一种治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物及其用途

技术领域

本发明属于天然药物组方配伍的量效与作用用途的研究技术领域，具体涉及一种治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物及其用途。

背景技术

骨质疏松症是一种以骨量低下，骨微结构破坏，导致骨脆性增加，易发生骨折为特征的全身性代谢性骨病。骨质疏松性骨折是骨质疏松症最严重的后果。骨质疏松症导致的骨折是脆性骨折，由于骨强度降低，日常生活非暴力的行动即可造成骨折，此类骨折属于完全性骨折，在老年人中患病率较高。常见的骨折部位是胸腰段脊椎、肱骨近端、桡骨远端，且老年人的髋部及椎体等部位易发生多发性骨折，致残率及病死率均显著增高。

对骨质疏松性骨折，临床治疗采用三联用药治疗方案。美国2008年版的骨质疏松骨折预防与治疗临床医师诊疗指南中指出“骨折后抗骨质疏松前三位用药”(抗骨质疏松“三联”用药)①使用钙剂，钙量800～1200mg/d。②活性维生素D3，0.25～0.5μg/d。③降钙素，50U/d，皮下或肌内注射，鼻喷剂200U/d。或者③阿伦磷酸钠制剂；世界卫生组织(WHO)把钙剂和维生素D类药物的联合应用作为治疗骨质疏松症的基础药物。对于严重骨质疏松症的患者临床普遍采用三联用药(即钙元素+活性维生素D3+降钙素/磷酸盐类)。采用三联用药方案是目前治疗骨质疏松骨折的常用方案。

但是，采用三联用药的治疗方案，三种药物配伍剂量和药效阈值会存在因临床个体差异难以掌握的矛盾，在临床应用中表现出各种副作用。如活性维生素D3，大量久服可致高血钙，出现食欲缺乏、呕吐、腹泻及软组织异位骨化等。降钙素用小剂量有效且较安全，大剂量作短期治疗时，对少数病人易引起继发性甲状腺机能低下，超剂量服用发生中毒者，有厌食、疲乏、恶心、呕吐、腹泻、多尿、头痛和口渴，血和尿中钙、磷浓度增高，可致高血压和肾衰竭。阿伦磷酸钠：常见有胃刺激症状，如恶心、呕吐、腹痛、胸骨后疼痛、消化不良、咽痛、吞咽疼痛、胸闷、头晕及轻微肝肾功能改变等。

此外，对于女性绝经后的骨质疏松症的预防和治疗主要以西药为主，如雌激素、孕激素以及雄激素、维生素D、降钙素等。临床用甲状旁腺激素(PTH)间断小剂量用药具有促骨形成作用。应用双磷酸盐制剂具有抑制界面骨吸收、相对增高假体周围BMD的作用。对上述药物的应用临床上疗效多有不同程度的副作用。

发明内容

为了克服上述现有技术存在的缺陷，本发明的目的在于提供一种治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物及其用途，该天然药物组合物配伍适合、剂量安全、效果明显，能够有效解决现有的中西药物在治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎时存在的副作用及疗效差的问题。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物，该组合物构成以质量百分比计，由73.3％～98.3％的沙棘果油和1.7％～26.7％的三七总皂苷组成。

该组合物构成以质量百分比计，由93.4％的沙棘果油和6.6％的三七总皂苷组成。

该天然药物组合物以沙棘果油和三七总皂苷为活性成分配伍，能够制成软胶囊剂或口服液制剂；其中，沙棘果油由去籽的沙棘鲜果提取制得，三七总皂苷是由三七根茎剪口部位提取得到。

沙棘果油中含有的十六碳一烯酸与十六碳酸的质量比为(1.02～1.1)：1；三七总皂苷中含有的Rg1与Rb1的质量比为1:1。

本发明还公开了上述天然药物组合物在制备治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的药物和/或保健品中的应用。

所述的药物和/或保健品为调节破骨细胞和成骨细胞代谢平衡的药物和/或保健品。

该天然药物组合物能够在体内合成或产生二十碳三烯酸的信号分子，该信号分子通过激活机体骨重建的蛋白质信号分子的正负性调控通路来调节破骨细胞和成骨细胞代谢平衡。

所述的药物和/或保健品为通过降低碱性磷酸酶ALP、白介素IL-1细胞因子、白介素IL-6细胞因子及甲状旁腺激素PTH含量而抑制破骨细胞过度分泌的药物和/或保健品；

