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新型二维液相色谱柱对重组人FL包涵体的复性与同时纯化

摘要

近年来,蛋白折叠液相色谱(Protein folding liquidchromatography,PFLC)法作为重组包涵体蛋白的一种有效复性与同时纯化工具获得了长足发展。PFLC法主要包括疏水相互作用色谱(HIC)、离子交换色谱(IEC)、尺寸排阻色谱(SEC)和亲和色谱(AFC),其特点是变性的蛋白在色谱柱上复性的同时得到纯化。但是,由于在这四种方法中每步纯化的效果倍差不等,一般需要至少2个纯化步骤才能达到重组蛋白产品的质量标准,即考虑纯度达到95%以上。因此,一种兼具有HIC和IEC两种分离模式的新型色谱填料首次合成并被用于活性蛋白快速分离。这种用一根色谱柱实现HIC和IEC快速分离蛋白的新方法,被称为单柱二维液相色谱(1C-2DLC)法,其蛋白双保留机理的特征可用“U”型洗脱曲线来表示。

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