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一种基于核酸核酶与环状向导RNA调控的Cas12a-CcrRNA系统及其应用

摘要

本发明公开了一种基于核酸核酶与环状向导RNA调控的Cas12a‑CcrRNA系统及其应用,属于分析检测技术领域。本发明首次发现酶促连接反应合成的CcrRNA可以降低Cas12a对双链DNA特异性切割(顺式)和对单链DNA非特异性切割(反式)的活性,当核酸酶(NAzyme)对CcrRNA进行切割时,释放出的LcrRNA可恢复Cas12a的活性,构建了核酸核酶激活的Cas12‑CcrRNA系统(NA3C),本发明还设计了一种用于ATP和致病菌(大肠杆菌和肺炎克雷伯氏菌)的高特异性检测方法,其检出限分别低至500nM和102CFU/mL;进一步将构建的NA3C系统用于大肠杆菌临床评估,结果显示其诊断灵敏度可达100%,特异性为90%,表明NA3C具有用于临床诊断的潜力。

著录项

  • 公开/公告号CN114231530A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2022-03-25

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 大连理工大学;

    申请/专利号CN202111567086.2

  • 发明设计人 刘猛;吴云萍;常洋洋;

    申请日2021-12-20

  • 分类号C12N15/113(20100101);C12N9/22(20060101);C12Q1/10(20060101);G01N21/64(20060101);

  • 代理机构21212 大连东方专利代理有限责任公司;

  • 代理人周媛媛;李馨

  • 地址 116024 辽宁省大连市高新园区凌工路2号

  • 入库时间 2023-06-19 14:40:39

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2022-03-25

    公开

    发明专利申请公布

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