或者，所述的药物和/或保健品为通过升高骨钙素BGP、降钙素CT、骨保护素OPG、雌性激素E₂、去氢表雄酮DHEA、胰岛素生长因子DHEA及花生四烯酸乙醇胺AEA含量而促进成骨细胞分泌、促进骨重建及提高骨形态重建指数的药物和/或保健品。

所述的药物和/或保健品为能够促进线粒体细胞色素氧化酶COX、膜通透性MPTP、膜电压MMP、造血铁硫蛋白Fe-S、造血铁蛋白MtF、胰岛素生长因子IGF-1、转化生长因子TGF-β、血小板生成素TPO及促红细胞生成素EPO的上调而促进成骨细胞分泌，提高骨形态、骨重建指数的药物和/或保健品；

或者，所述的药物和/或保健品为能够使造血负性细胞因子IL-1、白介素-6含量下调而抑制破骨细胞分泌、促进成骨细胞分泌，提高骨形态、骨重建指数的药物和/或保健品。

所述的药物和/或保健品为通过降低血清一氧化氮NO、组胺HIS、白三烯LT及丙二醛MDA含量从而抑制骨关节炎的炎性因子的发生和发展的药物和/或保健品；

或者，所述的药物和/或保健品为通过提高体内β内啡肽β-EP和前速激肽原β-PPT含量抑制炎性因子引起骨痛的药物和/或保健品。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

本发明公开的治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物，由沙棘果油和三七总皂苷作为原料药按一定的配比(73.3％～98.3％的沙棘果油和1.7％～26.7％的三七总皂苷)组成。该药物组合物在体内可以转化产生二十碳三烯酸，并在体内激活蛋白质及环核苷酸、钙离子等多途径分子信号通路，或者直接作用于脂肪酸结合蛋白，使其具有舒张血管、抗炎、促进新生血管形成、抑制细胞迁移或增生，促进多肽激素释放、促进造血蛋白的表达及调节钙离子信号通道的作用(可使肠道钙吸收升高，尿钙排泄降低)。实验验证，该天然药物组合物可调治骨质疏松骨折模型大鼠因环核苷酸蛋白激酶信号分子含量的比例紊乱失调以及内分泌性激素、免疫、神经递质含量的比例失调导致的骨质疏松骨折。

本发明经过天然药物组合物剂量药效筛选试验与阳性药物己烯雌酚组及仙灵骨葆组在同比条件下进行服药验证，与模型组、正常组(假手术组)及青年组进行比较，证实本发明的天然药物组合物能够提高去势雌性大鼠骨密度和骨形态(包括股骨骨形态、椎骨骨形态、胫骨骨形态)；能够提高去势雌性大鼠血清雌性激素E2、血清骨钙素(BGP)、降钙素(CT)、胰岛素生长因子含量；能够降低模型服药组大鼠血清免疫细胞因子白介素-1、免疫细胞因子白介素、尿羟脯氨酸含量；能够升高去势雌性大鼠尿肌酐与降低尿钙值。本发明通过“木瓜蛋白酶诱发大鼠骨关节炎”模拟炎性介质刺激物侵入膝关节组织，导致伤害性感受器致痛炎性增强的模型，显示本发明的天然药物组合物中低剂量组对雌雄大鼠均可显著改善并消除膝关节滑膜关节液炎症细胞。

本发明的天然药物组合物其构成比例和剂量及疗效优于市场骨质疏松骨折同类中西药如己烯雌酚、葡萄糖酸钙、仙灵骨葆、阿伦磷酸纳等药物，可显著解决现有中西药物治疗骨质疏松骨折疾病治疗中存在的副作用和疗效差的问题。适用于治疗骨质疏松症临床前期(也称骨量丢失期)和临床期(脆性骨折发生期)。预防治疗妇女和男性髋部、腰椎骨骨矿流失、骨质疏松及压缩性骨折，增加骨密度、修复重建骨质结构强度，改善治疗骨质疏松引起的骨关节炎和腰背疼痛疼痛。显著改善治疗妇女绝经后骨质疏松症骨折和男子体弱或免疫功能低下导致衰老和病理继发性疾病原因导致的骨矿流失、骨质疏松骨者的腰膝疼痛，驼背弯腰、下肢抽筋、持重困难、失眠多梦等症有显著的治疗效果。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。

