鼻腔鼻窦内翻乳头状瘤上皮的培养与鉴定

摘要

目的:为进一步对鼻腔鼻窦内翻乳头状瘤(sinonasal inverted papilloma,SNIP)的发病机制及其癌变诱因等进一步研究,探索人SNIP上皮细胞体外培养方法.rn 方法:病理确诊的人SNIP组织经0.1%链酶4度过夜消化,经细胞筛过滤后离心,去上清后利用上皮细胞培养基(BEBM+BEGM)重悬,接种于经胶原包被的培养皿中,采用差速贴壁方法获得人SNIP上皮细胞,采用改良气道上皮细胞培养基(BEBM+BEGM)进行培养,利用角蛋白,HPV染色法鉴定体外培养的SNIP上皮细胞.rn 结果:人SNIP上皮细胞在接种后18h开始贴壁进入适应期,细胞为圆形,呈岛屿状生长;接种后24-72h,进入对数生长期,细胞伸展呈多边形,相互连接形成细胞单层,呈典型鹅卵石样形态,细胞立体感强,胞浆中有较多的高密度分泌颗粒:接种后第4天细胞数量达到高峰,并进入稳定生长期,胞浆内颗粒开始减少;接种后7天,细胞进入衰退期,胞浆内颗粒显著减少,细胞逐渐死亡、脱落。另外,4代(F4)之前的SNIP上皮细胞传代细胞贴壁时间早,形态均一,经角蛋白和HPV染色鉴定显示体外培养的SNIP上皮细胞纯度达到96%以上,纯度较高。rn 结论:0.1%的链酶4度过夜可充分消化SNIP组织,获得的SNIP上皮细胞经差速贴壁接种后24-72h内获得的SNIP原代细胞和F4之前的传代细胞可以供体外试验研究。

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