) 和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑 (1.527g,7.34mmol)在二噁烷(20mL)中的溶液用Ar鼓泡，用K₂CO₃(1.171g,8.47mmol)在水(5mL)中的溶液和Pd(PPh₃)₄(0.326g,0.282 mmol)处理，并在80℃加热过夜。将混合物冷却到RT，用水处理， 用DCM(4x)萃取并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过 硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化，获得4-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)吡啶-4-基)氧基)-2-硝基吡啶(2.3g,75％)。¹HNMR(400MHz, DMSO-d₆)：δ8.48(s,1H),8.43-8.42(m,2H),8.27(s,1H),7.98(s,1 H),7.30(d,J＝2.4Hz,1H),6.83(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),3.84(s,3H), 2.34(s,3H)；MS(ESI)m/z：312.1(M+H⁺)。

将4-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)-2-硝基吡 啶(2.3g,7.39mmol)在MeOH(37mL)和THF(37mL)中的溶液用 NH₄Cl(11.86g,222mmol)然后用分批添加的锌粉(4.83g,73.9mmol) 处理，并将混合物在RT下搅拌过夜。将混合物用EtOAc稀释，通过 硅藻土过滤而除去固体，并将滤液浓缩至干，通过硅胶色谱法 (MeOH/DCM)纯化，获得4-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4- 基)氧基)吡啶-2-胺(1.4g,67％)。MS(ESI)m/z：282.1(M+H⁺)。

实施例A3：将实施例A2(0.2g,0.71mmol)在二溴甲烷(5mL)中 的溶液用溴化四丁基铵(0.92g,2.84mmol)和亚硝酸叔丁酯(0.7g,7.11 mmol)处理并在RT下搅拌4小时。将混合物用EtOAc稀释，依次用 饱和NaHCO₃、水和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩至干，获得作 为灰白色固体的2-溴-4-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基) 氧基)吡啶(0.21g,86％)。MS(ESI)m/z：345.1(M+H⁺)。

实施例A4：将实施例A2(0.62g,2.2mmol)、KI(3.7g,22.3mmol) 和二碘甲烷(5mL,62mmol)的悬浮液用亚硝酸叔丁酯(1.4mL,11.7 mmol)处理并在RT下搅拌12小时。将混合物用EtOAc处理，依次 用饱和NaHCO₃(3x)、10％Na₂S₂O₃(2x)和盐水(2x)洗涤，并将合并的 水洗液用EtOAc(2x)反萃取。将合并的有机物经MgSO₄干燥，浓缩 至干并通过硅胶色谱法(EtOAc/DCM)纯化，获得2-碘-4-甲基-5-((2-(1- 甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶(0.51g,59％)。MS(ESI)m/z： 393.0(M+H⁺)。

实施例A5：将5-溴-2-硝基吡啶(15g,73.9mmol)在DMF(300mL) 中的溶液用Ar鼓泡，用Cs₂CO₃(48.2g,148mmol)和2-氯-4-羟基吡啶 (10.53g,81mmol)处理，用Ar再次鼓泡并在85℃加热过夜。将混合 物冷却到RT，通过硅胶床过滤，用EtOAc彻底洗涤，并将滤液用5％ LiCl处理，然后搅拌过夜。分层，将含水层用另外的EtOAc(4x)萃取， 将合并的有机物经Na₂SO₄干燥并浓缩至干。将残余物溶解在EtOAc 中，用5％LiCl处理，搅拌1小时，分层并将含水层用EtOAc(3x) 萃取。将合并的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法 (EtOAc/Hex)纯化。将材料悬浮在MTBE中，超声处理并通过过滤收 集所得的固体，获得2-氯-4-((6-硝基吡啶-3-基)氧基)吡啶(6.06g, 33％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.62(d,J＝2.4,1H),8.43-8.39 (m,2H),8.06(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.36(d,J＝2.0Hz,1H),7.23 (dd,J＝5.6,2.0Hz,1H)；MS(ESI)m/z：252.0(M+H+)。

将2-氯-4-((6-硝基吡啶-3-基)氧基)吡啶(20.0g,79mmol)在MeOH (40mL)中的溶液在存在阮内镍(2.00g,34.1mmol)的情况下在40psi 下氢化3小时。将催化剂通过过滤而除去，用MeOH冲洗并将滤液 浓缩至干，获得作为棕色固体的5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-胺 (18.52g,105％)。MS(ESI)m/z：222.0(M+H⁺)。

将5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-胺(1.00g,4.51mmol)和碘化钾 (3.74g,22.5mmol)在DCM(15mL)中的混合物用亚硝酸叔丁酯(4.65 g,45.1mmol)逐滴处理，并将混合物在RT下搅拌过夜。将混合物用 EtOAc(75mL)稀释，用10％Na₂CO₃(50mL)、然后用水(50mL)最后 用盐水(50mL)洗涤，并经硫酸钠干燥。减压蒸发溶剂得到浓稠的油 性溶液。添加EtOAc(100mL)，将溶液用0.1M硫代硫酸钠(75mL)、 盐水(50mL)洗涤，并经硫酸钠干燥。减压蒸发溶剂，并将所得的油 通过硅胶色谱法纯化，得到2-氯-4-((6-碘吡啶-3-基)氧基)吡啶(695mg, 46％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.80(d,J＝3.0Hz,1H),8.73 (d,J＝5.8Hz,1H),8.35(d,J＝8.6Hz,1H),7.91(dd,J＝8.6,3.1Hz,1 H),7.61(d,J＝2.3Hz,1H),7.48(dd,J＝5.8,2.3Hz,1H)。

实施例A6：将DMF(25mL)用SOCl₂(125mL)缓慢处理以维持 40-50℃的温度。然后将混合物用吡啶-2-羧酸(25g,0.2mol)经0.5小 时分批处理，然后在回流下加热16小时，冷却到RT，用甲苯(80mL) 稀释并浓缩至干(将该过程重复三次)。将所得的残余物用甲苯洗涤， 并减压干燥得到4-氯-吡啶-2-酰氯(27.6g,79％产率)，将其不纯化用 于下一步。

将4-氯-吡啶-2-酰氯(27.6g,0.16mol)在THF(100mL)中的0℃溶 液用MeNH₂在EtOH中的溶液逐滴处理，在3℃下搅拌4小时，然 后浓缩至干。将材料悬浮在EtOAc中，将固体通过过滤而除去并将 滤液用盐水(2x)洗涤，干燥并浓缩得到作为黄色固体的4-氯-N-甲基吡 啶酰胺(16.4g,60％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.78(brs,1H), 8.55(d,J＝5.2Hz,1H),7.97(d,J＝2.0Hz,1H),7.66(m,1H),2.82(d,J ＝4.8Hz,3H)；MS(ESI)m/z：171.0(M+H⁺)。

将2-氨基-5-羟基吡啶(0.968g,8.79mmol)在DMA(15mL)中的溶 液用叔丁醇钾(0.987g,8.79mmol)处理，在RT下搅拌3小时，用4- 氯-N-甲基吡啶酰胺(1.5g,8.79mmol)处理并在RT下搅拌2天。将混 合物浓缩至干，用水处理，用EtOAc(3x)萃取并将合并的有机物用盐 水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法(EtOAc, MeOH/DCM)纯化，获得4-((6-氨基吡啶-3-基)氧基)-N-甲基吡啶酰胺 (1.3g,61％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.75(m,1H),8.46(d,J ＝5.6Hz,1H),7.82(d,J＝2.9Hz,1H),7.34(d,J＝2.6Hz,1H),7.30 (dd,J＝8.9,3.0Hz,1H),7.10(dd,J＝5.6,2.7Hz,1H),6.53(d,J＝8.9 Hz,1H),6.07(s,2H),2.77(d,J＝4.8Hz,3H)；MS(ESI)m/z：245.1 (M+H⁺)。

将4-((6-氨基吡啶-3-基)氧基)-N-甲基吡啶酰胺(0.4g,1.64mmol) 和碘化钾(1.36g,8.19mmol)在二碘甲烷(5.46mL)中的混合物用亚硝 酸叔丁酯(1.95mL,16.4mmol)逐滴处理。将混合物在RT下搅拌过夜， 用EtOAc(75mL)稀释，并用10％碳酸钠(50mL)、10％硫代硫酸盐(50 mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机物经硫酸钠干燥，蒸发至干并通过硅 胶色谱法((EtOAc/Hex)纯化，获得4-((6-碘吡啶-3-基)氧基)-N-甲基吡 啶酰胺(0.214g,36.8％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.78(brd,J ＝5.6Hz,1H),8.54(d,J＝5.6Hz,1H),8.40(d,J＝3.0Hz,1H),7.95(d, J＝8.6Hz,1H),7.50(dd,J＝8.6,3.1Hz,1H),7.45(d,J＝2.6Hz,1H), 7.23(dd,J＝5.6,2.7Hz,1H),2.78(d,J＝4.9Hz,3H)；MS(ESI)m/z： 356.0(M+H⁺)。

实施例B1：将5-溴-2-氯-4-甲氧基嘧啶(0.6g,2.69mmol)在THF (10mL)中的溶液用乙胺(2.0M于THF，6.71mL，13.43mmol)处理， 在60℃下加热1小时，冷却到RT并用水稀释。将混合物用EtOAc(2x) 萃取并将合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通 过柱色谱法(EtOAc/Hex)纯化，获得作为白色固体的5-溴-N-乙基-4- 甲氧基嘧啶-2-胺(0.54g,87％)。MS(ESI)m/z：232.03(M+H⁺)。

将5-溴-N-乙基-4-甲氧基嘧啶-2-胺(0.73g,3.15mmol)在二噁烷 (25mL)中的溶液用Ar鼓泡，用双(频那醇合)二硼(1.04g,4.1mmol)、 KOAc(0.62g,6.29mmol)、PdCl₂(dppf)(0.23g,0.315mmol)处理，并 在100℃加热20小时。将混合物冷却到RT，获得粗(2-(乙基氨基)-4- 甲氧基嘧啶-5-基)硼酸的溶液(假定产率50％)，将其不进一步纯化而 使用。MS(ESI)m/z：198.1(M+H⁺)。

实施例B2：将5-溴-4-甲氧基-2-(甲硫基)嘧啶(1.0g,4.25mmol)、 双(频那醇合)二硼(1.30g,5.10mmol)和KOAc(1.25g,12.76mmol)在 二噁烷(10mL)中的混合物用Ar鼓泡，用PdCl₂(dppf)-DCM加合物 (0.17g,0.21mmol)处理，再次用Ar鼓泡并在85℃加热过夜。将混合 物冷却到RT，用饱和NaHCO₃处理，用EtOAc(3x)萃取并将合并的 有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/EtOAc) 纯化，获得(4-甲氧基-2-(甲硫基)嘧啶-5-基)硼酸频哪醇酯(假定产率 100％)，将其不进一步纯化而使用。MS(ESI)m/z：201.1(M+H⁺)。

实施例B3：将5-溴-2-氯-4-甲氧基嘧啶(1.2g,5.37mmol)在THF (20mL)中的溶液用TEA(1.57mL,10.74mmol)和异丙基胺(0.7mL, 8.1mmol)处理并在60℃加热5小时。将混合物冷却到RT，用水处理， 用EtOAc(2x)萃取并将合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥， 浓缩至干并通过硅胶色谱法(EtOAc/Hex)纯化，获得5-溴-N-异丙基-4- 甲氧基嘧啶-2-胺(0.84g,634％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.10 (s,1H),7.17(brs,1H),3.96-3.94(m,1H),3.87(s,3H),1.12(d,J＝ 6.5Hz,6H)；MS(ESI)m/z：246.0(M+H⁺)。