1、组方原料制备方法、组方配比范围、日服剂量量效比例

本发明公开的治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物，是以下述质量百分比的原料药制备而成的药剂：73.3％～98.3％的沙棘果油、1.7％～26.7％的三七总皂苷。

其中，以93.4％的沙棘果油和6.6％的三七总皂苷组成效果最优。

本发明的原料制剂的制备方法可采用以下三种：

1)沙棘果油的制备，常用方法有以下：

①物理压榨离心分离：沙棘成熟鲜果(去籽)经气螺旋杆压榨(脱籽)获得的沙棘果汁和沙棘果泥渣。其果泥渣加温水50-55℃浸泡2-3次，轻泡时间60min,分次离心分离并经纯化处理，得沙棘果油提油率0.07％～4.0％(g/g)。

②CO₂超临界萃取：沙棘成熟鲜果(去籽)，获得的沙棘果泥渣。工业生产提取条件：提取压力35MPa，萃取温度45℃。提取时间1.5h，分离温度45℃。提油率可达到5.2％(g/g)。按1:1比例加水进行水化除杂，然后加入3％～5％白土进行脱色，离心脱水，得86％(g/g)的纯化精制沙棘果油。

③正己烷溶剂萃取：取沙棘干果浸泡适度，采用滚轴将果实挤压(除去籽)得果泥渣。经45度恒温干燥、使沙棘果泥渣颗粒度达40目，用正己烷溶剂萃取，按料：溶剂，1:8比例，提取时间50分钟，提取温度60℃，可获得沙棘果油提率5.2％(g/g)。纯化精制，得85％(g/g)纯化精制沙棘果油。

2)三七总皂苷的制备：

三七总皂苷的传统醇提取：将三七根茎(剪口)有效部位制备成60目的三七粉物料，按物料1:7比例，70％乙醇溶液提取放于容器中回流提取，沸腾回流提取2次，提取1.5小时/次，合并滤液得率9.6％(g/g)，经HPD-400大孔树脂浓缩，80％乙醇洗脱，洗脱液经浓缩，干燥，得到纯化三七总皂苷产品。

3)组方配制方案

①本发明复方沙棘果油与三七总皂苷的药效脂肪酸组成分含量必须为：

沙棘果油中十六碳一烯酸与十六碳酸，这两种脂肪酸的含量比值(g/g)(％)为(1.02～1.1)：1；三七总皂苷含量质量比为(mg/g)(％)为：Rg1:Rb1＝1:1。

以本发明所给范围的复方药物经配伍服用后，即可在体内可产生标志性生物转化代谢物二十碳三烯酸(11,12-EETs)(ng/ml)的信号分子，该信号分子通过激活机体骨重建的蛋白质信号分子的正负性调控通路来调节破骨细胞和成骨细胞代谢平衡。且二十碳三烯酸(11,12-EETs)(ng/ml)信号分子含量的高低对与骨重建呈密切正相关作用。

②配制方案

实施例1

治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物，组合物构成是以下述质量百分比的原料药制备而成的药剂：94.6％的沙棘果油、5.4％的三七总皂苷。

实施例2

治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物，组合物构成是以下述质量百分比的原料药制备而成的药剂：87.2.％的沙棘果油、12.8％的三七总皂苷。

实施例3

治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物，组合物构成是以下述质量百分比的原料药制备而成的药剂：74.6％的沙棘果油、25.6％的三七总皂苷。

实施例4

治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物，组合物构成是以下述质量百分比的原料药制备而成的药剂：93.4％的沙棘果油、6.6％的三七总皂苷。(按重量比15:1配制)

实施例5

治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物，组合物构成是以下述质量百分比的原料药制备而成的药剂：97.4％的沙棘果油、2.6％的三七总皂苷。

实施例6

治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物，组合物构成是以下述质量百分比的原料药制备而成的药剂：98.3％的沙棘果油、1.7％的三七总皂苷。

