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犬传染性肝炎核酸疫苗研究

摘要

@@ 犬传染性肝炎病毒,又称犬腺病毒(简称:CAV),属于腺病毒科哺乳动物腺病毒属成员,是哺乳动物腺病毒属中致病性最强、形态结构研究得较清楚的一种动物病毒。CAV分为两种抗原相关型,即犬腺病毒I型(CAV-1)和犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)。其中CAV-1称犬传染性肝炎病毒(CIHV),主要引起犬传染性肝炎和熊、狐脑炎。本研究分析了I型犬腺病毒抗原基因,确定具有中和抗原决定簇的Loop1和Loop2基因为犬传染性肝炎核酸疫苗候选基因。设计、合成抗原基因Loop,构建了犬传染性肝炎核酸疫苗,真核表达质粒pVA×1-CpG Loop和原核表达质粒pET28a—Loop。脂质体转染,证实pVA×1-CpG—Loop质粒能在体外表达Loop基因。采用肌肉注射,电转,以及肌肉、皮下和鼻粘膜联合的不同的免疫途径、不同的免疫剂量和不同的免疫策略,都能使小鼠产生特异性IgG抗体和中和抗体,以联合免疫抗体水平最高。淋巴细胞增殖、T淋巴细胞亚群分类和干扰素γ的测定,表明pVA×1-CpG—Loop DNA疫苗在诱导体液免疫产生的同时,也诱导细胞免疫的产生。

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