将5-溴-N-异丙基-4-甲氧基嘧啶-2-胺(0.84g,3.41mmol)在二噁 烷(20mL)中的溶液用Ar鼓泡，用双(频那醇合)二硼(1.127g,4.44 mmol)、KOAc(0.502g,5.12mmol)和PdCl2(dppf)-DCM加合物(0.279 g,0.341mmol)处理，并在95℃加热16小时。将混合物冷却到RT并 浓缩至干，获得粗N-异丙基-4-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂 硼杂环戊烷-2-基)嘧啶-2-胺(假定产率60％)，将其不进一步纯化而 使用。MS(ESI)m/z：212.1(M+H⁺)[相应硼酸的离子]。

实施例B4：将2-(甲硫基)嘧啶-4(3H)-酮(2.0g,14.1mmol)在DMF (40mL)中的0℃悬浮液用固体LiHMDS(3.06g,18.3mmol)然后用碘 甲烷(1.14mL,18.3mmol)处理，升温到RT并搅拌过夜。将混合物用 水猝灭，用EtOAc(3x)萃取并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩 至干并通过硅胶色谱法(EtOAc/Hex)纯化，获得3-甲基-2-(甲硫基)嘧 啶-4(3H)-酮(1.37g,62％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ7.83(d,J ＝6.5Hz,1H),6.17(d,J＝6.5Hz,1H),3.39(s,3H),2.54(s,3H)；MS (ESI)m/z：157.1(M+H⁺)。

将3-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4(3H)-酮(1.37g,8.77mmol)在CHCl₃(15mL)中的0℃溶液用溴(0.54mL,10.5mmol)处理，在0℃搅拌1小 时，用饱和NaHCO₃(15mL)猝灭，缓慢升温到RT并搅拌过夜。将混 合物用DCM(3x)萃取，将合并的有机物经Na₂SO₄干燥并浓缩至干， 获得5-溴-3-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4(3H)-酮(2.0g,97％产率)。¹HNMR (400MHz,DMSO-d₆)：δ8.24(s,1H),3.45(s,3H),2.55(s,3H)；MS (ESI)m/z：235.0(M+H⁺)。

将5-溴-3-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4(3H)-酮(1.0g,4.25mmol)、双(频 那醇合)二硼(1.30g,5.10mmol)和KOAc(1.25g,12.7mmol)在二噁烷 (10mL)中的混合物用Ar鼓泡，用PdCl₂(dppf)-DCM-加合物(0.17g, 0.21mmol)处理，再次用Ar鼓泡并在85℃加热过夜。将混合物冷却 到RT，用饱和NaHCO₃猝灭，用EtOAc(3x)萃取并将合并的有机物 经Na₂SO₄干燥且浓缩至干，获得3-甲基-2-(甲硫基)-5-(4,4,5,5-四甲基 -1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(假定产率100％)。MS (ESI)m/z：202.1(硼酸+H⁺的质量)。

实施例C1：将粗实施例B1(0.310g,1.574mmol)在二噁烷(25 mL)中的溶液用K₂CO₃(0.65g,4.72mmol)在水(4mL)中的脱气溶液、 实施例A1(0.55g,1.58mmol)和Pd(PPh₃)₄(0.18g,0.16mmol)处理， 并在90℃加热16小时。将混合物冷却到RT，用水稀释，用EtOAc(3x) 萃取并将合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通 过柱色谱法(EtOAc/DCM)纯化，获得5-(5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲 基吡啶-2-基)-N-乙基-4-甲氧基嘧啶-2-胺(350mg,60％)。¹HNMR(400 MHz,DMSO-d₆)：δ8.73(s,1H),8.29(d,J＝5.8Hz,1H),7.77(d,J＝ 8.9Hz,1H),7.61(d,J＝8.6Hz,1H),7.38(brs,1H),7.06(d,J＝2.3 Hz,1H),6.94(dd,J＝5.8,2.3Hz,1H),4.01-3.91(m,3H),3.36-3.34 (m,2H),2.33(s,3H),1.15(t,J＝7.4Hz,3H)；MS(ESI)m/z：372.1 (M+H⁺)。

实施例C2：将B2(0.63g,2.25mmol)、实施例A1(0.65g,1.88 mmol)和K₂CO₃(0.78g,5.63mmol)在5:1二噁烷/H₂O(6mL)中的混合 物用Ar鼓泡，用Pd(PPh₃)₄(0.22g,0.19mmol)处理，再次用Ar鼓泡 并在90℃加热过夜。将混合物冷却到RT，用饱和NaHCO₃处理，用 EtOAc(3x)萃取并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过 硅胶色谱法(EtOAc/Hex)纯化，获得5-(5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基 吡啶-2-基)-4-甲氧基-2-(甲硫基)嘧啶(0.49g,70％)。¹HNMR(400MHz, DMSO-d₆)：δ8.91(s,1H),8.31(d,J＝5.8Hz,1H),7.89(d,J＝8.5Hz, 1H),7.72(d,J＝8.5Hz,1H),7.11(d,J＝2.3Hz,1H),6.99(dd,J＝5.8, 2.3Hz,1H),4.06(s,3H),2.58(s,3H),2.39(s,3H)；MS(ESI)m/z： 375.1(M+H⁺)。

将1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡 唑(0.30g,1.44mmol)、5-(5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基吡啶-2-基)-4- 甲氧基-2-(甲硫基)嘧啶(0.49g,1.31mmol)和K₂CO₃(0.54g,3.92mmol) 在5:1二噁烷/水(18mL)中的混合物用Ar鼓泡，用Pd(PPh₃)₄(0.15g, 0.13mmol)处理，再次用Ar鼓泡并在90℃加热4小时。将混合物冷 却到RT，用饱和NaHCO₃处理，用EtOAc(3x)萃取并将合并的有机 物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化， 获得4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基) 吡啶-2-基)-2-(甲硫基)嘧啶(0.54g,98％)。¹HNMR(400MHz, DMSO-d₆)：δ8.93(s,1H),8.39(d,J＝5.7Hz,1H),8.28(s,1H),7.99 (d,J＝0.7Hz,1H),7.88(d,J＝8.5Hz,1H),7.65(d,J＝8.6Hz,1H), 7.30(d,J＝2.4Hz,1H),6.66(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),4.06(s,3H), 3.85(s,3H),2.58(s,3H),2.42(s,3H)；MS(ESI)m/z：421.1(M+H⁺)。

实施例C3：将实施例B4(0.35g,1.73mmol)、实施例A1(0.50g, 1.44mmol)和K₂CO₃(0.60g,4.33mmol)在5:1二噁烷/水(12mL)中的 混合物用Ar鼓泡，用Pd(PPh₃)₄(0.17g,0.14mmol)处理，再次用Ar 鼓泡并在90℃加热过夜。将混合物用饱和NaHCO₃猝灭，用EtOAc(3x) 萃取并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法 (EtOAc/Hex)纯化，获得5-(5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基吡啶-2- 基)-3-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4(3H)-酮(0.52g,67％)。MS(ESI)m/z：375.1 (M+H⁺)。

将5-(5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基吡啶-2-基)-3-甲基-2-(甲硫 基)嘧啶-4(3H)-酮(0.52g,0.97mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2- 二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.22g,1.07mmol)和K₂CO₃(0.40g, 2.9mmol)在5:1二噁烷/水(6mL)中的混合物用Ar鼓泡，用Pd(PPh₃)₄(0.12g,0.10mmol)处理，再次用Ar鼓泡并在90℃加热过夜。通过过 滤除去固体，将滤液用饱和NaHCO₃处理，用EtOAc(3x)萃取并将合 并的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/DCM) 纯化，获得3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基) 氧基)吡啶-2-基)-2-(甲硫基)嘧啶-4(3H)-酮(140mg,34％)。MS(ESI) m/z：421.1(M+H⁺)。

实施例C4：将实施例B3(0.698g,2.381mmol)在二噁烷(20mL) 中的溶液用实施例A1(0.7g,2.4mmol)、K₂CO₃(0.22g,1.6mmol)在 水(6mL)中的溶液和Pd(PPh₃)₄(0.18g,0.16mmol)处理，用Ar鼓泡并 在90℃加热过夜。将混合物冷却到RT，用水处理，用EtOAc(2x)萃 取并将合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过 硅胶色谱法(EtOAc/Hex)纯化，获得5-(5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基 吡啶-2-基)-N-异丙基-4-甲氧基嘧啶-2-胺(0.48g,55％)。MS(ESI)m/z： 386.2(M+H⁺)。

实施例1：将实施例C1(0.12g,0.26mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5- 四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.070g,0.35mmol)在 二噁烷(4mL)中的溶液用Ar鼓泡，用K₂CO₃(0.07g,0.51mmol)在水 (1mL)中的溶液、Pd(PPh₃)₄(0.03g,0.026mmol)处理，并在90℃加热 2小时。将混合物冷却到RT，用水稀释，用EtOAc(2x)萃取并将合 并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过柱色谱法 (MeOH/DCM)纯化，获得作为白色固体的N-乙基-4-甲氧基-5-(6-甲基 -5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(77 mg,71％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.74(s,1H),8.36(d,J＝ 5.7Hz,1H),8.26(s,1H),7.97(d,J＝0.7Hz,1H),7.76(d,J＝8.5Hz, 1H),7.55(d,J＝8.6Hz,1H),7.36(brs,1H),7.25(d,J＝2.4Hz,1H), 6.61(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),3.96(s,3H),3.84(s,3H),3.40-3.30(m, 2H),2.37(s,3H),1.14(brm,3H)；MS(ESI)m/z：418.2(M+H⁺)。

将N-乙基-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶 -4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.29g,0.7mmol)和48％HBr水溶液 (0.32mL,2.78mmol)在乙酸(5mL)中的混合物在90℃加热6小时。 将混合物冷却到RT，用水(60mL)稀释，用固体NaHCO₃使之呈碱性， 用1:1EtOAc/THF(3x)萃取并将合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩至干。将残余物用MeCN搅拌1小时并通过过滤收集所 得的固体，获得作为白色固体的2-(乙基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基 -1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(210mg, 75％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ11.20(brs,1H),8.67(s,1H), 8.35(d,J＝5.7Hz,1H),8.24-8.26(m,2H),7.96(s,1H),7.50(d,J＝ 8.6Hz,1H),7.21(d,J＝2.4Hz,1H),6.88(brs,1H),6.60(dd,J＝5.7, 2.4Hz,1H),3.84(s,3H),3.34-3.32(m,2H),2.34(s,3H),1.12(t,J＝ 7.2Hz,3H)；MS(ESI)m/z：404.2(M+H⁺)。

实施例2：将实施例C2(0.13g,0.309mmol)在DCM(5mL)中 的溶液用mCPBA(0.09g,0.37mmol)分批处理，在RT下搅拌过夜， 用TEA(0.5mL)和N,N-二甲基胺HCl盐(500mg)处理并在RT下搅拌 2小时。将混合物用饱和NaHCO₃处理，用DCM(2x)萃取并将合并 的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/DCM) 纯化，获得4-甲氧基-N,N-二甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(60mg,47％)。MS(ESI)m/z： 418.2(M+H⁺)。

将4-甲氧基-N,N-二甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.060g,0.144mmol)在乙酸(5 mL)中的溶液用HBr(0.065mL,0.575mmol)处理，在90℃加热6小 时，冷却到RT并用冰水猝灭。将溶液用NaHCO₃和NaCl处理，用 1:1THF/EtOAc(3x)萃取并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥并浓缩至 干。将材料用MeCN(1mL)处理，使之在RT下静置并通过过滤收集 所得的固体，获得2-(二甲基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(43mg,71％)。¹HNMR (400MHz,DMSO-d₆)：δ11.23(s,1H),8.73(s,1H),8.36(d,J＝5.7Hz, 1H),8.30(m,1H),8.26(s,1H),7.97(s,1H),7.51(m,1H),7.23(d,J＝ 2.4Hz,1H),6.62(brs,1H),3.85(s,3H),3.12(s,6H),2.35(s,3H)； MS(ESI)m/z：404.2(M+H⁺)。