③复方组合物有效剂量范围及日服剂量、服药周期

治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎的天然药物组合物的有效剂量范围：

沙棘果油和三七总皂苷药物的组合比例量为(重量/重量)％(g/g)：

沙棘果油：三七总皂苷为73.3％～98.3％(g/g)：26.7％～1.7％(g/g)范围；

动物大鼠日服剂量优化组其量效日服量为沙棘果油：三七总皂质量比以93.4％(g/kg)：6.6％(g/kg)为最佳。沙棘果油：三七总皂苷或以重量比配伍以15:1为最佳。

人用临床等效组方比例量为：

沙棘果油：三七总皂苷73.4％～98.3％(g/g):26.6％～1.7％(g/g)范围：

人用临床等效日服剂量优化组其量效日服量为沙棘果油：三七总皂质量比以93.4％(g/kg)：6.6％(g/kg)为最佳比例。沙棘果油：三七总皂苷或以重量比配伍以15:1配伍为最佳。

本复方药物治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎治疗周期为4个月。

2、治疗骨质疏松性骨折和/或骨关节炎验证的标志性指标

1)产生标志性生物转化代谢物二十碳三烯酸(11,12-EETs)(ng/ml)的信号分子：经本发明所给范围的复方药物经大鼠、人体服用后，即可在体内可产生标志性生物转化代谢物二十碳三烯酸(11,12-EETs)(ng/ml)的信号分子，该信号分子通过激活机体骨重建蛋白质信号分子的正负性调控通路来调节破骨细胞和成骨细胞代谢平衡。且二十碳三烯酸(11,12-EETs)(ng/ml)信号分子含量的高低对与骨重建呈密切正相关作用。

2)与阳性对照药及模型组及正常组比较服药结果：该药物复方剂量药效筛选试验与与模型组、正常组(假手术组)及青年组、阳性药物(己烯雌酚组及仙灵骨葆组和西药阿仑膦酸钠)在同比条件下进行服药验证，具有以下显效特征性功效：

①与骨质疏松骨折模型组比较提高去势雌性大鼠骨密度和骨形态

本发明的天然药物组合物，经服药3个月，大鼠胫骨骨密度提高了15.26g/m²；腰椎骨骨密度提高了7.2g/m²；股骨骨密度提高了8.8g/m²；股骨头骨密度提高了8.8g/m²；股骨头9.2g/m²；骨皮质密度提高了6.4g/m²；骨皮质厚度提高了0.14mm；优于阳性药物己烯雌酚组及仙灵骨葆组，功能指标与正常组接近，与模型组比较P＜0.01疗效有显著性统计意义。

②与骨质疏松骨折模型组比较提高去势雌性大鼠股骨骨形态

提高股骨骨小梁百分率9.52％(％Tbr)；提高股骨骨小梁宽度31.1Tb.Wi(um)；增加股骨骨小梁数目1.4个/mm；使股骨骨小梁分离度(即骨小梁之间的髓腔平均宽度)减少747.32Tb.sp(um)优于阳性药物己烯雌酚组及仙灵骨葆组.功能指标与正常组接近，与模型组比较P＜0.01疗效有显著性统计意义。

③与骨质疏松骨折模型组比较提高去势雌性大鼠椎骨骨形态

提高椎骨骨小梁百分率12.5％(％Tbr)；提高椎骨骨小梁宽度10.17Tb.Wi(um)；增加椎骨骨小梁数目1.43个/mm；使椎骨骨小梁分离度(即骨小梁之间的髓腔平均宽度)减少86.14Tb.sp(um)。优于阳性药物己烯雌酚组及仙灵骨葆组，功能指标与正常组接近，与模型组比较P＜0.01疗效有显著性统计意义。

④与骨质疏松骨折模型组比较提高去势雌性大鼠颈骨骨形态

提高胫骨骨小梁百分率13.9％(％Tbr)；提高胫骨骨小梁宽度8.0Tb.Wi(um)；增加胫骨骨小梁数目1.79个/mm；使胫骨骨小梁分离度(即骨小梁之间的髓腔平均宽度)减少747Tb.sp(um)优于阳性药物己烯雌酚组及仙灵骨葆组，以上功能指标与模型组比较均显示疗效显著性统计意义(P＜0.01或P＜0.0％)。

