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Notch1诱导的小鼠白血病环境对正常造血干祖细胞作用机制的研究

摘要

目的:以急性T淋巴细胞白血病为模型,研究白血病宿主体内残留的正常造血细胞功能变化的相关机制。方法:将过表达Notch 1胞内结构域(ICN 1)的逆转录病毒载体MSCV-ICN 1-IRES-GFP感染C57BL/6小鼠骨髓Lin -Scal+细胞(CD45.2)。实验组将1×106过表达ICN 1-GFP的白血病细胞与107B6.SJL鼠(CD45.1)骨髓有核细胞尾静脉注入到9.5Gy照射后的C57BL/6受体小鼠,建立白血病小鼠模型。对照组以1×108C57BL/6小鼠的骨髓细胞替代白血病细胞。移植后流式细胞术检测外周血、骨髓中正常造血细胞和白血病细胞比例,HE染色检测白血病细胞在各种组织中的浸润。结果:100%白血病组小鼠在3周内发生白血病,中位生存时间13 d。10 d后,发病小鼠肝、脾肿大,13 d时外周血和骨髓中白血病细胞(GFP+细胞)占90%以上,CD4+CD8+细胞占80%左右,正常造血干祖细胞频率及绝对数下降。细胞周期分析发现在发病早期HPC增殖加快,发病晚期HSC大多处于静止期等等。结论:①基因芯片结果显示在白血病环境下,正常HSC中与细胞增殖、黏附、归巢相关的基因如CXCR4、 Mmp2、 Itgb3、 Hesl、p21表达改变,使HSC处于更稳定的周期状态中。②Hes 1在白血病中HSC和HPC的差异表达提示HSC和HPC中Hes1对白血病环境的不同反应造成造血干祖细胞的不同命运。③体外实验显示Hes 1对HPC的细胞周期有抑制作用,体内试验也说明Hes 1过表达对于白血病环境下造血干祖细胞数量的维持有一定的保护作用,提示Hes1高表达是白血病环境下正常造血干细胞功能可逆性受抑的机制之一。

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