实施例3：将实施例C2(0.13g,0.309mmol)在DCM(5mL)中 的溶液用mCPBA(0.09g,0.37mmol)分批处理，在RT下搅拌过夜， 用异丙基胺(0.5mL)处理并在RT下搅拌过夜。将混合物用饱和 NaHCO₃处理，用DCM(2x)萃取并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥， 浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化，获得N-异丙基-4-甲 氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基) 嘧啶-2-胺(63mg,47％)。MS(ESI)m/z：432.2(M+H⁺)。

将N-异丙基-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡 啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.063g,0.14mmol)在乙酸(5mL) 中的溶液用HBr(0.066mL,0.58mmol)处理，在90℃加热4小时，冷 却到RT并用冰水猝灭。将溶液用NaHCO₃和NaCl处理，用1:1 THF/EtOAc(3x)萃取并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥并浓缩至干。 将材料用MeCN(1mL)处理，使之在RT下静置并通过过滤收集所得 的固体，获得2-(异丙基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(25mg,38％)。¹HNMR(400 MHz,DMSO-d₆)：δ10.8(brs,1H),8.68(s,1H),8.36(d,J＝5.7Hz,1 H),8.27(s,1H),8.26(s,1H),7.96(s,1H),7.51(d,J＝8.6Hz,1H), 7.22(d,J＝2.4Hz,1H),6.67(brs,1H),6.61(d,J＝5.6Hz,1H),4.07 (m,1H),3.85(s,3H),2.34(s,3H),1.17(d,J＝6.5Hz,6H)；MS(ESI) m/z：418.2(M+H⁺)。

实施例4：将实施例C1(0.15g,0.4mmol)和2-甲基-5-(4,4,5,5- 四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(0.13g,0.57mmol)在二噁 烷(4mL)中的溶液用Ar鼓泡，用K₂CO₃(0.11g,0.8mmol)在水(1mL) 中的溶液处理，并在90℃加热2小时。将混合物冷却到RT，用水稀 释，用EtOAc(3x)萃取并将合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干 燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化，获得作为橙色泡 沫的N-乙基-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((6'-甲基-[2,3'-联吡啶]-4-基)氧基) 吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.106g,61％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ 9.11(d,J＝2.4Hz,1H),8.74(s,1H),8.54(d,J＝5.7Hz,1H),8.29(dd, J＝8.1,2.4Hz,1H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.65(d,J＝2.4Hz,1H), 7.59(d,J＝8.6Hz,1H),7.34(d,J＝8.2Hz,1H),7.02(d,J＝1.9Hz,1 H),6.79(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),3.96(s,3H),3.36-3.34(m,2H),2.51 (s,3H),2.38(s,3H),1.15(s,3H)；MS(ESI)m/z：429.2(M+H⁺)。

使用实施例1的程序，将N-乙基-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((6'-甲基 -[2,3'-联吡啶]-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.13g,0.3mmol)和 48％HBr(0.66mL,12mmol)合并，获得作为白色固体的2-(乙基氨 基)-5-(6-甲基-5-((6'-甲基-[2,3'-联吡啶]-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶 -4(3H)-酮(0.09g,73％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ11.08(s,1H), 9.10(s,1H),8.68(s,1H),8.53(d,J＝5.7Hz,1H),8.28(d,J＝8.3Hz, 2H),7.62(s,1H),7.54(d,J＝8.7Hz,1H),7.34(d,J＝8.2Hz,1H), 6.82(brs,1H),6.78(d,J＝5.7Hz,1H),3.35-3.32(m,2H),2.50(s,3 H),2.35(s,3H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)；MS(ESI)m/z：415.2(M+H⁺)。

实施例5：将Me₄tBuXPhos(0.018g,0.043mmol)和Pd₂(dba)₃(0.020g,0.022mmol)在二噁烷(1mL)中的混合物用Ar鼓泡，在100℃ 加热几分钟，用实施例C1(0.16g,0.43mmol)、4-甲基-1H-咪唑(0.1g, 1.3mmol)和K₃PO4(0.18g,0.86mmol)处理并在100℃加热20小时。 将混合物冷却到RT，用EtOAc稀释，将固体通过硅藻土过滤而除去 并用EtOAc洗涤。将滤液用水然后用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓 缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化，获得作为白色固体的 N-乙基-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-4-基)氧 基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.12g,67％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)： δ8.75(s,1H),8.40(d,J＝1.4Hz,1H),8.32(d,J＝5.8Hz,1H),7.77(d, J＝8.7Hz,1H),7.65(s,1H),7.59(d,J＝8.6Hz,1H),7.49(brs,1H), 7.42(d,J＝2.2Hz,1H),6.74(dd,J＝5.8,2.2Hz,1H),3.96(s,3H), 3.36-3.34(m,2H),2.37(s,3H),2.13(s,3H),1.14(s,3H)；MS(ESI) m/z：418.2(M+H⁺)。

使用实施例1的程序，合并N-乙基-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(4- 甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.12g,0.29 mmol)和48％HBr(0.63mL,11.5mmol)，获得作为白色固体的2-(乙 基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶 -2-基)嘧啶-4(3H)-酮(0.06g,51％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ 10.60(brs,1H),8.68(s,1H),8.40(d,J＝1.3Hz,1H),8.31-8.30(m,2 H),7.64(s,1H),7.54(d,J＝8.6Hz,1H),7.39(d,J＝2.2Hz,1H),6.93 (brs,1H),6.73(dd,J＝5.8,2.2Hz,1H),3.35-3.33(m,2H),2.35(s,3 H),2.13(s,3H),1.12(t,J＝7.1Hz,3H)；MS(ESI)m/z：404.2(M+H⁺)。

实施例6：将实施例C2(0.15g,0.36mmol)在DCM(5mL)中的 溶液用mCPBA(0.11g,0.43mmol)分批处理，在RT下搅拌过夜，用 2-甲氧基乙胺(0.5mL)处理并在RT下搅拌4小时。将混合物用饱和 NaHCO₃处理，用DCM(3x)萃取并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥， 浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化，获得4-甲氧基-N-(2- 甲氧基乙基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基) 吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(100mg,63％)。MS(ESI)m/z：448.2(M+H⁺)。

将4-甲氧基-N-(2-甲氧基乙基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑 -4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.10g,0.22mmol)在乙酸 (5mL)中的溶液用HBr(0.10mL,0.90mmol)处理，在90℃加热4小 时，冷却到RT并用冰水猝灭。将溶液用NaHCO₃和NaCl处理，用 EtOAc(3x)萃取并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥并浓缩至干。将材 料用MeCN(3mL)处理，并通过过滤收集所得的固体，获得2-((2-甲 氧基乙基)氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧 基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(65mg,61％)。¹HNMR(400MHz, DMSO-d₆)：δ11.02(brs,1H),8.67(s,1H),8.35(d,J＝5.7Hz,1H), 8.29-8.23(m,2H),7.96(d,J＝0.7Hz,1H),7.50(d,J＝8.6Hz,1H), 7.22(d,J＝2.4Hz,1H),6.85(brs,1H),6.60(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H), 3.84(s,3H),3.53-3.44(m,4H),3.28(s,3H),2.34(s,3H)；MS(ESI) m/z：434.2(M+H⁺)。

实施例7：将实施例C2(0.15g,0.357mmol)在DCM(5mL)中 的溶液用mCPBA(0.11g,0.43mmol)分批处理，在RT下搅拌过夜， 用甲胺(2.0M于THF中，3.6mL，7.2mmol)处理并在RT下搅拌4 小时。将混合物用饱和NaHCO₃处理，用DCM(3x)萃取并将合并的 有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯 化，获得4-甲氧基-N-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶 -4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(100mg,70％)。MS(ESI)m/z：404.2 (M+H⁺)。

将4-甲氧基-N-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶 -4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.10g,0.25mmol)在乙酸(5mL)中的 溶液用HBr(0.12mL,1.0mmol)处理并在90℃加热4小时。将混合物 冷却到RT，用冰水猝灭，用NaHCO₃和NaCl处理，并用EtOAc(3x) 萃取。将合并的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干，将所得的材料用 MeCN(3mL)处理，并通过过滤收集固体，获得5-(6-甲基-5-((2-(1- 甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(甲基氨基)嘧啶 -4(3H)-酮(52mg,53％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ11.26(s,1H), 8.70(s,1H),8.36(d,J＝5.7Hz,1H),8.28(m,1H),8.26(s,1H),7.97 (s,1H),7.51(d,J＝8.6Hz,1H),7.22(d,J＝2.4Hz,1H),6.70(brs,1 H),6.61(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),3.85(s,3H),2.85(d,J＝4.7Hz,3H), 2.35(s,3H)；MS(ESI)m/z：390.2(M+H⁺)。

实施例8：将实施例B1(0.20g,0.51mmol)、实施例A5(0.17g, 0.51mmol)和K₂CO₃(0.21g,1.52mmol)在二噁烷(6mL)和水(1.5mL) 中的混合物用Ar鼓泡，用Pd(PPh₃)₄(0.06g,0.051mmol)处理，再次 用Ar鼓泡并在90℃加热7小时。将混合物冷却到RT，用饱和NaHCO₃处理，用EtOAc(3x)萃取并将合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法(EtOAc/Hex)纯化，获得5-(5-((2- 氯吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-N-乙基-4-甲氧基嘧啶-2-胺(90mg, 50％)。MS(ESI)m/z：358.1(M+H⁺)。

将5-(5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-N-乙基-4-甲氧基嘧啶 -2-胺(0.090g,0.25mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂 环戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.060g,0.28mmol)和K₂CO₃(0.10g,0.76 mmol)在5:1二噁烷/水(6mL)中的混合物用Ar鼓泡，用Pd(PPh₃)₄(0.03 g,0.025mmol)处理，再次用Ar鼓泡并在90℃加热7小时。将混合 物冷却到RT，用饱和NaHCO₃猝灭，用EtOAc(3x)萃取并将合并的 有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法 (MeOH/DCM)纯化，获得N-乙基-4-甲氧基-5-(5-((2-(1-甲基-1H-吡唑 -4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(80mg,79％)。MS(ESI) m/z：404.2(M+H⁺)。

使用实施例7的程序，将N-乙基-4-甲氧基-5-(5-((2-(1-甲基-1H- 吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.080g,0.20mmol)与 乙酸(3mL)和HBr(0.090mL,0.79mmol)合并，获得2-(乙基氨 基)-5-(5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶 -4(3H)-酮(40mg,51％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ11.12(s,1H), 8.66(s,1H),8.43(m,2H),8.38(d,J＝5.7Hz,1H),8.26(s,1H),7.97 (d,J＝0.7Hz,1H),7.62(dd,J＝8.8,2.9Hz,1H),7.28(d,J＝2.4Hz,1 H),63.80(brs,1H),6.72(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),3.85(s,3H),3.35 (m,2H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)；MS(ESI)m/z：390.2(M+H⁺)。

实施例9：将实施例C2(0.15g,0.36mmol)在DCM(5mL)中的 溶液用mCPBA(0.11g,0.43mmol)处理，在RT搅拌2小时，用吡咯 烷(0.5mL)处理并在RT搅拌过夜。将混合物用饱和NaHCO₃处理， 用DCM(3x)萃取并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过 硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化，获得4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(吡咯烷-1-基)嘧啶(100 mg,63％)。MS(ESI)m/z：444.2(M+H⁺)。

将4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧 基)吡啶-2-基)-2-(吡咯烷-1-基)嘧啶(0.1g,0.22mmol)在乙酸(3mL)中 的溶液用HBr(0.1mL,0.90mmol)处理并在90℃加热6.5小时。将混 合物冷却到RT，用冰水猝灭，用NaHCO₃中和至pH＝8并用EtOAc(3x) 萃取。将合并的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干，将所得的材料用 MeCN处理并通过过滤收集固体，获得5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H- 吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(吡咯烷-1-基)嘧啶-4(3H)-酮 (89mg,91％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ11.21(s,1H),8.73(s, 1H),8.36(d,J＝5.7Hz,1H),8.31(m,1H),8.26(s,1H),7.97(d,J＝ 0.7Hz,1H),7.52(m,1H),7.22(d,J＝2.4Hz,1H),6.61(d,J＝5.6Hz, 1H),3.85(s,3H),3.50(m,4H),2.35(s,3H),1.91(m,4H)；MS(ESI) m/z：430.2(M+H⁺)。

