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快速分离与鉴定天然环肽(cyclotides)的方法

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目的：以天山堇菜为实验材料研究建立一种快速分离和鉴定天然环肽分子的技术。方法：采用50%乙醇浸提、不同极性溶剂萃取；然后用DTT直接还原经Sephadex LH-20层析分离的组分，结合RP-HPLC快速确定环肽分子，进一步分离纯化获得单体分子；然后利用DTT还原二硫键、碘乙酰胺保护还原的巯基，内切蛋白酶Glu-c、Lys-c和胰蛋白酶酶解，结合RP-HPLC分离肽段；最后，用MALDI TOF/TOF MS进行质谱分析，鉴定环肽分子结构。结果：从天山堇菜中分离鉴定出两个已报道的环肽varv A和varvE,其氨基酸残基序列为：varvA cyclo-(GLPVCGETCVGGTCNTPGCSCSWPVCTRN)，vain E cyclo(GLPICGETCVGGTCNTPGCSCSWPVCTRN)。结论：通过对天山堇菜环肽分子的研究，建立了利用DTT还原、RP-HPLC色谱分离纯化、结合酶解与质谱法鉴定其分子结构的技术方法。

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来源
《2010施慧达杯第十届全国青年药学工作者最新科研成果交流会》|2010年|21-26|共6页
会议地点长春
作者
王伟; 王煦辰; 杜国华; 孔建强; 程克棣;
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作者单位

中国药学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类化学分析与鉴定;
关键词
天山堇菜; 环肽分子; 中药鉴定;

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