一种妥布霉素地塞米松纳米混悬滴眼液及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种妥布霉素地塞米松纳米混悬滴眼液。

背景技术

妥布霉素地塞米松滴眼液是糖皮质激素和抗生素的复方制剂，常用于治 疗对肾上腺皮质激素敏感的眼科炎性病变、眼表的细菌感染及潜在感染性疾 病，可减轻水肿和炎性反应；也适用于慢性前葡萄膜炎、化学性、放射性、 灼伤性及异物穿透性角膜损伤；对一些常见的眼部细菌和病原菌感染也有一 定的疗效。

该制剂原研药的商品名为“典必殊”(TOBRADEX)，由美国爱尔康公司 (ALCON)生产，1995年进入我国市场。由于混悬滴眼液的粒径大小与患 者滴眼的舒适度、药物疗效以及在组织中的作用时间等密切相关，因此，改 进制备工艺，有效降低国内同类滴眼液中地塞米松的粒径，对于提升业内质 量标准，改善国产妥布霉素地塞米松滴眼液的治疗效果至关重要。此外，目 前妥布霉素地塞米松滴眼液主要组分地塞米松的灭菌主要采用干法灭菌、辐 照灭菌，如：专利号为ZL97105772.9的中国发明专利《眼用复方妥布霉素 混悬液的制法》即公开了采用160℃干热或2-2.5兆拉德辐射或波长 的紫外光照射对地塞米松进行灭菌的方法，但上述灭菌法存在灭菌不够彻底 或对灭菌设备有特殊要求的缺陷。

发明内容

本发明的技术方案是提供了一种新的妥布霉素地塞米松纳米混悬滴眼 液。本发明的另一技术方案是提供了该滴眼液的制备方法。

本发明提供了一种妥布霉素地塞米松纳米混悬滴眼液，其特征在于：该 滴眼液由下述百分含量的原料药及辅料制备而成：

地塞米松0.1％w/v、妥布霉素0.3％w/v、水溶性高分子聚合物0.2～ 0.5％w/v、湿润剂0.025～0.1％v/v、渗透压调节剂0.3～0.6％w/v、pH调节剂 1.0～1.5％v/v、金属离子络合剂0.0025～0.01％w/v、防腐剂0.1～0.3％v/v。

其中，所述的水溶性高分子聚合物为：羟丙甲纤维素(E50)、羟丙甲纤 维素(15000cps)、羟丙甲纤维素(K100M)、羟丙甲纤维素(K100)羟丙甲 纤维素(E15)、羟丙甲纤维素(低取代)；所述的湿润剂为：吐温80；所述 的渗透压调节剂为：氯化钠；所述的pH调节剂为：稀盐酸、稀硫酸；所述 的金属离子络合剂为：依地酸二钠；所述的防腐剂为：苯扎溴铵、苯扎氯铵。

其中，所述的水溶性高分子聚合物为：羟丙甲纤维素；所述的湿润剂为： 吐温80；所述的渗透压调节剂为：氯化钠、硫酸钠；所述的pH调节剂为： 稀盐酸；所述的金属离子络合剂为：依地酸二钠；所述的防腐剂为：苯扎溴 铵。

具体地，该滴眼液由下述百分含量的原料药及辅料制备而成：

地塞米松0.1％w/v、妥布霉素0.3％w/v、氯化钠0.4％w/v、羟丙甲纤维素 0.4％w/v、依地酸二钠0.005％w/v、浓度为5％的苯扎溴铵溶液0.2％v/v、吐 温800.05％v/v、硫酸钠1.0％w/v、稀盐酸1.5％v/v。

其中，所述的滴眼液的pH值为6.0～6.5。

本发明还提供了一种制备所述的滴眼液的方法，它包括如下步骤：

a、按照配方量称取除地塞米松、稀盐酸以外的其他组分，用注射用水将 其溶解，经0.22μm微孔滤膜过滤，得澄清溶液A；

b、按照配方量称取地塞米松，以配制总量15％的注射用水悬浮，加稀 盐酸调节pH值至3.0～4.0，采用高剪切分散乳化技术进行剪切乳化，制得地 塞米松混悬液，经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，得混悬液B；

c、将混悬液B转入溶液A中，搅拌，混合均匀，调节pH值至6.0～6.5， 即得。

其中，b步骤所述的乳化条件为：1000r/min，15min。

其中，b步骤所述的混悬液B中地塞米松微粒的平均粒径小于120nm， 80％的地塞米松微粒粒径在100nm以下。

本发明针对上述制备方法的不足，通过反复试验研究，提出了一种新的 妥布霉素地塞米松纳米混悬滴眼液制备方法，解决了上述问题，极大提高了 该制剂品种的产品质量和治疗效果。

