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甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)抗原变异分析及其克隆和表达

摘要

目的:分析比较甲型H1N1病毒HA抗原的变异情况,并克隆表达H1N1特异性的HA抗原,为免疫学诊断试剂和疫苗的研究提供基础。rn 方法:采用BioSun生物学软件同源比较不同地区甲型H1N1病毒和我国猪流感病毒流行株HA抗原序列,并预测甲型HlNl病毒HA的抗原表位区间,筛选特异性H1N1-HA抗原序列,采用搭桥PCR法进行合成HA序列,并利用载体pBVIL1进行克隆表达。rn 结果:H1N1病毒HA抗原在人际间传播并未发生显著变异,但与猪流感病毒HA序列变异率为21.6%,显著高于不同宿主间变异。位于第18—243aa的HA优势抗原区域序列存在较大差异,在没有毒株的情况下,共设计26条引物扩增合成全部678bpHA基因,克隆表达后,融合蛋白分子量为44KD,测序结果显示HA基因插入正确。rn 结论:获得甲型H1N1病毒HA抗原,在H1N1病毒免疫学诊断技术及疫苗的研制方面具有潜在应用价值。

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