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产丁二酸工程菌的构建及其厌氧发酵

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为了考察过量表达苹果酸酶对于E.coli NZNl11(1dhA::Kan pfl::Cam)厌氧发酵产丁二酸的影响,将连接有苹果酸酶基因sfcA的表达载体pTrc99a-sfcA转化进NZNl11中,构建了重组NZNl11(pTrc99a-sfcA).0.5mmol/l IPTG诱导8h后,测定的苹果酸酶比酶活为30.67u/mg,比受体菌提高了140倍.采用两阶段发酵模式,结果表明:过量表达的苹果酸酶在NZNl11体内催化了从丙酮酸到苹果酸的逆向反应,丁二酸是发酵过程中积累的主要有机酸,且当加入0.7mmol/L IPTG诱导,初始葡萄糖糖浓度为18.5g/l时,选择对数生长期后期的菌种以10%的接种量转入厌氧发酵,发酵结束时发酵液中丁二酸的浓度为12.84g/l,对葡萄糖的收率为69.43%,乙酸为0.58g/l,二者浓度比为22:1,没有检测到甲酸和乳酸.构建的菌种具有高产丁二酸和副产物板少的优点,在同类菌种中处于先进水平.

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来源
《2008年有机酸行业技术与应用交流会》|2008年|94-99|共6页
会议地点银川
作者

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作者单位

中国食品科学技术学会;

中国发酵工业协会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类基础理论;
关键词
苹果酸酶; 两阶段发酵; 逆向催化; 丁二酸;

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