本发明提供的妥布霉素地塞米松纳米混悬滴眼液的制备方法生产工艺简 便、重现性好，除菌方法简单有效，辅料易得，适合工业化生产。

本发明的效益主要包括：

1)地塞米松难溶于水，因此制备成混悬滴眼液的粒径关系到产品质量以 及治疗效果，该有效组分粒径大小的控制是制备工艺的关键。相比现有的制 备方法，本发明可进一步降低地塞米松的粒径，有效提高该滴眼液的生物利 用度和延长药物的作用时间，显著改善患者滴眼时的舒适度。

2)本发明的制备方法条件温和、操作简便、重现性好；产品质量稳定可 靠、疗效显著。

3)本发明有效降低了地塞米松粒径，故仅采用0.22μm微孔滤膜过滤除 菌，避免了该组分目前通常使用的干法灭菌、辐照灭菌对设备的特殊要求， 简化了灭菌工艺，在确保产品质量的同时，大大提高了生产效率。

4)采用本发明工艺制备的产品，因降低了地塞米松粒径及辅料的用量， 经家兔眼部刺激性实验证明无眼部刺激性，试验结果与原研制剂“典必殊” 一致，眼部使用舒适安全。

5)经家兔药效试验证明，采用本发明工艺制备的滴眼剂在家兔眼部组织 中的浓度较原研制剂“典必殊”在家兔眼部组织的浓度更高，说明其药效优 于原研制剂。

6)采用本发明工艺制备的产品，重点质量指标、安全性、有效性等各方 面均优于目前同类制剂产品。

附图说明

图1a.原研组药物浓度

图1b.自制组药物浓度

具体实施方式

通过以下实施例进一步说明本发明，但以下实施例不构成对本发明的限 制。

实施例一：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水， 量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤 膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(E50)，溶解于适量注射用水，0.22 μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的地塞米松，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH 值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得地塞米 松混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

实施例二：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水， 量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤 膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(15000cps)，溶解于适量注射用水， 用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的地塞米松，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH 值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得地塞米 松混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

实施例三：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水， 量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤 膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(K100M)，溶解于适量注射用水， 0.22μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的地塞米松，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH 值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得地塞米 松混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

实施例四：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水， 量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤 膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(K100)，溶解于适量注射用水， 0.22μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的地塞米松，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH 值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得地塞米 松混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

实施例五：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水， 量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤 膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(E15)，溶解于适量注射用水，0.22 μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的地塞米松，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH 值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得地塞米 松混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

实施例六：

处方：

制备工艺：

1)称取处方量的妥布霉素、氯化钠、依地酸二钠，溶解于适量注射用水， 量取苯扎溴铵溶液、吐温80溶液加入上述溶液，搅拌均匀，0.22μm微孔滤 膜过滤除菌；称取处方量的羟丙甲纤维素(低取代)，溶解于适量注射用水， 0.22μm微孔滤膜过滤除菌，与上述溶液混合，备用。

2)称取处方量的地塞米松，悬浮于适量的注射用水，加稀盐酸调节pH 值至3.0～4.0，高剪切分散乳化机剪切15min(1000r/min)，制备得地塞米 松混悬液(粒径范围：50～200nm)，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，备用。

3)将2)液转入1)液，搅拌15min，加稀盐酸调节pH值至6.0。

为证明本发明的创造性，以ALCON的原研滴眼液TOBRADEX为对照， 进行的产品质量及药物疗效指标的对比考察，实验数据如下：

试验例1.本发明滴眼液处方优化

在确定主药处方量(妥布霉素：0.3％、地塞米松0.1％)的前提下，对本 发明所用辅料的种类及用量进行了优化筛选，并对各试验组产品的质量指标 (pH值、粒径、沉降体积比、渗透压)进行对比考察，实验结果见表1a、 表1b。

表1a.处方组成考察

表1b.处方组样品质量指标检测

注：粒径项“≥90％(μm)”表示：从小粒子开始，累积含全部粒子90％的分布区域的最大粒径。

结论：由表1a、表1b试验结果可知，本发明处方优选为：2#。

试验例2.本发明滴眼液乳化参数的优化

由于制备工艺对产品的质量影响较大，在确定处方组成及用量的条件下， 结合本制剂的特点，本发明重点考察了乳化参数对产品质量的影响：在将乳 化机的转速设置为1000r/min的基础上，对乳化时间进行优化，并以粒径、 沉降体积为检测指标，对不同条件制备的产品进行对比考察，结果见表2。

