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猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白功能性片段的原核表达及其免疫保护研究

摘要

目的:表达猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)的功能片段(TMRP)并检测其对小鼠的免疫保护活性。rn 方法:将本室构建的重组克隆载体pMD-tmrp经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切,将目的基因tmrp亚克隆至原核表达载体pGEX-3X中,转化E.coliBL21(DE3),鉴定正确后,用IPTG诱导,谷胱甘肽亲和层析纯化GST-TMRP,免疫BALB/c小鼠,测定其免疫保护率。rn 结果:阳性重组菌经IPTG诱导表达了可溶性目的蛋白,经亲和层析纯化得到了高纯度的融合蛋白,免疫BALB/c小鼠后,免疫保护率可达60%。rn 结论:已成功获得了具有免疫活性的GST-TMRP。

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