⑤与骨质疏松骨折模型组比较提高去势雌性大鼠血清雌性激素E243％(pmol/ml)含量，提高性激素转化物去氢表雄酮DHEA50％(ug/ml)；降低甲状旁腺激素PTH 24％(pg/ml)；其特征是E2：PTH两种激素(紊乱态)由2：1调整为1：1(健康正常态)。优于阳性药物己烯雌酚组及仙灵骨葆组。以上功能指标与模型组比较均显示疗效显著性统计意义(P＜0.01或P＜0.0％)。

⑥与骨质疏松骨折模型组比较提高去势雌性大鼠血清骨钙素(BGP)51.7％(ng/ml)含量，提高降钙素(CT)50.7％(pg/ml)；提高胰岛素生长因子50.6％(pg/ml)；其特征是两种激素(CT)：(BGP)(紊乱态)可由2.1-2.2：1比值关系调整为1：1(健康正常态)。优于阳性药物己烯雌酚组及仙灵骨葆组。以上功能指标与模型组比较均显示疗效显著性统计意义(P＜0.01或P＜0.0％)。

⑦与骨质疏松骨折模型组比较：可降低模型服药组大鼠血清免疫细胞因子白介素-1为18.7％(pg/mL)含量，可降低免疫细胞因子白介素-6为21.4％(pg/mL)；降低尿羟脯氨酸16.1％(umol/mL)；其特征为血清白介素-1和白介素-6含量值同比升高(促骨吸收)，则尿羟脯氨酸也同比升高(该物质为胶原蛋白代谢终产物)；白介素-1和白介素-6含量值与尿羟脯氨酸呈正相关(为骨吸收正性值；为成骨负性值)。优于阳性药物己烯雌酚组及仙灵骨葆组以上功能指标与模型组比较均显示疗效显著性统计意义(P＜0.01或P＜0.0％)。

⑧与骨质疏松骨折模型组比较升高去势雌性大鼠.尿肌酐与降低尿钙值去势模型雌性大鼠尿肌酐值与尿钙值两者呈负相关(即尿肌酐值降低，尿钙排泄量增高，骨钙质流失高)。本组方试验药物组显著性升高尿肌酐值19.2％并降低尿钙排泄量22％，优于阳性药物己烯雌酚组及仙灵骨葆组。以上功能指标与模型组比较均显示疗效显著性统计意义(P＜0.01或P＜0.0％)。

⑨与骨质疏松骨折模型组比较升高去势雌性大鼠服药组大鼠血清骨保护素OPG含量27.3％(pg/ml)；其与配体RANKL结合率提高27％(pg/ml)；OPG/RANKL两者比值从失调态0.89上升到1.58。即骨保护素OPG糖蛋白受体占据性竞争细胞因子KB受体活化因子(RANK)与配体RANKL结合，抑制RANK/RANKL的结合对破骨细胞信号转导的活化，从而对抗骨质疏松的发生和发展。

⑩本组方试验药物组显示：血清碱性磷酸酶ALP(mmol/ml)的升高和降低，是诊断成骨或破骨代谢的灵敏性指标；当血清骨保护素OPG升高，骨钙素、降钙素、雌激素升高，则ALP(mmol/ml)降低，显示ALP与保护素、骨钙素、降钙素、雌激素呈负相关。

通过“木瓜蛋白酶诱发大鼠骨关节炎”模拟炎性介质刺激物侵入膝关节组织，导致伤害性感受器致痛炎性增强的模型

验证：

①提高镇痛影响因子：使炎症模型试验服药组使其雌性β内啡肽含量提高17.2％(pg/ml)；雄性大鼠β内啡肽提高39.5％(pg/ml)；提高雌性大鼠前速激肽原26％(pg/ml)；提高雄性大鼠前速激肽原50％(pg/ml)；由于具有提高镇痛影响因子的药效作用，可有效抑制骨关节病理损伤的发生和发展；

