8-羟基辛酸在鉴别中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜中的应用

技术领域

本发明涉及食品检测技术领域，尤其涉及8-羟基辛酸在鉴别中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜中的应用。

背景技术

8-羟基辛酸，分子式为C

8-羟基辛酸一般以辛二酸甲酯钾与金属钠及乙醇进行部分还原制取。8-羟基辛酸用途较少，现有技术中一般仅用于有机合成，比如用于合成具有生物活性的2-咪唑氧基链烷酸。8-羟基辛酸的新用途亟待开发。

发明内容

本发明提供8-羟基辛酸在鉴别中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜中的应用，用以解决现有技术中8-羟基辛酸用途少的缺陷，且利用8-羟基辛酸鉴别中蜂蜂蜜、西蜂蜂蜜简单、可靠。

本发明提供8-羟基辛酸在鉴别中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜中的应用。

根据本发明提供的8-羟基辛酸在鉴别中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜中的应用，依据8-羟基辛酸在中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜中含量的差异，鉴别中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜。

根据本发明提供的8-羟基辛酸在鉴别中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜中的应用，当8-羟基辛酸的含量在蜂蜜样品中介于96.20-253.34mg/kg时，判断所述蜂蜜为中蜂蜂蜜。

根据本发明提供的8-羟基辛酸在鉴别中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜中的应用，当8-羟基辛酸的含量介于0-32.46mg/kg时，则判断为西蜂蜂蜜。

本发明还提供一种鉴别中蜂蜂蜜与西蜂蜂蜜的试剂盒，包括8-羟基辛酸。

根据本发明提供的鉴别中蜂蜂蜜与西蜂蜂蜜的试剂盒，还包括硅烷化衍生试剂。

根据本发明提供的鉴别中蜂蜂蜜与西蜂蜂蜜的试剂盒，所述硅烷化衍生试剂包括N,O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)、三甲基氯硅烷(TMCS)。

根据本发明提供的鉴别中蜂蜂蜜与西蜂蜂蜜的试剂盒，N,O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)与三甲基氯硅烷(TMCS)的体积比为99:1。

根据本发明提供的鉴别中蜂蜂蜜与西蜂蜂蜜的试剂盒，所述硅烷衍生试剂还包括吡啶。

根据本发明提供的鉴别中蜂蜂蜜与西蜂蜂蜜的试剂盒，还包括乙醚。

本发明还提供一种鉴别中蜂蜂蜜与西蜂蜂蜜的方法，包括利用GC-MC检测待测蜂蜜样本。

根据本发明提供的一种鉴别中蜂蜂蜜与西蜂蜂蜜的方法，样本检测条件如下：色谱柱为HP-5MS(30m×0.25mm，0.25μm)，载气采用纯度为99.99％的氦气，流速为1.7-2.0mL/min。

气相色谱条件为：进样口温度为250℃，最初柱温箱为85℃，以5℃/min升温至140℃，以2℃/min升温至180℃，以0.8℃/min升温至190℃；在无分流模式下，进样体积为1μL；质谱电离能70eV，溶剂延迟为7.5min，全扫描模式，扫描范围为41-600m/z。

检测的目标物质为8-羟基辛酸硅烷化衍生物，定量离子m/z＝289.2，保留时间19.185-19.648min，保留时间在允许偏差内应小于0.5min。

本发明的有益效果在于：

(1)本发明提供了8-羟基辛酸在鉴别中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜中的应用，扩宽了8-羟基辛酸的用途。

(2)本发明还提供了一种鉴别中蜂蜂蜜与西蜂蜂蜜的试剂盒，利用8-羟基辛酸的含量对中蜂蜂蜜、西蜂蜂蜜进行鉴别，鉴别效率高，重现性好，便于操作和推广。

附图说明

为了更清楚地说明本发明或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明典型中蜂蜂蜜的总离子流色谱图；

图2为本发明典型西蜂蜂蜜的总离子流色谱图；

图3为本发明中蜂蜂蜜中8-羟基辛酸的典型提取离子流图；

图4为本发明西蜂蜂蜜中8-羟基辛酸的典型提取离子流图；

图5为本发明8-羟基辛酸的质谱图；

图6为本发明8-羟基辛酸的标准曲线。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明中的附图，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明具体实施例的方法如下：

实施例1

利用8-羟基辛酸鉴别中华蜜蜂产的中蜂蜂蜜与西方蜜蜂产的西蜂蜂蜜，包括以下步骤：

(1)样品处理：

准确称取10.00g待测蜂蜜样品分别放于250mL烧杯中，加入30mL乙醚，将乙醚作为溶剂，并在室温下进行超声辅助萃取20min，重复萃取3次，合并萃取液；然后将收集的萃取液在50℃的条件下使用旋转蒸发仪除去溶剂，直至获得提取物；用5mL乙醚将提取物洗出，转移至进样瓶中，并用氮气流干燥；加入220μL吡啶和80μLN,O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺混合试剂(BSTFA+TMCS，99:1)定容，将反应混合物密封保存在2mL进样瓶中，用薄膜密封并在60℃条件下加热30min；将硅烷化后的液体转移至1.5mL离心管中，然后在10000r/min下离心10min，取上清液，得到三甲基硅烷化衍生物，将其转移至2mL进样瓶中，在0℃下储存备用，待GC-MS检测。

将8-羟基辛酸硅烷化衍生物分别制成0.004mg/mL，0.0375mg/mL，0.04mg/mL，0.3mg/mL，0.6mg/mL，1.0mg/mL的溶液，在0℃下储存备用，待GC-MS检测。

(2)GC-MC检测：

采用Agilent 7890B/5977B气相色谱质谱联用仪，样本检测条件如下：色谱柱为HP-5MS(30m×0.25mm，0.25μm)，载气采用纯度为99.99％的氦气，流速为1.7mL/min。

气相色谱条件为：进样口温度为250℃，最初柱温箱为85℃，以5℃/min升温至140℃，以2℃/min升温至180℃，以0.8℃/min升温至190℃；在无分流模式下，进样体积为1μL；质谱电离能70eV，溶剂延迟为7.5min，全扫描模式，扫描范围为41-600m/z。

检测的目标物质为8-羟基辛酸硅烷化衍生物，定量离子m/z＝289.2，保留时间19.20min，保留时间在允许偏差内应小于0.5min。

结果详见图1-5。

(3)数据分析：

根据8-羟基辛酸检测后的峰面积绘制标准曲线，随后通过计算对蜂蜜中8-羟基辛酸的含量进行检测。以8-羟基辛酸定量离子的色谱峰面积x作为横坐标，以8-羟基辛酸的添加浓度为y作为纵坐标，得到标准曲线，图6为本发明8-羟基辛酸的标准曲线，其拟合方程如下：

y＝5×10

根据8-羟基辛酸在中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜中含量的差异，鉴别中蜂蜂蜜和西蜂蜂蜜,当8-羟基辛酸的含量在蜂蜜样品中介于96.20-253.34mg/kg时，判断所述蜂蜜为中蜂蜂蜜，当含量介于0-32.46mg/kg是，则判断为西蜂蜂蜜。

最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。