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一种用于λ-Red重组系统基因敲除重组阳性克隆检测的引物及检测方法

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本发明公开了一种用于λ‑Red重组系统基因敲除重组阳性克隆检测的引物及检测方法。属于生物技术工程领域。本发明提供一种通用检测引物，其设计方法为在四环素tetRA基因中间约1/3处设计一对互补的引物，与原有的检测重组阳性的鉴定引物进行组合使用，分别用于检测以四环素基因tetRA为替换基因的λ‑Red重组系统基因敲除重组阳性克隆的3’端序列和5’端序列。这样设计检测引物使检测重组阳性克隆有了3种选择，可以完全避免因为待敲除的序列与四环素tetRA基因相差较小而带来的难以判断阳性结果难题。而且用通用引物检测重组阳性克隆，可以更有效的证明四环素tetRA基因插入位置的正确性。

著录项

公开/公告号CN110358812B

专利类型发明专利
公开/公告日2022.12.27

原文格式PDF
申请/专利权人武汉生物工程学院;
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申请/专利号CN201910551942.1
发明设计人王松太;江楠;
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申请日2019.06.25
分类号C12Q1/6858;
代理机构武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙);
代理人彭劲松
地址 430415 湖北省武汉市新洲区阳逻经济开发区汉施路1号
入库时间 2023-01-09 21:32:16

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3. Gamma subunit of a vertebrate amp activated kinase, polypeptide, nucleic acid sequence, nucleic acid fragment, set of primers to amplify a nucleic acid sequence, recombinant vector, host cell, transgenic animal, knockout animal, heterotrimeric ampk, methods to detect a metabolic disorder, and to obtain a pair of primers, pair of initiators, process for detecting a dysfunction of carbohydrate metabolism, and uses of a transformed cell, a transgenic animal, a knockout animal, and an ampk heterotrimeric [P] . BR0013890A . 2002-05-07

机译：脊椎动物amp活化激酶的γ亚基，多肽，核酸序列，核酸片段，用于扩增核酸序列的引物组，重组载体，宿主细胞，转基因动物，敲除动物，异三聚体ampk，检测代谢异常的方法，并获得一对引物，一对引发剂，检测碳水化合物代谢异常的方法以及转化细胞，转基因动物，基因敲除动物和ampk异源三聚体的用途
4. Polinucleotidio polinucleotidio recombinant vector, recombinant host cell system, recombinant expression, cell transformed polipeptidio, HCV, preparation of polipeptidio, polipeptidio of HCV.Polipeptidio purified recombinant polipeptidio, polipeptidio of merger with, monoclonal antibody, preparation purified polyclonal antibodies, particle polinucleotidio probe.Epetopo kit antibody to HCV, method for production of polipeptidio, method for deteccao nucleic acids of HCV immunoassay to detect antigeno of HCV.Immunoassay for detecting antibodies directed against antigeno of HCV vaccine for treatment of HCV infection, cell, cell infected with HCV.Method for production of antibodies to HCV and method to isolate cDNA derived from the genome of an infectious agent unidentified [P] . BR8807310A . 1990-03-13

机译： Polinucleotidio polinucleotidio重组载体，重组宿主细胞系统，重组表达，细胞转化的polipeptidio，HCV，Polipeptidio的制备，HCV的polipeptidio.Polipeptidio纯化的重组polipeptidio，与之合并的polipeptidio，单克隆抗体，制备纯化的多克隆抗体，颗粒polinucleotidio探针.Epetopo HCV试剂盒抗体，产生脂肽的方法，检测HCV免疫测定的HCV抗原的检测方法，检测针对HCV疫苗抗原的抗体的免疫测定，用于治疗HCV感染，细胞和HCV感染的细胞的方法。丙型肝炎病毒抗体的生产以及分离未确定传染源基因组cDNA的方法
5. Preparation of isolated protein, substantially pure or recombinant, isolated trt protein, substantially pure or recombinant isolated trt protein, substantially pure or recombinant, isolated trt protein or a variant thereof, or a fragment, polynucleotide, synthetic, substantially pure or recombinant, isolated nucleic acid, encoding a trt protein, expression vector, transfected cell, non-human animal, or its progeny, transgenic non-human animal, antibody or its binding fragment, antibody, specifically immunoreactive under immunologically reactive conditions, for a trt protein or its immunogenic fragment, processes of determining whether a compound or treatment is a modulator of a trt activity or expression, of determining whether a test compound is a modulator of a trt activity, of preparing recombinant telomerase, to detect a trt gene product in a sample, to detect the presence of d and at least one telomerase positive human cell in a biological sample comprising human cells, to diagnos [P] . BR9711844A . 2000-01-18

机译：分离的蛋白质，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白或其变体或片段，多核苷酸，合成的，基本上纯的或重组的分离的核酸的制备编码trt蛋白的酸，表达载体，转染的细胞，非人类动物或其后代，转基因非人类动物，抗体或其结合片段，抗体，在免疫反应条件下对trt蛋白或其免疫原具有特异性片段，确定化合物或处理是否是trt活性或表达的调节剂，确定测试化合物是否是trt活性的调节剂，制备重组端粒酶以检测样品中trt基因产物的过程，检测包含人细胞的生物样品中d和至少一种端粒酶阳性人细胞的存在，以进行诊断