一种基于非寄主植物挥发物作为茶尺蠖引诱剂的用途

技术领域

本发明属于利用化学信息物质进行害虫绿色防控的技术领域，具体涉及一种基于非寄主植物挥发物作为茶尺蠖引诱剂的用途。

背景技术

茶尺蠖属鳞翅目、尺蛾科，是我国东南茶区重要的茶树害虫。以幼虫食叶为主要危害方式，暴发时可将茶树叶片及嫩芽全部吃光。目前防治茶尺蠖的主要方法仍采用有机农药进行防治，但多年来大量使用的有机农药带来了天敌数量减少、害虫抗药性增强、环境污染及茶叶产品农药残留超标等后果。对于中国茶叶产业而言，就迫切需要采取生物防治技术以减少农药的使用。

随着化学生态学的发展，昆虫与植物之间的化学信息联系成为一个新的研究热点。植食性昆虫凭借植物挥发物的化学指纹图谱，感知寄主和非寄主植物的存在，从而做出相应的趋向反应。这些植物挥发物影响昆虫的寄主定向、逃避敌害、交配、产卵、取食等行为，在昆虫行为调控和植物防御过程中起着重要作用。通过植物挥发物调节昆虫行为也是目前正在探索的环境友好型的害虫防治的重要方法。

目前从昆虫寄主植物和非寄主植物中筛选具有引诱性和驱避性的挥发性物质，是用于防治害虫的主要研究方向之一。目前，国内关于茶尺蠖的引诱或驱避技术的研究报道较少。

发明内容

为解决现有技术中存在的技术问题，本发明提供一种对环境友好，可有效引诱茶尺蠖的新的非寄主植物挥发物。

一种基于非寄主植物挥发物作为茶尺蠖引诱剂的用途，所述非寄主植物挥发物为土荆芥挥发物或黄花蒿挥发物、或其二者挥发物混合物。

本发明所述的挥发物可用于引诱茶尺蠖雌、雄虫。

本发明所述挥发物提取方法为：将供试植物洗净、剪碎、自然晾干，剪成小段，置入水蒸气蒸馏器中蒸馏提取挥发油。

本发明所述的土荆芥挥发物的使用浓度为1mg/L；或黄花蒿挥发物的使用浓度为10mg/L；或土荆芥挥发物和黄花蒿挥发物组合物，其中土荆芥挥发物的使用浓度为1mg/L、黄花蒿挥发物的使用浓度为10mg/L或者100mg/L。

本发明所述的挥发物在茶园使用。

一种茶尺蠖引诱剂，包含土荆芥挥发物、或黄花蒿挥发物、或其二者挥发物混合物，以及农业上可用的辅料、缓释载体。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

(1)本发明的茶尺蠖雄引诱剂具有成本低、效率高、对环境友好、对人畜安全等特点，特别适合对茶农进行推广应用，具有经济、社会和生态效益，具有广阔的产业化前景。

(2)将土荆芥挥发物和黄花蒿挥发物组合使用可提高其对茶尺蠖的引诱效果，取得协同作用。

附图说明

图1为茶尺蠖雌雄虫对土荆芥挥发物不同浓度的触角电位反应；

图2为茶尺蠖雌雄虫对黄花蒿挥发物不同浓度的触角电位反应。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。

实施例1：挥发物的提取

供试植物土荆芥、黄花蒿分别采自于信阳震雷山、信阳农林学院校园周边。将供试植物洗净、剪碎、自然晾干，剪成小段，置入水蒸气蒸馏器中蒸馏提取挥发油，将提取得到挥发油，置于-4℃冰箱中密封保存备用。

实施例2：茶尺蠖成虫对挥发物的触角电位EAG反应

供试害虫：茶尺蠖幼虫采自于信阳马鞍山周边的茶园，带回实验室置于养虫罩内，连续饲养多代。将采集的茶叶带枝插入三角瓶中供1-2龄幼虫食用，待幼虫长至3-4龄时，将其至养虫箱饲养，养虫箱内铺一层滤纸，保持湿润，定期更换新鲜茶叶及滤纸。饲养温度25±1℃，相对湿度60％±5％，光周期16L:8D。待幼虫化蛹羽化后，雌、雄分开，以体积浓度5％的蜂蜜水饲养，并选择羽化后2-3日龄的健康成虫为供试昆虫。