实施例10：将实施例C3(0.14g,0.33mmol)和异丙基胺(3mL, 35.0mmol)的混合物在100℃在密封管中加热2天。将混合物冷却到 RT，通过过滤除去固体并将滤液浓缩至干且通过硅胶色谱法纯化， 获得2-(异丙基氨基)-3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡 啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(88mg,59％)。¹HNMR(400 MHz,DMSO-d₆)：δ8.68(s,1H),8.36(d,J＝5.7Hz,1H),8.28(d,J＝ 8.7Hz,1H),8.25(s,1H),7.96(d,J＝0.7Hz,1H),7.52(d,J＝8.6Hz, 1H),7.23(d,J＝2.4Hz,1H),7.05(d,J＝7.6Hz,1H),6.60(dd,J＝5.7, 2.4Hz,1H),4.33(m,1H),3.85(s,3H),3.37(s,3H),2.35(s,3H), 1.23(d,J＝6.6Hz,6H)；MS(ESI)m/z：432.2(M+H⁺)。

实施例11：将PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(0.048g,0.059mmol)、KOAc (0.086g,0.879mmol)、双(频哪醇合)二硼(0.186g,0.732mmol)和5-溴 -N-异丙基-4-甲氧基嘧啶-2-胺(0.144g,0.586mmol)在二噁烷(6mL)中 的悬浮液用Ar鼓泡并在90℃加热20小时。将混合物冷却到RT，用 另外的PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(0.048g,0.059mmol)、KOAc(0.086g, 0.879mmol)和双(频哪醇合)二硼(0.186g,0.732mmol)处理，用Ar鼓 泡并在100℃加热20小时。将混合物冷却到RT，用Pd(PPh₃)₄(0.034 g,0.029mmol)、K₂CO₃(0.121g,0.879mmol)、实施例A6(0.104g, 0.293mmol)和水(1.5mL)处理，用Ar鼓泡，在85℃加热18小时， 然后冷却到RT。将混合物用饱和NaHCO₃处理，用EtOAc(4x)萃取 并将合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅 胶色谱法(EtOAc/DCM)纯化，获得4-((6-(2-(异丙基氨基)-4-甲氧基嘧 啶-5-基)吡啶-3-基)氧基)-N-甲基吡啶酰胺(72mg,62％)。MS(ESI) m/z：395.2(M+H⁺)。

将4-((6-(2-(异丙基氨基)-4-甲氧基嘧啶-5-基)吡啶-3-基)氧基)-N- 甲基吡啶酰胺(0.072g,0.183mmol)在DCE(10mL)中的溶液用三甲 基碘硅烷(0.497mL,3.65mmol)处理，在50℃加热20小时，用另外 的三甲基碘硅烷(0.25mL,1.84mmol)处理并在60℃加热20小时。将 混合物冷却到RT，用DCM/THF(5:1)处理，用饱和NaHCO₃、10％亚 硫酸氢钠然后用盐水洗涤。将合并的水洗液用DCM/THF(5:1)(1x)反 萃取，并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过制备型TLC (EtOAc)纯化，获得4-((6-(2-(异丙基氨基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-5-基) 吡啶-3-基)氧基)-N-甲基吡啶酰胺(16mg,23％)。¹HNMR(400MHz, DMSO-d₆)：δ10.89(brs,1H),8.79(d,J＝5.2Hz,1H),8.66(s,1H), 8.52(d,J＝5.6Hz,1H),8.47(d,J＝2.9Hz,1H),8.44(d,J＝8.8Hz,1 H),7.67(dd,J＝8.8,2.9Hz,1H),7.42(d,J＝2.6Hz,1H),7.21(dd,J＝ 5.6,2.6Hz,1H),6.74(brs,1H),4.08(m,1H),2.77(d,J＝4.8Hz,3H), 1.16(d,J＝6.5Hz,6H)；MS(ESI)m/z：381.2(M+H⁺)。

实施例12：使用实施例6的程序，将实施例C2(0.15g,0.357 mmol)、mCPBA(0.106g,0.428mmol)和吗啉(0.5mL,5.78mmol)合并， 获得4-(4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧 基)吡啶-2-基)嘧啶-2-基)吗啉(127mg,77％)。MS(ESI)m/z：460.2 (M+H⁺)。

使用实施例6的程序，将4-(4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H- 吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-基)吗啉(0.127g,0.276 mmol)和HBr(0.126mL,1.106mmol)在乙酸(3mL)中合并，获得5-(6- 甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-吗啉 并嘧啶-4(3H)-酮(75mg,59％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ11.57 (brs,1H),8.77(s,1H),8.36(d,J＝5.7Hz,1H),8.27-8.22(m,2H), 7.97(s,1H),7.59(m,1H),7.24(d,J＝2.4Hz,1H),6.63(dd,J＝5.7, 2.4Hz,1H),3.84(s,3H),3.68-3.63(m,8H),2.36(s,3H)；MS(ESI) m/z：446.2(M+H⁺)。

实施例13：使用实施例6的程序，将实施例C2(0.15g,0.357 mmol)、mCPBA(0.106g,0.428mmol)和哌啶(0.6mL,6.07mmol)合并， 获得4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基) 吡啶-2-基)-2-(哌啶-1-基)嘧啶(134mg,82％)。MS(ESI)m/z：458.2 (M+H⁺)。

使用实施例6的程序，将4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H- 吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(哌啶-1-基)嘧啶(0.134g, 0.293mmol)和HBr(0.133mL,1.172mmol)在乙酸(3mL)中合并，获得 4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶 -2-基)-2-(哌啶-1-基)嘧啶(103mg,79％)。¹HNMR(400MHz, DMSO-d₆)：δ11.33(brs,1H),8.71(brs,1H),8.35(d,J＝5.7Hz,1H), 8.31-8.18(m,2H),7.96(s,1H),7.53(brs,1H),7.23(d,J＝2.4Hz,1 H),6.61(m,1H),3.84(s,3H),3.68(m,4H),2.35(s,3H),1.61(m,2 H),1.53(m,4H)；MS(ESI)m/z：444.2(M+H⁺)。

实施例14：使用实施例6的程序，将实施例C2(0.100g,0.238 mmol)、mCPBA(0.070g,0.285mmol)和环丙胺(0.300mL,4.33mmol) 合并，获得N-环丙基-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(82mg,80％)。MS(ESI)m/z： 430.2(M+H⁺)。

将N-环丙基-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡 啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.082g,0.191mmol)在乙酸(2mL) 中的溶液用HBr(0.087mL,0.764mmol)处理并在90℃加热4小时。 将混合物冷却到RT，用冰处理，用饱和NaHCO3中和并用EtOAc(3x) 萃取。将合并的有机物用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩至干，用 MeCN处理，超声处理，加热到接近沸腾并使之在RT下静置过夜。 通过过滤收集所得的固体。将合并的水洗液过滤，用水洗涤固体，干 燥并与上面分离到的固体合并，获得2-(环丙基氨基)-5-(6-甲基 -5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮 (35mg,44％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ11.09(brs,1H),8.68 (s,1H),8.35(d,J＝5.7Hz,1H),8.28(m,1H),8.25(s,1H),7.96(d,J ＝0.8Hz,1H),7.66(brs,1H),7.52(d,J＝8.6Hz,1H),7.22(d,J＝2.4 Hz,1H),6.60(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),3.84(s,3H),2.73-2.68(m,1H), 2.34(s,3H),0.75(m,2H),0.55-0.53(m,2H)；MS(ESI)m/z：416.2 (M+H⁺)。

实施例15：使用实施例6的程序，将实施例C2(0.100g,0.238 mmol)、mCPBA(0.070g,0.285mmol)和环戊胺(0.400mL,4.04mmol) 合并，获得N-环戊基-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(85mg,78％)。MS(ESI)m/z： 458.2(M+H⁺)。

使用实施例6的程序，将N-环戊基-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1- 甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.085g, 0.186mmol)和HBr(0.085mL,0.743mmol)在乙酸(2mL)中合并，获得 2-(环戊基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基) 吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(58mg,70％)。¹HNMR(400MHz, DMSO-d₆)：δ10.78(brs,1H),8.67(s,1H),8.35(d,J＝5.7Hz,1H), 8.29-8.23(m,2H),7.96(s,1H),7.50(d,J＝8.6Hz,1H),7.22(d,J＝ 2.4Hz,1H),6.94(brs,1H),6.60(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),4.21-4.18 (m,1H),3.84(s,3H),2.34(s,3H),1.92-1.89(m,2H),1.68-1.64(m,2 H),1.58-1.54(m,2H),1.49-1.40(m,2H)；MS(ESI)m/z：444.2 (M+H⁺)。

实施例16：将实施例C3(0.087g,0.207mmol)在吡咯烷(1.75 mL,21.31mmol)中的溶液在100℃在密封容器中加热过夜，冷却到 RT，浓缩至干并通过硅胶色谱法(EtOAc,MeOH/DCM)纯化。将材料 用MeCN处理，超声处理并通过过滤收集所得的固体，干燥获得3- 甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2- 基)-2-(吡咯烷-1-基)嘧啶-4(3H)-酮(62mg,67％)。¹HNMR(400MHz, DMSO-d₆)：δ8.65(s,1H),8.35(d,J＝5.7Hz,1H),8.30(d,J＝8.6Hz, 1H),8.25(s,1H),7.96(s,1H),7.54(d,J＝8.6Hz,1H),7.24(d,J＝2.4 Hz,1H),6.60(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),3.84(s,3H),3.58(m,4H), 3.45(s,3H),2.35(s,3H),1.87(m,4H)；MS(ESI)m/z：444.2(M+H⁺)。

实施例17：使用实施例16的程序，将实施例C3(0.087g,0.207 mmol)和环丙胺(1.5mL,21.65mmol)合并，获得2-(环丙基氨基)-3-甲 基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基) 嘧啶-4(3H)-酮(49mg,55％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.70(s, 1H),8.35(d,J＝5.7Hz,1H),8.29-8.25(m,2H),7.96(s,1H),7.52(d, J＝8.6Hz,1H),7.48(d,J＝3.1Hz,1H),7.23(d,J＝2.4Hz,1H),6.60 (dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),3.84(s,3H),3.33(s,3H),2.88-2.87(m,1H), 2.35(s,3H),0.77-0.71(m,2H),0.65-0.61(m,2H)；MS(ESI)m/z： 430.2(M+H⁺)。

实施例18：将实施例B3(0.13g,0.44mmol)在二噁烷(4mL)中 的溶液用实施例A3(0.09g,0.26mmol)、Pd(PPh₃)₄(0.03g,0.026 mmol)、K₂CO₃(0.036g,0.26mmol)在水(1mL)中的溶液处理并在90℃ 加热过夜。将混合物冷却到RT，用水处理，用EtOAc(2x)萃取并将 合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色 谱法(MeOH/DCM)纯化，获得N-异丙基-4-甲氧基-5-(4-甲基-5-((2-(1- 甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(55mg, 49％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.69(s,1H),8.35(d,J＝5.7 Hz,2H),8.26(s,1H),7.97(s,1H),7.84(s,1H),7.25(d,J＝2.4Hz,1 H),6.59(dd,J＝5.7Hz,2.5Hz,1H),4.15-4.12(m,1H),3.97(s,3H), 3.84(s,3H),2.17(s,3H),1.175(d,J＝6.4Hz,6H)；MS(ESI)m/z： 432.2(M+H⁺)。

