首页>
外国专利>
SALMONELLANIN KLASİK KÜLTÜR METODUNA ALTERNATİF HIZLI VE TAŞINABİLİR MİKROAKIŞKAN TESPİT SİSTEMİ
SALMONELLANIN KLASİK KÜLTÜR METODUNA ALTERNATİF HIZLI VE TAŞINABİLİR MİKROAKIŞKAN TESPİT SİSTEMİ
展开▼
机译：替代萨蒙尼兰经典文化方法的快速便携式微流体检测系统
展开▼
页面导航
摘要
著录项
相似文献
摘要
Dünyada her yıl, 155 000'i ölümle sonuçlanan yaklaşık 94 milyon Salmonella gastroenterit vakası görülmekte ve bunların %85'inin de gıda kaynaklı olduğu bildirilmektedir. Gıdaların Salmonella açısından temiz olduğunun araştırılması ve bu incelemenin hızlı, hassas ve kolay uygulanabilir olması, yanlış pozitif ve negatifliğin olmaması analiz yapılan metotta aranan özelliklerdir. Analiz yöntemiyle ölü bakterilerin gıda içinde varlığının tespit edilmesi istenmez. Gıda prosesi sırasında son ürün mikrobiyolojik olarak sağlığa zarar verecek canlı bakterileri içermediği halde proses öncesi bulaşan ölü bakterilerin tespit edilmesi gıda ürününe haksız olarak zararlı tanısı konulmasına neden olur. Bu duruma engel olmak için moleküler yöntemle analiz yapan kitlerin mikroorganizma tespit etme seviyeleri 104?e yükseltilerek hassasiyetleri azaltılmaktadır. Moleküler yöntemlerde de ölü canlı ayırımı yapılamadığından, analiz sonucunda bulunan pozitif sonucun gıda içinde bulunan canlı bakteriye ait olduğunun ispatı için ayrıca ek maliyete ve zaman kaybına neden olan doğrulama testine ihtiyaç vardır. Aynı şekilde altın standart kültür yönteminde üreyen kolonilerin Salmonella bakterisine ait olup olmadığının doğrulanması gerekir. Geliştirilen sistemde ise; gıda içerisinde 105 ölü bakteri DNA?sı elimine edilerek yanlış pozitif sonuç vermesi önlenmekte olup minimum tespit sınırı ise 10?dir. Ayrıca geliştirilen sistemde DNA üzerinde 6 bölgeye özgül 4 adet primer kullanılır. Bu nedenle yöntemin özgüllüğü çok yüksektir (%99.9) ve doğrulama testine ihtiyaç yoktur. PCR sistemlerinde kompleks sıcaklık kontrol üniteleri yani cihaz gerektiğinden laboratuvar alt yapısına bağımlı analiz yapılabilmektedir. Önerilen sistemde ise DNA sabit sıcaklıkta çoğaltılır; sıcaklık döngüsü gerekmez, bu nedenle kompleks cihaza ve laboratuvar alt yapısına gerek yoktur. Ön zenginleştirme, örnekten DNA izolasyonu ve PCR basamaklarının üzerinde gerçekleştirildiği taşınabilir mini ısıtıcı ile işlemler laboratuvar dışında kolaylıkla uygulanabilir. Moleküler yöntemle yapılan analizlerde görüntüleme veya analiz sonucunu göstermek için cihaz gerekmektedir. Geliştirilen yöntemde İlmiğe dayalı izotermal DNA amplifikasyon yöntemi ile çoğaltılmış DNA?lar hibridizasyona uğratılarak işaretli prob ile birleştirilmekte ve yanal akışlı yöntem ile çıplak gözle sonuç okunabilmektedir. Bu nedenle analiz sonucu gözle görülebildiğinden ek bir cihaza gerek duyulmamaktadır. Klasik kültür yöntemi altın standart olarak kabul edilmektedir ancak pozitif örneklerde analiz süresi 7 gün, moleküler yöntemlerde ise doğrulama testi ile beraber 3 gün, geliştirilen sistemde ise ön zenginleştirme süresi dahil 5.5 saattir.
展开▼