②降低致炎影响因子：药物组试验与模型组比较，能够使雌性大鼠一氧化氮NO含量降低22％umol/L，雄性大鼠一氧化氮NO含量降低14％umol/L；雌性大鼠组胺含量降低30.4％(ug/L)，雌性大鼠组胺含量降低26.4％，雌性大鼠白三烯降低25.33％(ng/L)雌性大鼠白三烯降低28.40％(ng/L)；雌性大鼠白介素-1降低15.4％(ng/L)，雄性大鼠白介素-1降低26.05％(ng/L)。清除雌性大鼠血清丙二醛MDA降低(22.70％(nmol/L)清除雄性大鼠血清丙二醛(MDA)降低35％(nmol/L)；

通过对炎症模型组雌性和雄性大鼠的“膝关节滑膜关节液炎症细胞计数分析”，显示药物中、低剂量组对雌雄大鼠均可显著改善并消除膝关节滑膜关节液炎症细胞，统计分析显示具有显著性意义，P＜0.05；其对雌性大鼠软骨病理切片(股骨部位)具有显著性统计意义P＜0.01；其对雄性大鼠软骨病理切片(股骨部位)具有显著性统计意义P＜0.05；

药物组方产生的二十碳三烯酸信号分子促进造血微环境的改善

骨质疏松的病因是由肝脏线粒体膜损伤引起膜通透性(MPTP)、膜电位(MMP)的降低、线粒体造血铁硫蛋白和铁蛋白(Fe-S、MtF)亚铁螯合酶(FECH)及细胞色素氧化酶(COX)降低；引起正性造血细胞因子白介素-3、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)降低和负性造血细胞因子白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)升高；引起造血细胞因子(胰岛素样生长因子IGF-1)亦称成骨细胞因子、转化生长因子(TGF-β)的降低；引起造血特异性细胞因子-血小板生成素(TPO)和促红细胞生成素(EPO)的降低是引起骨质疏松的直接原因。本发明的天然药物组合物，在体内合成产生二十碳三烯酸的信号分子后协同促进线粒体膜损伤修复，促进膜通透性(MPTP)、膜电位(MMP)、线粒体造血铁硫蛋白和铁蛋白(Fe-S、MtF)亚铁螯合酶(FECH)及细胞色素氧化酶(COX)升高；引起正性造血细胞因子白介素-3、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)升高和负性造血细胞因子白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)降低；引起造血细胞因子(胰岛素样生长因子IGF-1)亦称成骨细胞因子、转化生长因子(TGF-β)的升高；引起造血特异性细胞因子-血小板生成素(TPO)和促红细胞生成素(EPO)升高从而有效对抗骨质疏骨关节炎和骨痛疾病。

综上，该天然药物组合物在体内合成或产生二十碳三烯酸的信号分子与原组方可协同产生蛋白质及钙离子信号分子的多途径放大作用；改善造血微环境等多项标志性细胞因子作用、调节内分泌、调节破骨细胞成骨细胞代谢平衡促进骨重建而有效对抗骨质疏松、骨关节炎和骨痛疾病。

3、临床疗效60例的临床观察：(对照药物)

(1)入选病例一般资料：

①本次试验研究入选病例80例，完成病例64例。其中男性病例30例，女性病例34例(其中脱落病例5例，剔除病例11例)。

②患者年龄分布男性年龄59.54±2.84，女性年龄57.65±2.68。

③患者病情程度

轻度患者5例(7.81％)；中度患者试验组18例(28.13％)；重度患者试验组41例(64.06％)。

(2)临床生化指标测定：

1)骨吸收标志性指标脱氧吡啶啉和羟脯氨酸的测定

女性服药6个月骨吸收标志物测定：

骨质疏松患者尿脱氧吡啶啉和羟脯氨酸升高，可灵敏反映人破骨细胞活性显著性增高，即骨吸收占优势。就使骨量减少、破骨细胞溶骨加速，皮质孔隙增加，小梁骨和皮质骨体积减少，呈负钙平衡，骨胳脱钙，全身骨矿物质含量和骨矿物质密度明显下降。绝经后妇女雌激素缺乏，骨吸收增加，DPD/Cr值含量显著高于绝经前妇女。尿中DPD/Cr值与骨质疏松密切相关。尿DPD/Cr测定值是反映骨吸收的敏感标致性指标。