测试方法：用触角电位仪器和分析软件(Syntech)测定茶尺蠖成虫对挥发物的触角电位反应。取个体基本一致、行为活跃及触角完整的茶尺蠖雌、雄成虫用于试验。用手术剪将茶尺蠖成虫触角根部剪下，再用单面刀片切除触角末端1mm(非导电体部分)，用SpectraR360导电胶将触角两端固定在金属电极上，插入EAG探针。在5cm x 0.5cm的滤纸条上滴加10μL的测试剂量，然后将滤纸塞进巴斯德管中，末端连接气管刺激控制装置。测试时，将巴斯德管接气流控制器，出口正对触角约10mm左右，由气流控制器提供气流，流量均设定为400mL/min，待基线稳定后给予刺激，刺激时间设为0.5s，刺激间隔设为30s，以保证触角感觉器的感觉功能完全恢复。挥发物每个浓度测定时，同一个触角测定3次，取平均值。同种挥发物的不同浓度(0.01mg/L、0.1mg/L、1mg/L、10mg/L、100mg/L、1000mg/L、10000mg/L、纯精油)的刺激顺序按自低至高进行检测。设正己烷溶液作空白对照。将每一样品观测值的平均数除以前后2次对照测定值的平均值即得EAG反应相对值。测定结果见表1。

表1茶尺蠖成虫对2种挥发物浓度100mg/L的EAG反应

注：表中数据为平均差±标准误，同列不同大写字母表示差异性显著(P<0.05)。

由表1可知，2种挥发物(100mg/L)对茶尺蠖雌、雄成虫触角均能发生电位反应，但茶尺蠖雌、雄成虫对挥发物的触角电位反应存在性别差异。

另外，由图1可知，在相同浓度条件下，土荆芥挥发物引起的茶尺蠖雄虫的触角电位值均高于雌虫触角电位值，且在不同浓度之间也有一定程度的差异。在1mg/L时，土荆芥挥发物能够引起最高的触角电位反应，其中雄性为3.50mv，雌虫为2.2mV。在低浓度和高浓度下雌、雄虫触角电位值均呈现下降趋势，最低值是浓度10000mg/L引起的雌性的触角电位，为1.26mV。0.1mg/L、1000mg/L和10000mg/L引起的触角电位值与1mg/L时相比存在极显著差异。

由图2可知，与土荆芥挥发物不同，在相同浓度条件下，黄花蒿挥发物引起的茶尺蠖雌虫的触角电位值均高于雄虫触角电位值。在100mg/L时，黄花蒿挥发物引起雌性的触角电位值最高，为2.36mv。在低浓度和高浓度下雌、雄虫触角电位值大致呈现下降趋势，最低值是浓度10000mg/L引起的雄性的触角电位，为1.47mV。0.1mg/L引起的雄虫触角电位值与10mg/L、100mg/L时相比存在极显著差异。

实施例3：茶尺蠖成虫对挥发物的行为反应。

用“Y”型嗅觉仪测定茶尺蠖成虫对挥发物的趋性反应。嗅觉仪测定时，以大气采样瓶的出口作为气流源，每臂的气流流量通过LZB-4型玻璃转子流量计控制在400mL/min。用微量取样器吸取5μL待测物质溶液，滴加到2cm×2cm的滤纸条上，放入“Y”型管一侧臂中。滴加丙酮于同样规格滤纸条，放入“Y”型管另一侧臂中作对照。

茶尺蠖成虫前半夜活动力较强，于18:00-23:00进行实验，室内温度保持在(25±1)℃，湿度(60±5)％。将初羽化24h后，行为活跃及触角完整的茶尺蠖雌、雄成虫用于试验。测试时，单头试虫放置在“Y”型嗅觉仪主臂管口，待其爬至主臂管口1/2处开始计时，成虫越过“Y”型管任何一臂且停留1min以上，记为作出选择反应。当放入5min后仍未作出选择，记为不反应。每测试一次，“Y”型管左右两臂调换方向1次，每个处理重复3次。

通过以下公式计算茶尺蠖成虫对挥发物的引诱率：

引诱率＝处理臂总虫数/检测的总虫数x100％。

表2茶尺蠖对挥发物嗅觉行为反应

由表2可知，在测试浓度范围1-1000mg/L内，土荆芥、黄花蒿挥发物对茶尺蠖雌、雄虫具有引诱作用，在1mg/L的浓度下，土荆芥挥发物对茶尺蠖雄虫的引诱率56％。

此外，与单独使用挥发物相比，将土荆芥挥发物与黄花蒿挥发物组合使用时，可增强引诱效果，优选土荆芥挥发物浓度1mg/L、黄花蒿挥发物浓度10mg/L。

本发明的其他优点和变更对于本领域的技术人员而言是显而易见的。因此，本发明并不限定于这里表示和描述的特定细节和优选的实施方式。因而，在不脱离由权利要求书定义的本发明的技术范围或主旨的情况下能够进行各种变更。