使用实施例3的程序，将N-异丙基-4-甲氧基-5-(4-甲基-5-((2-(1- 甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.053g,0.12 mmol)和HBr(0.2mL)在乙酸(3mL)中合并，获得2-(异丙基氨基)-5-(4- 甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶 -4(3H)-酮(0.03g,59％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ10.86(s,1H), 8.65(s,1H),8.34(m,2H),8.30(s,1H),8.25(s,1H),7.96(s,1H), 7.21(d,J＝2.4Hz,1H),6.63(brs,1H),6.58(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H), 4.09-4.07(m,1H),3.84(s,3H),2.14(s,3H),1.16(d,J＝6.5Hz,6H)； MS(ESI)m/z：418.2(M+H⁺)。

实施例19：将实施例C4在二噁烷(3mL)中的溶液用乙酰胺 (0.06g,1.0mmol)、Cs₂CO₃(0.11g,0.34mmol)、X-Phos(0.03g,0.077 mmol)和Pd₂(dba)₃(0.03g,0.034mmol)处理并在80℃加热过夜。将混 合物用EtOAc稀释，通过硅藻土过滤除去固体，用EtOAc洗涤并将 滤液用水然后用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色 谱法(MeOH/DCM)纯化，获得N-(4-((6-(2-(异丙基氨基)-4-甲氧基嘧啶 -5-基)-2-甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)乙酰胺(60mg,36％)。¹HNMR (400MHz,DMSO-d₆)：δ10.56(s,1H),8.73(s,1H),8.18(d,J＝5.7Hz, 1H),7.76(d,J＝8.4Hz,1H),7.62(s,1H),7.55(d,J＝8.6Hz,1H), 7.44-7.18(brm,1H),6.63(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),4.10(m,1H),3.95 (s,3H),2.33(s,3H),2.02(s,3H),1.17(d,J＝6.4Hz,6H)；MS(ESI) m/z：409.2(M+H⁺)。

将N-(4-((6-(2-(异丙基氨基)-4-甲氧基嘧啶-5-基)-2-甲基吡啶-3- 基)氧基)吡啶-2-基)乙酰胺(0.05g,0.12mmol)在DCE(3mL)中的溶液 用TMS-I(0.5mL,3.67mmol)处理并在50℃加热4小时。将混合物用 10％Na₂S₂O₃和1:1THF/EtOAc稀释，搅拌几分钟，分层并将含水层 用EtOAc(1x)萃取。将合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥， 浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/EtOAc)纯化，获得N-(4-((6-(2-(异 丙基氨基)-4-甲氧基嘧啶-5-基)-2-甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)乙酰 胺(0.018g,37％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ10.79(s,1H), 10.51(s,1H),8.61(s,1H),8.20(d,J＝8.6Hz,1H),8.12(d,J＝5.7Hz, 1H),7.54(s,1H),7.47-7.46(m1H),6.64(brs,1H),6.58(dd,J＝5.8, 2.4Hz,1H),4.03-3.99(m,1H),2.26(s,3H),1.97(s,3H),1.11(d,J＝ 6.5Hz,6H)；MS(ESI)m/z：395.2(M+H⁺)。

实施例20：将实施例A4(0.25g,0.64mmol)、实施例B2(0.22g, 0.78mmol)和K₂CO₃(0.27g,2.0mmol)在二噁烷(5mL)和水(1mL)中 的悬浮液用Ar鼓泡，用Pd(PPh₃)₄(0.070g,0.061mmol)处理并在90℃ 加热16小时。将混合物冷却到RT，用饱和NaHCO₃处理，用EtOAc (4x)萃取，并将合并的有机物经MgSO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色 谱法(MeOH/DCM)纯化，获得4-甲氧基-5-(4-甲基-5-((2-(1-甲基-1H- 吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(甲硫基)嘧啶(0.28g,99％)。 ¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.89(s,1H),8.47(s,1H),8.37(d,J＝ 5.7Hz,1H),8.27(s,1H),7.98(d,J＝5.7Hz,2H),7.28(d,J＝2.4Hz, 1H),6.63(dd,J＝5.7,2.5Hz,1H),4.07(s,3H),3.85(s,3H),2.58(s,3 H),2.22(s,3H)；MS(ESI)m/z：421.1(M+H⁺)。

将4-甲氧基-5-(4-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧 基)吡啶-2-基)-2-(甲硫基)嘧啶(0.28g,0.67mmol)在DCM(10mL)中的 溶液用mCPBA(0.20g,0.80mmol)处理，在RT搅拌3小时，用吡咯 烷(0.50mL,6.1mmol)处理并在RT下搅拌过夜。将混合物用饱和 NaHCO₃处理，用DCM(3x)萃取并将合并的有机物经MgSO₄干燥， 浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化，获得4-甲氧基-5-(4- 甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(吡咯 烷-1-基)嘧啶(0.19g,64％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.76(s,1 H),8.37(s,1H),8.35(d,J＝5.7Hz,1H),8.27(s,1H),7.97(s,1H), 7.85(s,1H),7.25(d,J＝2.4Hz,1H),6.60(dd,J＝5.7,2.5Hz,1H), 4.00(s,3H),3.84(s,3H),3.55(s,5H),2.18(s,3H),1.93-1.92(m,4 H)；MS(ESI)m/z：444.2(M+H⁺)。

将4-甲氧基-5-(4-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧 基)吡啶-2-基)-2-(吡咯烷-1-基)嘧啶(0.19g,0.43mmol)在乙酸(2.5mL) 中的溶液用HBr(48％,0.10mL,1.8mmol)处理并在90℃加热16小 时。将混合物倒到冰(10g)上，用饱和NaHCO₃中和，并将所得的固 体通过过滤而收集，用水和MeCN洗涤并干燥，获得5-(4-甲基 -5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-(吡咯烷-1- 基)嘧啶-4(3H)-酮(0.11g,58％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ11.22 (bs,1H),8.68(s,1H),8.38(s,1H),8.34(d,J＝5.7Hz,1H),8.30(d,J ＝1.3Hz,1H),8.26(s,1H),7.96(s,1H),7.22(d,J＝2.4Hz,1H), 6.60-6.58(m,1H),3.84(s,3H),3.50(bs,4H),2.15(s,3H),1.91(bs,4 H)；MS(ESI)m/z：430.2(M+H⁺)。

实施例21：将实施例C4(0.30g,0.778mmol)、1-乙基-4-(4,4,5,5- 四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.19g,0.85mmol)和 碳酸钾(0.32g,2.33mmol)在二噁烷:H2)混合物(4:1,10mL)中合并。将 混合物用Ar鼓泡，然后添加四(三苯基膦)钯(0)(0.090g,0.078mmol)。 将混合物再次用Ar鼓泡并在90℃加热过夜。将混合物用NaHCO3 猝灭并用EtOAc(3x)萃取。将有机物经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩得 到粗产物。将粗产物通过硅胶色谱法(EtOAc/己烷)纯化，获得 5-(5-((2-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)-6-甲基吡啶-2-基)-N- 异丙基-4-甲氧基嘧啶-2-胺(0.25g，72.2％产率)。1HNMR(400MHz, DMSO-d₆)：δ8.75(s,1H),8.37(d,J＝5.7Hz,1H),8.32(s,1H),7.99(s, 1H),7.77(m,1H),7.56(d,J＝8.6Hz,1H),7.27(d,J＝2.4Hz,1H), 6.61(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),4.14(q,J＝7.3Hz,2H),4.01(s,1H), 3.95(m,3H),2.37(s,3H),1.38(t,J＝7.3Hz,3H),1.18(d,J＝6.5Hz, 6H)；MS(ESI)m/z：446.3(M+H+)。

将5-(5-((2-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)-6-甲基吡啶-2- 基)-N-异丙基-4-甲氧基嘧啶-2-胺(0.25g,0.56mmol)溶解在AcOH(5 mL)中，并添加48％氢溴酸(0.25mL,2.24mmol)。将混合物在90℃加 热5小时。将混合物在高真空下蒸发。将残余物用NaHCO₃溶液处理 并将溶液用EtOAc(3x)萃取。将有机物经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。 将残余物用热MeCN处理。过滤固体，并在真空下干燥，获得 5-(5-((2-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)-6-甲基吡啶-2- 基)-2-(异丙基氨基)嘧啶-4(3H)-酮(185mg，73.1％产率)。¹HNMR(400 MHz,DMSO-d₆)：δ10.81(s,1H),8.68(s,1H),8.36(d,J＝5.7Hz,1H), 8.31(s,1H),8.26(d,J＝8.6Hz,1H),7.98(s,1H),7.51(d,J＝8.6Hz, 1H),7.24(d,J＝2.4Hz,1H),6.60(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),4.14(q,J＝ 7.3Hz,2H),4.07(m,1H),2.34(s,3H),1.37(t,J＝7.3Hz,3H),1.17 (d,J＝6.5Hz,6H)；MS(ESI)m/z：432.2(M+H+)。

实施例22：将实施例C2(0.15g,0.36mmol)溶解在DCM(5mL) 中，然后分批添加mCPBA(0.11g,0.43mmol)。将混合物在RT下搅 拌3小时。添加(S)-(+)-1-甲氧基-2-丙胺(0.45mL)，并将混合物在RT 下搅拌2天。将混合物用NaHCO₃溶液猝灭，并将溶液用DCM(2x) 萃取。将有机物经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩得到粗产物。将材料通 过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化，获得(R)-4-甲氧基-N-(1-甲氧基丙烷 -2-基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2- 基)嘧啶-2-胺(98mg，59.5％产率)。MS(ESI)m/z：462.2(M+H⁺)。

将(R)-4-甲氧基-N-(1-甲氧基丙烷-2-基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基 -1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(98mg,0.21mmol) 溶解在AcOH(3mL)中，然后添加氢溴酸(0.1mL,0.85mmol)。将混 合物在90℃加热3.5小时。浓缩混合物，并将残余物用NaHCO₃溶液 处理。将溶液用EtOAc(3x)萃取。将有机物用NaHCO₃洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，获得粗产物。将粗产物用热MeCN处理并保持 在RT。过滤固体，并用MeCN洗涤，在真空下干燥获得(R)-2-((1-甲 氧基丙烷-2-基)氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基) 氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(67mg，59.2％产率)。¹HNMR(400 MHz,DMSO-d₆)：δ10.85(s,1H),8.67(s,1H),8.36(d,J＝5.7Hz,1 H),8.25(m,2H),7.97(s,1H),7.51(d,J＝8.6Hz,1H),7.23(d,J＝2.4 Hz,1H),6.75(brs,1H),6.60(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),4.19(m,1H), 3.85(s,3H),3.38(m,2H),3.30(s,3H),2.34(s,3H),1.15(d,J＝6.7 Hz,3H)；MS(ESI)m/z：448.2(M+H⁺)。

实施例23：将实施例C2(0.10g,0.24mmol)溶解在DCM(5mL) 中，然后分批添加mCPBA(60mg,0.24mmol)。将混合物在RT下搅 拌2小时。添加(R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷(0.28g,2.38mmol)，然后 将混合物在RT下搅拌过夜。将混合物用NaHCO₃溶液猝灭，并将溶 液用DCM(2x)萃取。将有机物经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩得到粗产 物。将材料通过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化，获得(R)-4-甲氧基 -2-(2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶(96mg，83％产率)。MS(ESI)m/z： 488.3(M+H⁺)。

