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粘膜免疫方式增强草原兔尾鼠透明带3 DNA疫苗免疫效果的研究

摘要

针对草原兔尾鼠透明带3(ZP3)DNA不育疫苗的研究已经取得了很大的进展,但在实际应用中还有许多问题有待进一步解决。寻找理想的免疫佐剂、发送载体以及更合适的免疫途径,增强ZP3抗原的免疫原性,才能解决草原兔尾鼠DNA不育疫苗的实际应用。本研究旨在探索提高草原兔尾鼠透明带3(ZP3)DNA不育疫苗粘膜免疫反应的有效方法。用壳聚糖包裹pcDNA3-Lp3制备成pcDNA3-Lzp3壳聚糖纳米微粒,并通过点眼、滴鼻、口服等不同粘膜免疫途径免疫小鼠,对照组免疫为不包裹壳聚糖的DNA疫苗,每7天加强免疫一次,每只小鼠免疫100μg质粒/次,14 d后,间接ELISA法检测小鼠血清中抗LZP3 IgG抗体,结果显示,滴鼻免疫组和口服免疫组诱导的特异性抗LZP3的IgG水平均高于对照组;但滴鼻免疫组与口服免疫组相比较,滴鼻免疫组的lgG水平更高,说明滴鼻免疫途径比口服免疫途径更能有效地刺激了小鼠机体的粘膜免疫应答。rn 这可能是因为滴鼻免疫途径使DNA疫苗经鼻粘膜丰富的毛细血管吸收后直接进入体循环,免受胃肠道中酶的破坏,提高DNA疫苗摄人量。为增强草原兔尾鼠透明带3(ZP3)DNA不育疫苗的粘膜免疫效果,研究选取了IL-15(白细胞介素15)作为草原兔尾鼠ZP3 DNA疫苗的分子佐剂。IL-15是一种多功能细胞因子,可活化中性粒细胞、巨噬细胞、T细胞和B细胞,刺激B1细胞增殖,促进细胞因子的分泌和抗体生成,对免疫反应的起始具有重要作用。许多实验证明IL-15作为分子佐剂能够增强粘膜免疫活性。通过滴鼻免疫途径,用proVAX-IL-15和卵透明带不孕疫苗pcDNA3-Lzp3共免疫6~8周龄雌性小鼠,同时以pcDNA3-Lzp3和pcDNA3为对照组。7 d免疫一次,每次每只小鼠免疫200gg质粒,免疫两次后,ELISA检测血清中特异性抗LZP3的IgG抗体水平,结果显示proVAX-IL-15和pcDNA3-Lzp3共免疫组的IgG抗体水平显著高于对照组,说明IL-15分子佐剂通过滴鼻粘膜免疫途径显著提高草原兔尾鼠透明带3(ZP3)DNA疫苗的免疫效果,增强了ZP3的免疫原性,IL-15是一种极具潜力的粘膜免疫佐剂。本研究的结果有助于DNA粘膜不育疫苗的开发,为草原兔尾鼠透明带3(ZP3)DNA不育疫苗的应用奠定基础。

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