首页> 中文会议>第二届全国人畜共患病学术研讨会 >微小隐孢子虫子孢子与宿主黏附相关蛋白质的筛选

微小隐孢子虫子孢子与宿主黏附相关蛋白质的筛选

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的筛选微小隐孢子虫与宿主细胞黏附相关蛋白质，揭示隐孢子虫在宿主体内寄生与致病机理。方法参照文献提取微小隐孢子虫总RNA并分离mRNA，利用反转录酶合成cDNA，将EcoR I和HindⅢ粘性末端连到双链cDNA的两端，定向插入到T7 Select 10-3b载体，构建微小隐孢子虫子孢子蛋白质噬菌体展示文库。利用Caco-2细胞对文库进行筛选。结果本试验构建的微小隐孢子虫T7噬菌体展示文库初始文库的滴度为5.3×105pfu/mL，文库容量为1.5×105个重组子，92％的插入片段大于0.3kb，扩增后文库滴度为3.1×1010 pfu／mL用Caeo-2细胞筛选到6个微小隐孢子虫黏附相关蛋白质。结果显示：5个蛋白质含有N端信号肽，3个蛋白质含有跨膜区，表明这几个蛋白质或分泌到虫体之外，或嵌合在虫体表膜，是可能的黏附和侵入相关蛋白质。其中编码含有跨膜区蛋白质的基因XM-625389与顶器门其它寄生虫(如疟原虫、微小泰勒虫)的相关基因具有很高的同源性，表明该基因编码的蛋白质在顶器门寄生虫中功能保守，可能是潜在的黏附和侵入相关蛋白质。通过免疫荧光将该蛋白质在虫体上进行定位，发现该蛋向质定位于子孢子表膜。另外，XM_627245和XM_627859均编码粘蛋白类相关蛋白质，而且与已报道的GP900蛋白质在结构上相类似，具有粘蛋白样模体、半胱氨酸和苏氨酸富集模体，并具有O-糖基化位点。预测这两个蛋白质可能具有与GP900蛋白质相似的黏附功能。结论成功构建了微小隐孢子虫噬菌体展示文库，用Caco-2细胞对文库进行筛选，共筛选到6个微小隐孢子虫黏附相关蛋白质，其中1个为微小隐孢子虫重要的表面黏附蛋白质CP2，另外5个可能的黏附相关蛋白质的功能尚需进一步鉴定。

著录项

来源
《第二届全国人畜共患病学术研讨会》|2008年|371-374|共4页
会议地点江苏泰州
作者

展开▼
作者单位

中国畜牧兽医学会;

展开▼
会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类孢子虫;转化及克隆;
关键词
微小隐孢子虫; T7噬菌体展示; 筛选; 黏附;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 微小隐孢子虫子孢子与宿主黏附相关蛋白的筛选 [J] . 郭安 ,尹继刚 ,向梅 . 中国寄生虫学与寄生虫病杂志 . 2009,第1期
2. 微小隐孢子虫子孢子表面蛋白质粒DNA接种诱导Balb/c小鼠的免疫应答 [J] . 何宏轩 ,张西臣 ,尹继刚 . 免疫学杂志 . 2002,第4期
3. 微小隐孢子虫黏附相关蛋白基因CP21的原核表达及鉴定 [J] . 任保彦 ,张西臣 ,陈玉兰 . 畜牧兽医学报 . 2011,第008期
4. 利用酵母双杂交技术筛选与生殖支原体黏附蛋白(MgPa)相互作用的宿主蛋白 [J] . 王磊 ,李冉辉 ,邓湘赢 . 微生物学杂志 . 2019,第002期
5. 应用基于色谱质谱联用技术的蛋白质组学鉴定筛选胃癌相关蛋白质 [J] . 刘羽 ,李兆星 ,檀碧波 . 中国全科医学 . 2017,第009期
6. 微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP15／60基因的克隆及表达 [C] . . 中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会 . 2008
7. 鸡柔嫩艾美尔球虫体外入侵宿主细胞分泌蛋白质组学分析及入侵相关蛋白质的筛选鉴定 [A] . 高洋 . 2020

微小隐孢子虫子孢子与宿主黏附相关蛋白质的筛选

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