将(R)-4-甲氧基-2-(2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)-5-(6-甲基 -5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶(96mg, 0.20mmol)溶解在AcOH(3mL)中，然后添加48％氢溴酸(0.1mL)。 将混合物在90℃加热3.5小时。浓缩混合物，并将残余物用NaHCO₃溶液处理。将溶液用EtOAc(3x)萃取，并将有机物用NaHCO₃洗涤， 经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，获得粗产物。将材料用醚处理并超声 处理。过滤固体，用醚洗涤，并在真空下干燥，获得(R)-2-(2-(甲氧基 甲基)吡咯烷-1-基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基) 氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(58mg，60.1％产率)。¹HNMR(400 MHz,DMSO-d₆)：δ11.15(brs,1H),8.73(s,1H),8.36(d,J＝5.7Hz, 1H),8.28(brs,1H),8.26(s,1H),7.97(s,1H),7.53(m,1H),7.23(d,J ＝2.4Hz,1H),6.62(m,1H),4.34(m,1H),3.85(s,3H),3.52-3.40(m, 4H),3.28(s,3H),2.35(s,3H),1.95(brd,J＝27.5Hz,4H)；MS(ESI) m/z：474.3(M+H⁺)。

实施例24：将实施例C2(0.10g,0.24mmol)溶解在DCM(5mL) 中，然后添加mCPBA(60g,0.24mmol)。将混合物在RT下搅拌2.5 小时。添加(3S)-(-)-3-(二甲基氨基)吡咯烷(0.27g,2.37mmol)，然后将 混合物在RT下搅拌过夜。将混合物用NaHCO₃猝灭，并用DCM(2x) 萃取。将有机物经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩得到粗产物。将材料通 过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化，获得(S)-1-(4-甲氧基-5-(6-甲基 -5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2- 基)-N,N-二甲基吡咯烷-3-胺(100mg，86％产率)。MS(ESI)m/z：487.3 (M+H⁺)。

将(S)-1-(4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4- 基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-基)-N,N-二甲基吡咯烷-3-胺(0.10g,0.21 mmol)溶解在AcOH(3mL)中，然后添加48％氢溴酸(0.1mL)。将混 合物在90℃加热3.5小时。浓缩混合物，并将残余物用NaHCO₃溶液 处理。将溶液用EtOAc(3x)萃取，并将有机物用NaHCO₃洗涤，经 Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，获得粗产物。将粗产物用热MeCN处理 并保持在RT。过滤固体，用MeCN洗涤，并在真空下干燥，获得 (S)-2-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑 -4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(62mg，62.8％产率)。 ¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.73(s,1H),8.36(d,J＝5.7Hz,1H), 8.29(m,1H),8.26(s,1H),7.97(s,1H),7.53(d,J＝8.6Hz,1H),7.23 (d,J＝2.4Hz,1H),6.62(dd,J＝5.7,2.4Hz,1H),3.85(s,3H),3.74(m, 2H),3.44(m,1H),3.31(s,3H),3.22(m,1H),2.75(m,1H),2.35(s,3 H),2.18(s,6H),2.11(m,1H),1.77(m,1H)一个质子丢失；MS(ESI) m/z：473.3(M+H⁺)。

实施例25：向微波容器中添加实施例C3(0.11g,0.26mmol)，然 后添加2.0M的乙胺的THF溶液(10mL,20.00mmol)。将混合物在 100℃加热2天。浓缩混合物获得粗产物。将粗产物通过硅胶色谱法 (MeOH/DCM)纯化，获得2-(乙基氨基)-3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基 -1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(90mg，82％ 产率)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.69(s,1H),8.39(d,J＝5.9 Hz,1H),8.29(m,2H),8.01(s,1H),7.56(m,2H),7.30(brs,1H), 6.68(brs,1H),3.86(s,3H),3.45(m,2H),3.36(s,4H),2.36(s,3H), 1.18(t,J＝7.1Hz,3H)；MS(ESI)m/z：418.2(M+H⁺)。

实施例26：向微波容器中添加实施例C3(0.11g,0.26mmol)，然 后添加2-甲氧基乙胺(3mL.34.5mmol)。将混合物在100℃加热2天。 浓缩混合物获得粗产物。将粗产物通过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯 化，获得2-((2-甲氧基乙基)氨基)-3-甲基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H- 吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(98mg，84％产 率)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.68(s,1H),8.37(d,J＝5.8Hz, 1H),8.28(m,2H),7.99(s,1H),7.57(t,J＝5.6Hz,1H),7.54(d,J＝ 8.6Hz,1H),7.27(s,1H),6.64(m,1H),3.85(s,3H),3.56-3.54(m,4 H),3.37(s,3H),3.28(s,3H),2.35(s,3H)；MS(ESI)m/z：448.2 (M+H⁺)。

实施例27：将实施例C2(0.200g,0.476mmol)在DCM(5mL)中 的溶液用mCPBA(0.141g,0.571mmol)处理，在RT下搅拌3小时， 用4-氨基四氢吡喃盐酸盐(0.524g,3.81mmol)和TEA(0.530mL,3.81 mmol)处理，并在RT下搅拌过夜。添加另外的4-氨基四氢吡喃盐酸 盐(0.524g,3.81mmol)和TEA(0.530mL,3.81mmol)，并将混合物在 RT下再搅拌24小时。将混合物浓缩至干，转移至具有DMF(10mL) 的密封容器，用另外的4-氨基四氢吡喃盐酸盐(0.524g,3.81mmol)和 TEA(0.530mL,3.81mmol)处理并在60℃加热过夜。将混合物冷却到 RT，通过过滤除去固体，并用DCM洗涤。将滤液用饱和NaHCO₃处理，用DCM(3x)萃取，并将合并的有机物用5％LiCl(3x)然后用盐 水洗涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/DCM) 纯化，获得4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基) 氧基)吡啶-2-基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)嘧啶-2-胺(125mg,56％)。MS (ESI)m/z：474.2(M+H⁺)。

将4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧 基)吡啶-2-基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)嘧啶-2-胺(0.125g,0.264mmol) 在DCE(3mL)中的溶液用TMS-I(1.078mL,7.92mmol)处理，在60℃ 加热5小时，然后冷却到RT并搅拌过夜。将混合物用10％Na₂S₂O₃和1:1THF/EtOAc处理，搅拌0.5小时，分层，将含水层用EtOAc(1x) 萃取然后将合并的有机物用盐水洗涤，经MgSO₄干燥并浓缩至干。 将材料用MeCN处理，加热到接近回流，并使之在RT下静置一个周 末。通过过滤除去固体，将滤液浓缩至干并通过硅胶色谱法 (MeOH/EtOAc)纯化。将所得的材料用10％MeOH/DCM处理，过滤 以除去固体并浓缩至干，获得5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-2-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)嘧啶-4(3H)- 酮(7.7mg,6％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ10.96(brs,1H),8.67 (s,1H),8.35(d,J＝5.7Hz,1H),8.29-8.24(m,2H),7.96(s,1H),7.51 (d,J＝8.6Hz,1H),7.22(d,J＝2.4Hz,1H),7.00(brs,1H),6.60(dd,J ＝5.7,2.4Hz,1H),3.98(m,1H),3.87-3.80(m,5H),3.39(m,2H),2.34 (s,3H),1.85(m,2H),1.47(m,2H)；MS(ESI)m/z：460.2(M+H⁺)。

实施例28：将实施例C2(0.100g,0.238mmol)在DCM(5mL)中 的溶液用mCPBA(0.059g,0.238mmol)处理，在RT下搅拌2小时， 用叔丁胺(0.4mL,3.81mmol)处理并在RT下搅拌过夜。添加另外的叔 丁胺(0.4mL,3.81mmol)，并将混合物在RT下再搅拌24小时。将混 合物浓缩至干，转移至具有DMF(5mL)的密封容器，用另外的叔丁 胺(0.4mL,3.81mmol)处理并在60℃加热过夜。将混合物冷却到RT， 通过过滤除去固体，并用DCM洗涤。将滤液用饱和NaHCO₃处理， 用DCM(3x)萃取，并将合并的有机物用5％LiCl(3x)然后用盐水洗 涤，经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅胶色谱法(MeOH/DCM)纯化， 获得N-(叔丁基)-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶 -4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(69mg,65％)。MS(ESI)m/z：446.3 (M+H⁺)。

将N-(叔丁基)-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡 啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-2-胺(0.069g,0.155mmol)在乙酸(1.5 mL)中的溶液用HBr(48％水溶液，0.071mL，0.623mmol)处理并 在90℃加热4小时。将混合物从热移开，用冰和EtOAc处理，用饱 和NaHCO₃中和，用1:1EtOAc/THF(3x)萃取并将合并的有机物用盐 水洗涤，经MgSO₄干燥并浓缩至干。将所得的材料用MeCN处理， 加热至接近回流并使之在RT下静置过夜。通过过滤除去固体并将滤 液浓缩至干，通过硅胶色谱法(MeOH/DCM,然后MeOH/EtOAc)纯化 两次，获得2-(叔丁基氨基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡 啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(11mg,15％)。¹HNMR(400 MHz,DMSO-d₆)：δ10.59(s,1H),8.67(s,1H),8.37(d,J＝5.6Hz,1H), 8.27-8.22(m,2H),7.97(s,1H),7.52(d,J＝8.9Hz,1H),7.23(d,J＝ 2.6Hz,1H),6.60(dd,J＝6.1,2.6Hz,1H),6.52(s,1H),3.84(s,3H), 2.34(s,3H),1.41(s,9H)；MS(ESI)m/z：432.2(M+H⁺)。

实施例29：将2,2,2-三基乙酰胺(1.0g,9.89mmol)在THF(100 mL)中的溶液用LiAlH₄(2.0M于THF中，14.83mL，29.7mmol)缓 慢处理并在RT和Ar下搅拌过夜。将混合物用水(1.125mL)、20％KOH (1.125mL)和水(2.25mL)缓慢猝灭，用力搅拌10分钟，用Na₂SO₄处 理，通过硅藻土过滤除去固体并用THF洗涤滤垫。将滤液用1M的 HCl的MeOH溶液(15mL)处理并浓缩至干，获得2,2-二甲基丙烷-1- 胺盐酸盐(413mg,34％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ7.88(brs,2 H),2.57(s,2H),0.93(s,9H)。

将实施例C2(0.100g,0.238mmol)在DCM(5mL)中的溶液用 mCPBA(0.059g,0.238mmol)处理，在RT下搅拌2小时，用2,2-二 甲基丙烷-1-胺盐酸盐(0.410g,3.32mmol)和TEA(0.464mL,3.33 mmol)处理并在RT下搅拌5天。将混合物用饱和NaHCO₃处理，用 DCM(3x)萃取并将合并的有机物经Na₂SO₄干燥，浓缩至干并通过硅 胶色谱法(MeOH/DCM)纯化，获得4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基 -1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)-N-新戊基嘧啶-2-胺(81mg, 74％)。MS(ESI)m/z：460.3(M+H⁺)。

将4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧 基)吡啶-2-基)-N-新戊基嘧啶-2-胺(0.081g,0.176mmol)在乙酸(2mL) 中的溶液用HBr(48％水溶液，0.080mL，0.705mmol)处理，在80℃ 加热6小时，然后冷却到RT过夜。将混合物用冰和EtOAc处理， 用饱和NaHCO₃中和，用EtOAc(3x)萃取并将合并的有机物用盐水洗 涤，经MgSO₄干燥并浓缩至干。将材料悬浮在MeCN中，加热至接 近回流，并使之在RT下静置3小时。通过过滤收集所得的固体，获 得5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2- 基)-2-(新戊基氨基)嘧啶-4(3H)-酮(44mg,56％)。¹HNMR(400MHz, DMSO-d₆)：δ10.84(s,1H),8.68(s,1H),8.35(d,J＝6.6Hz,1H), 8.28-8.23(m,2H),7.96(s,1H),7.52(d,J＝8.6Hz,1H),7.22(d,J＝ 3.0Hz,1H),6.73(brs,1H),6.60(dd,J＝5.1,2.3Hz,1H),3.86(s,3H), 3.22(d,J＝6.2Hz,2H),2.34(s,3H),0.91(s,9H)；MS(ESI)m/z：446.2 (M+H⁺)。