临床研究分别对骨质疏松女性34例和男性30例进行本处方人服用剂量服药前(尿脱氧吡啶林和羟脯氨酸的测定)和服药后的测定(见表1-表2)

表1服药6个月女性尿液生化指标水平比较

由表1可见，女性服药6个月，尿脱氧吡啶啉，羟脯氨酸均显著降低，组内前后比较，均为P＜0.001，差异有高度统计学意义；显示本新处方对女性骨质疏松患者具有抑制破骨细胞吸收作用而达到防治骨质疏松的作用。

表2服药6个月男性尿液生化指标水平比较

由表2可见，男性服药6个月，尿脱氧吡啶啉，羟脯氨酸均显著降低，组内前后比较，均为P＜0.001，差异有高度统计学意义。显示本新处方对男性骨质疏松患者具有抑制破骨细胞吸收作用而达到防治骨质疏松的作用。

2)中医症状疗效结果：

骨质疏松临床症状有：腰背酸痛、腰酸软无力、下肢抽筋、步履艰难、持重困难、头晕耳鸣、失眠多梦、畏寒喜暖、面色咣白。

①试验前后各项症状比较

表3试验前和试验后4个月-6个月各项症状比较

由表3可见,试验前与服药3-4个月后各项中医症状均有明显改善。组内前后比较，均为P＜0.001，差异有高度统计学意义。

②试验前后中医症状积分比较：

表4试验前和实验后中医症状积分比较

由表4可见，试验后两组经4个月-6个月治疗，中医症状平均积分均明显减少。组内比较，P＜0.001，差异有高度统计学意义。

3)骨密度测定：

临床实验(6个月)腰椎(L3)、(L4)骨密度疗效结果：

表5实验6个月腰椎3(L3)骨密度疗效

表6实验6个月腰椎4(L4)骨密度疗效

表7实验6个月(L3、L4)腰椎总骨密度疗效结果表

表8实验6个月(L3、L4)腰椎总骨密度疗效结果表

由表4-表8可见，该药物处方经服药4个月，临床骨质疏松中医自觉症状疗效经自身前后统计学比较具有显著性差异(P值＜0.01)。

双光子骨密度测定仪结果显示：女性服药6个月(治疗1个疗程)腰椎骨(L3、L4)显效率为45.60％，总有效率为94.13％，男性服药6个月(治疗1个疗程)腰椎骨(L3、L4)显效率为46.67％，总有效率为100％。服药第二个疗程，其女性男性的显效率均显著性上升。女性服药6个月(治疗第2个疗程)腰椎骨(L3、L4)显效率为76.47％，总有效率为97％，男性服药6个月(治疗第2个疗程)腰椎骨(L3、L4)显效率为82.81％，总有效率为100％。

综上所述，治疗骨质疏松骨折新处方经服用4-6个月，经2个治疗周期的治疗后，一般肾阳不足型(肝肾阴虚)型骨质疏松骨折均可修复和达到骨重建治疗效果。

本发明的药物组合物在体内可以转化产生二十碳三烯酸的信号分子，在体内可激活蛋白质及环核苷酸、钙离子等多途径分子信号通路而产生协同放大信号分子作用，改善造血微环境并在体内有效促进线粒体细胞色素氧化酶COX、线粒体膜通透性(MPTP)、线粒体膜电压(MMP)、线粒体铁硫蛋白(Fe-S)、线粒体铁(MtF)、胰岛素生长因子(IGF-1)、转化生长因子(TGF-β)、血小板生成素(TPO)、促红细胞生成素(EPO含量的上调和造血负性细胞因子白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)含量的下调，从而有效防治骨质疏松骨折、骨关节炎和骨痛疾病。

该天然药物组合物能够改善造血微环境，调节内分泌、调节破骨细胞和成骨细胞的代谢平衡；降低碱性磷酸酶、提高血清骨保护素、骨钙素等骨代谢标志物指数；增加股骨、胫骨、椎骨骨密度、对骨重建的骨形态及骨生物力学标志性指数改善显著，可有效防治骨质疏松骨折、骨关节炎和骨痛疾病。该天然药物组合物配伍科学、剂量安全、无副作用、显效快、治疗效果显著，优于市场同类中西药。

上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人是能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所做的等效变换或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。