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兔抗对虾白斑症病毒(WSSV)独特型抗体的制备及其特性分析

摘要

以前期己制备的杭WSSV囊膜蛋白单克隆抗体4G9(Ab1)杂交瘤细胞生产小鼠腹水,腹水经辛酸-硫酸铵法、Protein G亲和层析法纯化后,用以制备兔抗血清,所得血清经纯化得到粗提的兔抗WSSV独特型抗体(Ab2)。采用竞争酶联免疫吸附实验、闻接免疫荧光法、斑点免疫印迹和蛋白免疫印迹等实验方法分析了Ab2特性。结果表明:Ab2能识别Ab1并与WSSV竞争Ab1的抗原结合位点。是具有模拟WSSV特性的抗独特型抗体:Ab2能与中国对虾血细胞结合,并能部分阴断wSSV与血细胞膜的结合:其与中国对虾血细胞膜上结合的蛋白分子量分别为94.5、51.5和27.OkDa,由此推断,这三个蛋白为WSSV在中国对虾血细胞膜上的结合蛋白。本研究结果可为进一步研究WSSV侵染机理提供资料。

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