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环氧化物水解酶发酵条件优化及酶学性质研究

摘要

手性环氧氯丙烷(ECH)是一种高价值的中间体,用以合成药制品和农用化学品,具有广阔的市场前景.手性环氧氯丙烷的合成方法有化学法和生物法,化学法选择性差,重金属催化剂污染严重,生物法选择性较好,且对环境友好.从土壤中筛选出一株能将环氧氯丙烷立体选择性水解为R-邻二醇的细菌ZJBT09106.对其产酶条件进行了研究,最佳碳源:柠檬酸钠22.26 g/l,淀粉10 g/l.最佳氮源:酵母浸出汁10 g/l,牛肉膏16 g/l.最佳诱导剂3-氯-1,2-丙醇,加入量为0.02%.通过优化,酶活达到203 U/l,生物量达3.0 g/l.进一步通过超声波破碎,硫酸铵沉淀,DEAE 离子交换层析,得到该氧化还原酶的纯酶,分子量为30kD,比酶活为0.396 U/mg,得率为15.2%.

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