首页> 中文会议>第三届全国研究生生物质能研讨会 >嗜热放线菌β-葡萄糖苷酶基因的人工合成及功能性表达

嗜热放线菌β-葡萄糖苷酶基因的人工合成及功能性表达

摘要

β-葡萄糖苷酶是纤维素降解过程中的关键酶类,为了能够利用分子生物学手段提高β-葡萄糖苷酶 的活性和各项性能,以推动其在生物能源等领域的应用,我们对来源于嗜热放线菌(Thermobifida fusca)的β- 葡萄糖苷酶bglC 基因的异源表达进行了研究。首先根据表达宿主大肠杆菌的密码子偏好性对部分密码子 进行了调整,并用基于PCR 的人工合成方法组装了基因序列,并构建在大肠杆菌(Escherichia coli)表达载 体pET-28a(+)上,在E.coli BL21 中进行表达。活力测试和SDS-PAGE 结果均表明该酶实现了胞内活性表 达,酶蛋白的分子量为53 kDa,这一结果为后续定向进化研究奠定了基础。

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