实施例30：将实施例C2(0.10g,0.24mmol)溶解在DCM(5mL) 中，然后分批添加mCPBA(60mg,0.24mmol)。将混合物在RT下搅 拌5天(反应非常慢)。将混合物转移到微波容器并在40℃加热2天。 将混合物用NaHCO₃猝灭，并将溶液用DCM(2x)萃取。将有机物经 Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩得到粗产物。将材料通过硅胶色谱法 (MeOH/DCM)纯化，获得2-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-4-甲氧基-5-(6-甲基 -5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶(80mg， 70％产率)。MS(ESI)m/z：480.2(M+H⁺)。

将2-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-4-甲氧基-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H- 吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶(0.080g,0.167mmol)在 AcOH(3mL)中的溶液用48％氢溴酸(0.1mL)处理。将混合物在90℃ 加热3小时。浓缩混合物，并将残余物用NaHCO₃和EtOAc处理。 将混合物在RT下搅拌。过滤固体并用水、EtOAc洗涤，在真空下干 燥获得2-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-5-(6-甲基-5-((2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 吡啶-4-基)氧基)吡啶-2-基)嘧啶-4(3H)-酮(42mg，52.3％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ8.76(brs,1H),8.36(d,J＝5.7Hz,1 H),8.28(brs,1H),8.27(s,1H),7.97(s,1H),7.58(brs,1H),7.24(d,J ＝2.4Hz,1H),6.64(s,1H),3.96(m,2H),3.85(s,3H),3.76(m,2H), 2.54(m,2H),2.37(s,3H)，一个质子丢失；MS(ESI)m/z：466.2 (M+H⁺)。

以下测定展示某些式I的化合物在酶测定中抑制c-FMS激酶、 c-KIT激酶或PDGFRβ激酶的激酶活性并且还在M-NFS-60和THP-1 细胞系中抑制c-FMS激酶的活性。某些式I的化合物的体内评价还展 示出在药效动力学模型中对c-FMS的抑制或还表现出在胫骨周围 (peritibial)植入物模型、U-251或GL-261胶质瘤模型或在 MDA-MB-231乳腺癌异种移植物模型中的功效。

uFMS激酶(Seq.IDNo.1)测定

未磷酸化的c-FMS激酶(uFMS,Seq.IDno.1)的活性通过跟踪以 ATP和聚E4Y作为底物经由与丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶体系偶联的 FMS激酶反应的ADP产生来测定(例如，Schindler等.Science(2000) 289:1938-1942)。在该测定中，用分光光度计连续监测NADH的氧化 (因此，在A340nm处降低)。反应混合物(100μL)在含有0.2％辛基 葡糖苷和1％DMSO的90mMTris缓冲液(pH7.5)中含有FMS(购 自Millipore)(10nM)、聚E4Y(1mg/mL)、MgCl₂(10mM)、丙酮酸 激酶(4个单位)、乳酸脱氢酶(0.7个单位)、磷酸烯醇式丙酮酸(1mM)、 NADH(0.28mM)和ATP(500μM)。通过将连续稀释的测试化合物与 上述反应混合物混合来起始抑制反应。在Synergy2平板读取仪上， 在30℃下连续4小时监测340nm处的吸收。使用3-4小时的时间范 围计算反应速率。通过将反应速率与对照(即，不存在测试化合物下) 的反应速率进行比较来获得抑制百分比。使用如GraphPadPrism软件 包中所执行的软件程序，由在一定抑制剂浓度范围内测定的一系列抑 制百分比值来计算IC₅₀值。

用于筛选的uFMS激酶序列(Y538-末端)(Seq.IDNo.1)

uKit激酶(Seq.IDNo.2)测定

未磷酸化的c-KIT激酶(uKIT,Seq.IDno.2)的活性通过跟踪以 ATP和聚E4Y作为底物经由与丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶体系偶联的 KIT激酶反应的ADP产生来测定(例如，Schindler等.Science(2000) 289:1938-1942)。在该测定中，用分光光度计连续监测NADH的氧化 (因此，在A340nm处降低)。反应混合物(100μl)在含有0.2％辛基 葡糖苷和1％DMSO的90mMTris缓冲液(pH7.5)中含有未磷酸化的 KIT(12nM)、聚E4Y(1mg/mL)、MgCl₂(10mM)、丙酮酸激酶(4 个单位)、乳酸脱氢酶(0.7个单位)、磷酸烯醇式丙酮酸(1mM)，以 及NADH(0.28mM)和ATP(2000μM)。通过将连续稀释的测试化合 物与上述反应混合物混合来起始抑制反应。在Synergy2平板读取仪 (BioTech)上，在30℃下连续4小时监测340nm处的吸收。使用约3-4 小时的时间范围的反应速率来计算％抑制，由其生成IC₅₀值。

用于筛选的具有N-末端GST融合体的uKit(SeqIDNo.2)

未磷酸化的PDGFRβ(uPDGFRβ)激酶(Seq.IDNo.3)测定

未磷酸化的PDGFRβ激酶(uPDGFRβSeq.IDNo.3)的活性通过跟 踪以ATP和聚E4Y作为底物经由与丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶体系偶联 的激酶反应的ADP产生来测定(例如，Schindler等.Science(2000) 289:1938-1942)。在该测定中，用分光光度计连续监测NADH的氧化 (因此，在A340nm处降低)。反应混合物(100μL)在含有0.2％辛基 葡糖苷和1％DMSO的90mMTris缓冲液(pH7.5)中含有PDGFRβ (DeCode,15.7nM)、聚E4Y(2.5mg/mL)、MgCl₂(10mM)、丙酮酸激 酶(4个单位)、乳酸脱氢酶(0.7个单位)、磷酸烯醇式丙酮酸(1mM)， 以及NADH(0.28mM)和ATP(500μM)。通过将连续稀释的测试化合 物与上述反应混合物混合来起始抑制反应。在PolarstarOptima或 Synergy2平板读取仪上，在30℃下连续4小时监测340nm处的吸收。 使用1.5-2.5小时的时间范围计算反应速率。通过将反应速率与对照 (即，无测试化合物)的反应速率进行比较来获得抑制百分比。使用 如GraphPadPrism软件包中所执行的软件程序，由在一定抑制剂浓度 范围内测定的一系列抑制百分比值来计算IC₅₀值。

用于筛选的uPDGFRβ激酶序列(残基557-1106)(SeqIDNo.3)

如下表1中所示，使用上述酶促方案，表明式I的化合物在测量 uFMS激酶、uKIT激酶或uPDGFRβ激酶的激酶活性的测定中为抑制 剂。

表1.式Ia的化合物在uFMS激酶、uKIT激酶或uPDGFRβ激酶的 酶促测定中的活性.

NT：未测试；+：IC₅₀>1uM；++：0.1uM<IC₅₀≤1uM；+++： 0.01uM<IC₅₀≤0.1uM；++++：IC₅₀≤0.01uM

M-NFS-60细胞培养

M-NFS-60细胞(目录号CRL-1838)从美国典型培养物保藏中 心(ATCC,Manassas,VA)获得。简单地说，使细胞在37℃、5％CO₂和95％湿度下，在补充有10％优级胎牛血清(Invitrogen,Carlsbad, CA)、0.05mM2-巯基乙醇和20ng/mL小鼠重组巨噬细胞集落刺激因 子(M-CSF)的RPMI1640培养基中悬浮生长。允许细胞扩增(expand) 直到达到饱和，此时，将它们传代培养或收获用于测定。

M-NFS-60细胞增殖测定

将连续稀释的测试化合物分配到384孔黑色透明底平板(Corning, Corning,NY)中。每孔将2500个细胞添加到50μL完全生长培养基中。 将平板在37℃、5％CO₂和95％湿度下孵育67小时。在孵育期结束 时，将10μL刃天青(Sigma,St.Louis,MO)在PBS中的440μM溶液 添加到每孔中，并在37℃、5％CO₂和95％湿度下再孵育5小时。使 用540nM激发和600nM发射，在Synergy2读取仪(Biotek,Winooski, VT)上对平板进行读数。使用如GraphPadPrism软件包中所执行的软 件程序，由在一定抑制剂浓度范围内测定的一系列抑制百分比值来计 算IC₅₀值。

THP-1细胞培养

THP-1细胞(目录号TIB-202)从ATCC获得。简单地说，使细 胞在37℃、5％CO₂、95％湿度下，在补充有10％优级胎牛血清、1％ 丙酮酸钠、1％青霉素-链霉素-谷氨酰胺(PSG)和55uM2-巯基乙醇 (Invitrogen,Carlsbad,CA)的RPMI1640中生长。允许细胞扩增直到达 到70-95％铺满，此时，将它们传代培养或收获用于测定。

磷酸-FMSELISA测定

将连续稀释的测试化合物以1:100稀释在96孔黑色透明底平板 (Corning,Corning,NY)中的测定培养基(补充有10％优级胎牛血清的 RPMI1640)中。在单独的96孔黑色透明底平板中，每孔将150,000 个THP-1细胞添加到100μL测定培养基中。然后，向细胞中添加50 微升稀释化合物。将平板在37℃、5％CO₂、95％湿度下孵育4小时。 在孵育期结束时，用50μL重组人类M-CSF(目录号216-MCR&D Systems,Minneapolis,MN)在测定培养基中的100nM溶液刺激细胞， 并将平板在37℃、5％CO₂、95％湿度下孵育5分钟。制备裂解液， 并用于如制造商所述进行磷酸-FMSELISA(目录号DYC3268,R&D Systems,Minneapolis,MN)。使用GraphPadPrism计算从ELISA测定 生成的数据获得的IC₅₀值。

破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶测定

将连续稀释的测试化合物分配到384孔黑色透明底平板(Nalge NuncInternational,Rochester,NY)中。将化合物通过添加补充有10％ 优级胎牛血清(Invitrogen,Carlsbad,CA)的DMEM培养基进行稀释。 将稀释的化合物转移到384孔黑色透明底平板中。每孔将2500个破 骨细胞前体(Lonza,Walkersville,MD)添加到含有核因子κ-β配体的受 体激活剂(RANKL)和M-CSF(R&DSystems,Minneapolis,MN)的生长 培养基中。将平板在37℃、5％CO₂和95％湿度下孵育7-14天，以使 破骨细胞前体分化。在孵育期结束时，将10μL来自每孔的上清液转 移到透明的384孔平板中。上清液样品中的抗酒石酸酸性磷酸酶活性 使用酸性磷酸酶测定试剂盒(Sigma,St.Louis,MO)来测定。使用平板 读取仪在550nm处测量吸光度。使用Prism软件(Graphpad,SanDiego, CA)分析数据以计算IC₅₀值。

如表2中所示，证明式I的化合物在一个或多个上述细胞测定中 是功能抑制剂。

表2.式I的化合物对M-NFS-60、THP-1和破骨细胞的抑制效果

NT：未测试；+：IC₅₀>1uM；++：0.1uM<IC₅₀≤1uM；+++： 0.01uM<IC₅₀≤0.1uM；++++：IC₅₀≤0.01uM

体内活性的测量

c-FMS小鼠脾药效动力学模型中的cFOSmRNA产生的分析

为检查式I的化合物对FMS活性的体内调节，采集来自雌性 DBA/1小鼠的脾样品，并针对M-CSF刺激的cFOSmRNA产生进行 分析。简单地说，将六到七周龄的雌性TaconicDBA/1BOJBomTac 小鼠用媒介物或化合物的单口服剂量(通过管饲法)进行治疗。在给 药后2、4、6、8、12、18和24小时的每个时间点从四只小鼠采集血 浆和脾样品。在安乐死之前15分钟，给所有小鼠IV注射1μg(100μL 固定体积)的M-CSF。M-CSF，重组小鼠巨噬细胞集落刺激因子(36.4 kDa的同二聚体，≥98％纯度)从Gibco获得。在这个实验中进行的 所有程序均遵守国家卫生研究院(NIH)的所有法律、法规和指导方针 进行。脾提取物中的cFOSmRNA水平使用来自LifeTechnologies的 定量逆转录PCR试剂盒来测定。FMS抑制剂的血浆水平通过质谱仪 分析来测定。FMS抑制的程度与所观察到的与媒介物相比治疗动物 的脾样品中的cFOSmRNA水平的降低量相关。

