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长角血蜱4D8基因的克隆与原核表达

摘要

本文旨在揭示长角血蜱保护性抗原4D8的免疫原性。根据GenBank上登录蜱的4D8基因序列设计引物,用PCR技术从长角血蜱雌蜱研磨组织cDNA中扩增出4D8基因,将其连入pGEM(R)-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM(R)-T Easy—HL4D8.核苷酸测序,分析表明,克隆的长角血蜱4D8基因与青海血蜱同源性为90%、与肩突硬蜱同源性为8 1%。将此片段亚克隆到原核表达载体pGEX-4T.1,构建重组原核表达载体pGEX-4 T-1-HL4D8,经表达的重组蛋白,通过Western-blotting试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。结果显示,该重组蛋白是分子质量约为41ku的融合蛋白,且表达产物能被兔抗长角血蜱全蜱蛋白阳性血清所识别。

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