表2.乳化条件对比考察

结论：由表2可知，b步骤所述的乳化参数优选为：1000r/min，15min。

试验例3.产品质量指标(参照国家批准的妥布霉素地塞米松滴眼液质 量标准)

表3.产品质量对比结果

结论：采用本发明工艺制备的产品平均粒径较原研制剂减小一半，粒径 指标明显优于原研产品。

试验例4.眼部刺激性实验

按照妥布霉素地塞米松滴眼液说明书，选择日本大耳家兔20只，平均分 成两组(一组：自制、二组：原研)，采用同组家兔同体左右眼自身对比法进 行试验。家兔左眼滴入妥布霉素地塞米松滴眼液，右眼滴入生理盐水作为对 照。

给药量：2滴/次(100μl)。

给药方法：眼结膜囊内给药，给药后轻合眼脸约10秒钟。

重复给药：连续给药两周(14d)，每天早晚各给药一次，于每次给药前 以及最后一次给药后1、2、4、24、48、和72h对眼部进行检查。记录角膜、 虹膜、结膜及其他观察到的损伤情况。按照“Draize眼部刺激试验评分标准”： 将每只家兔的角膜、虹膜和结膜的刺激反应分值相加，即全部受试动物眼刺 激反应的总积分。将总积分除以动物数，即受试动物对眼刺激性的最后分值， 结果见表4。

表4.家兔眼刺激性对比结果

结论：采用本发明工艺制备所得产品，对眼无刺激性，与原研一致。

试验例5.组织药物浓度实验

按照妥布霉素地塞米松滴眼液说明书，选择日本大耳家兔28只，平均分 成两组(组1：自制；组2：原研)，给予家兔双眼滴入妥布霉素地塞米松滴 眼液。

给药量：2滴/次/只(100μl)。

给药方法：眼结膜囊内给药，给药后轻合眼脸约10秒钟。

给药后样品提取：在给予家兔妥布霉素地塞米松滴眼液药物后，分别于 给药后0.5h、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h各取2只受试家兔，处死，手术分 离家兔眼的玻璃体、虹膜、巩膜、视网膜及脉络膜，用二氯甲烷于组织匀浆 及玻璃体中萃取药物，分离有机相，萃取3次，合并有机相，并于70℃恒温 水浴锅上，用氮气吹干，残渣用0.2ml的40％乙腈水溶解，采用HPLC-MS/MS 检测分析，绘制时药曲线图，结果见图1a、图1b。

结论：由图1a、图1b可知，采用改进工艺制备所得产品与原研制剂在 兔眼组织中，所含地塞米松的量基本一致；不同时段的药量比较显示，本发 明制备的产品的释药趋势更为平缓，作用效果更佳。

试验例6.无菌检测

参照中国药典2010年版附录ⅪH无菌检测方法，以金黄色葡萄球菌为 阳性对照，对新产品无菌进行考察，检测结果见表5。

表5.无菌检查结果

结论：产品无菌符合规定，说明本发明专利改进的除菌方式(由高温湿 热灭菌改进为：过滤除菌)，在降低产能的同时亦能保证产品无菌，进一步说 明了改进工艺的先进性。

为了克服地塞米松因溶解度较差、湿热条件下晶型易发生改变导致该组 分灭菌方法受限的不足，本发明改进了该滴眼液的配方，采用高剪切分散乳 化技术，通过优化剪切参数，成功将地塞米松的平均粒径控制在120nm以 下，简化了以往需要对妥布霉素、地塞米松分别采用不同灭菌方法的工艺， 仅采用超滤除菌工艺即可实现该产品的无菌，大大简化了生产工艺。相比原 研制剂，该发明产品的粒径明显降低，刺激性更小，生物疗效较原研制剂有 进一步的提高。

相比原研滴眼液TOBRADEX，本发明优化了制剂配方，选择价格更为低廉 的羟丙甲纤维素代替羟乙基纤维素作为助悬剂，并尽可能降低其用量，在确 保临床治疗效果的同时，提高滴眼剂的安全性；通过改进制备工艺，有效降 低妥布霉素地塞米松滴眼液中地塞米松的粒径，提高该制剂的疗效和舒适度， 避免上述灭菌工艺存在的缺陷，提供了一种操作简单、易于工业生产，且产 品质量稳定的妥布霉素地塞米松纳米混悬滴眼液的生产技术。