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蚓激酶重组逆转录病毒载体pLN-BCP-LKR的构建及其在奶牛乳腺组织中的表达

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本研究构建了含有蚓激酶基因cDNA的重组逆转录病毒载体pLN-BCP-LKR,以200μg、500μg、1000μg、2000μg的剂量梯度注入泌乳期黑白花奶牛乳腺,转染泌乳期奶牛乳腺组织获得暂时表达,并以500 μg为最佳表达剂量。利用脂质体转染PA317包装细胞,通过G418进行筛选得到了阳性细胞克隆,克隆扩大培养后收集病毒上清感染NIH3T3细胞进行滴度测定,最高滴度为1×104 CFU/mL。再用收获的病毒上清转染妊娠期奶牛乳腺组织,产后奶样经FAPA法检测蚓激酶活性。结果表明，牛奶具有明显的纤溶活性,即蚓激酶基因已经整合到奶牛乳腺组织并能实现相对稳定的表达。

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来源
《中国奶业协会2007年会》|2007年|116-119|共4页
会议地点南京
作者
周兴; 张居农;
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作者单位

中国奶业协会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类目的基因的获得;
关键词
奶牛养殖; 蚓激酶基因; 逆转录病毒; 基因表达;

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