在这个模型中，在30mg/kg剂量后超过8小时，实施例3、9和 10获得≥70％的cFOSmRNA水平抑制。

癌症骨转移的PC-3胫骨周围植入物模型

为评价式I的化合物的体内抗癌活性，使用骨侵袭模型的PC-3 M-luc胫骨周围注射模型。简单地说，从Xenogen公司(CaliperLife Sciences)获得PC-3M-luc细胞，并使用经L-谷氨酰胺改良的MEM培 养基(Cell#10-045-CV)在37℃下在5％CO₂气氛中扩增，培养基 补充有10％胎牛血清、1％青霉素-链霉素-谷氨酰胺、1％非必需氨基 酸和1％MEM维生素。六到七周龄的雄性裸小鼠(Crl:NU-Foxn1nu) 从CharlesRiver实验室获得。在第0天，使用具有固定的28号针的 胰岛素注射器给测试小鼠胫骨周围植入1x10⁶个细胞/小鼠(0.1ml)。 将针插在踝处介于胫骨与腓骨之间，直到针的斜角到达膝与踝之间大 约一半处。治疗在第0天开始。在研究持续期间，每天通过口服管饲 法给动物给药两次。在这个实验中进行的所有程序均遵守国家卫生研 究院(NIH)的所有法律、法规和指导方针进行。当原发肿瘤达到约800 mg大小时，使用GERS150小动物显微CT扫描仪使用以下设置对荷 瘤的固定后肢样品进行离体显微CT：

X射线管电压＝70kVp

X射线管电流＝25mA

暴露时间＝20ms

帧数＝500

帧之间的角增量＝0.4o

每帧平均值数目＝2

获取方法＝Parker

然后，以高分辨率(100微米；各向同性)重建图像。使用等值 面体绘制来描绘后肢中的病变。使用常数阈来产生不同解剖部位和样 品之间的等值面的一致表示。基于如下文所定义的病变大小的定性评 估以0、1、2、3或4的值给右后肢中的病变进行评分：

0：正常骨

1：极小病变。等值面有一些粗糙。小区域有明显的骨吸收。

2：轻微。更大量的病变。等值面显著粗糙。明显的全层厚度病 变。

3：中度。全层厚度病变更大，并且数量更多。

4：明显。许多大的全层厚度病变。其余结构显著畸变。明显的 骨缺失。

实施例10在这个模型中以每天给予两次为期39天的30mg/kg 的口服剂量进行评价，并且显示出正效益，与媒介物治疗动物中的4 的病变评分相比，其病变评分为2。

小鼠中的U251脑室内植入物

为评价式I的化合物与分次局部头部辐射的组合的体内抗癌活 性，使用雌性远亲杂交nu/nu小鼠中的原位U251-luc(Luc)人胶质瘤 癌模型。简单地说，从ATCC获得U251细胞，并改变以表达萤光素 酶。使它们在补充有10％FBS和1％PSG的RPMI1640培养基中生 长。生长环境在孵育箱中保持为37℃和5％CO₂气氛。在该研究中使 用8-9周龄的雌性Harlan裸小鼠(Hsd:AthymicNude-Fox1nu)。给测试 动物颅内植入U251-luc(LucmCherry)细胞。简单地说，给动物皮下注 射5mg/kg卡洛芬并使用在空气中的2％异氟烷麻醉。然后，将动物 在立体定位架(ASIinstruments公司)中固定，并在右侧2mm冠状 缝前方1mm处钻孔。将细胞悬浮液(储存在湿冰上)充分混合，并 抽取到50μl注射器中。将注射器针集中在钻孔上，并深入脑中3mm， 并缩回1mm以形成用于沉积细胞悬浮液的“储器”。然后，将10μl 细胞悬浮液(1x10⁶个细胞/小鼠)缓慢注入脑组织中。用使用IVIS50 光学成像系统(Xenogen,Alameda,CA)进行的体内生物发光成像跟踪 肿瘤进展。定期获取生物发光图像以用于肿瘤负荷估计。在这个实验 中进行的所有程序均遵守国家卫生研究院(NIH)的所有法律、法规和 指导方针进行。当对于实验中的所有组，平均脑生物发光信号为约 1.3x109个光子/秒(通常为植入后9天)时，开始治疗。所有小鼠每 天接受2Gy来自RadSourceRS-2000辐照器的辐射，连续5天。另外， 小鼠接受通过口服管饲法给药的测试化合物或者任选地通过尾静脉 注射共给药贝伐单抗。一般来说，生物发光图像在植入后8、10、14、 17、21、22、24、28和35天获取以用于肿瘤负荷估计。对于每次测 量，给每只小鼠皮下注射150mg/kgD-萤光素(Promega)，并在注射后 10分钟成像。将图像使用LivingImage(Xenogen,Alameda,CA)软件 进行分析。用固定区域的ROI计算脑中的BLI信号以估计肿瘤负荷。 将各组的平均BLI信号与媒介物对照进行比较，以确定治疗益处。在 第一次辐射治疗后28天，将小鼠通过过度暴露于二氧化碳安乐死以 采集血液和脑。通过末端心脏穿刺采集全血，并置于EDTA 管中。将脑切下，并置于10％中性缓冲福尔马林中。

GL261颅内植入物模型

为评价式I的化合物的体内抗癌活性，使用GL261-luc2鼠类胶 质瘤的颅内植入物。简单地说，从CaliperLifeSciences公司获得 GL261-luc2细胞，并在补充有10％FBS和1％PSG的达尔伯克改良 型伊格尔培养基(DMEM)中扩增。生长环境在孵育箱中保持为37℃和 5％CO₂气氛。扩增后，将细胞使用无血清培养基再悬浮，以产生1x10⁸个细胞/mL。在第0天，给来自JacksonLabs的六到七周龄雌性 C57BL/6J-Tyrc-2J/J颅内植入GL261-luc2细胞。对于无菌外科手术植 入，给动物皮下注射5mg/kg卡洛芬，使用在空气中的2％异氟烷麻 醉。然后，将动物在立体定位架(ASIinstruments公司)中固定，并 在右侧2mm冠状缝前方1mm处钻孔。将细胞悬浮液(储存在湿冰 上)充分混合，并抽取到50μL注射器中。将注射器针集中在钻孔上， 并深入脑中3mm，并缩回1mm以形成用于沉积细胞悬浮液的“储 器”。然后，将10μL细胞悬浮液(1x10⁶个细胞/小鼠)缓慢注入脑组 织中。用使用IVIS50光学成像系统(Xenogen,Alameda,CA)进行的体 内生物发光成像跟踪肿瘤进展。定期获取生物发光图像以用于肿瘤负 荷估计。全身注射D-萤光素后从肿瘤发射的光的量预计与肿瘤大小 相关。给每只小鼠腹膜内(IP)注射150mg/kgD-萤光素，并在注射后 10分钟以俯卧位成像。使用CCD芯片的中等和小的片内合并 (binning)，并调节曝光时间(10秒至1分钟)，以从肿瘤获得至少几 百个计数并避免CCD芯片的饱和。将图像使用LivingImage(Xenogen, Alameda,CA)软件进行分析。手动圈出每一个独特的信号，并标注上 组和小鼠编号。当对于实验中的所有组，平均脑生物发光信号为 280x10⁶个光子/秒时，开始通过测试化合物的口服管饲法进行治疗。 在这个实验中进行的所有程序均遵守国家卫生研究院(NIH)的所有法 律、法规和指导方针进行。

在研究结束时，将所有小鼠通过过度暴露于二氧化碳安乐死以采 集血液和脑。通过末端心脏穿刺采集全血，并置于EDTA管中。将脑切下，并置于10％中性缓冲福尔马林中。

MDA-MB-231异种移植物研究

为评价式I的化合物的体内抗癌活性，使用 MDA-MB-231-luc-D3H2LN人乳腺癌异种移植物。简单地说，从 Xenogen获得MDA-MB-231-luc-D3H2LN细胞，并在用1％L-谷氨酰 胺改良并补充有10％FBS、1％PSG、1％非必需氨基酸和1％丙酮酸 钠的具有EBSS的最低必需培养基(MEM)中扩增。生长环境在孵育箱 中保持为37℃和5％CO₂气氛。收获细胞，并使用50％无血清培养基 和50％再悬浮，以产生5x10⁶个细胞/mL的原液浓度。

给六到七周龄的雌性C.B-17/IcrHsd-PrkdcscidLystbg小鼠在右腋 正下方皮下注射200μL细胞悬浮液。在这个实验中进行的所有程序 均遵守国家卫生研究院(NIH)的所有法律、法规和指导方针进行。当 平均肿瘤负荷约为150mg时，开始治疗。所有小鼠通过口服管饲法 给药测试化合物。体重和肿瘤测量值每周记录三次。肿瘤负荷(mg) 由测径器测量值通过用于扁长椭圆体体积的下式假设单位密度估算 为：肿瘤负荷(mg)＝(LxW2)/2，其中L和W是各自的正交肿瘤长度 和宽度测量值(mm)。用以评估功效的主要终点是％T/C。％T/C定义 为治疗组的中值肿瘤质量除以对照组的中值肿瘤质量x100。在动物 退出研究时使用IVIS50光学成像系统(Xenogen,Alameda,CA)进行离 体生物发光成像。给动物IP注射150mg/kgD-荧光素(Promega)，并 在注射后10分钟实施安乐死。取出原发肿瘤并快速冷冻以供将来分 析，打开小鼠，并以仰卧位成像。使用CCD芯片的大的片内合并， 并调节曝光时间(1至2分钟)，以从肿瘤获得至少几百个计数并避 免CCD芯片的饱和。将图像使用LivingImage(Xenogen,Alameda,CA) 软件进行分析。手动圈出每一个独特的信号，并标注上组和小鼠编号。 总BLI信号与肿瘤大小相关，并与媒介物对照进行比较以确定治疗益 处。

某些2-氨基嘧啶-6-酮已在WO2008/079291中报道为 VEGFR/KDR和/或c-MET激酶的抑制剂，并在下图1中示出。激酶 抑制的证据仅对于WO2008/079291的某些抑制剂针对cMET激酶报 道，其中K_i在6-87nM范围内(在图1中示出)。在WO2008/079291 中未公开关于c-FMS激酶的抑制的信息。WO2008/079291的这些化 合物与本发明的化合物的不同之处在于，在本发明的式I中存在芳基 氨基“A”部分[其中A是NR2(R3)，R2是芳基，并且R3是H]。

WO2008/079291的这些化合物在本发明的范围之外。尽管如此， 本发明的化合物已针对c-MET和KDR激酶二者进行筛选。出乎意料， 已发现，相对于c-MET和KDR激酶，本发明的化合物对c-FMS激 酶具有高水平的选择性。在c-MET测定中最有效的式I的化合物表 现出3.4微摩尔的IC₅₀值，相比之下，在u-FMS测定中表现出0.0016 微摩尔的IC₅₀值，选择性为2125倍。在KDR测定中最有效的式I 的化合物表现出1.4微摩尔的IC₅₀值，相比之下，在u-FMS测定中表 现出0.0016微摩尔的IC₅₀值，选择性为875倍。这些数据证明本发 明的化合物(A为非芳香族部分)强效抑制c-FMS激酶，但不容易 抑制cMET和KDR激酶的活性。这些结果无法通过WO2008/079291 的现有教导预期。

图1.WO2008/079291的cMET抑制剂.

等效物

本领域技术人员仅使用常规实验即可识别或能够确定本发明中 具体描述的具体实施方案的许多等效物。此类等效物意欲包括在所附 权利要求书的范围内。