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蓝舌病病毒单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

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目的建立稳定分泌蓝舌病病毒(Bluetongue virus, BTV)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对分泌的单克隆抗体进行特异性鉴定,并将其用于建立竞争免疫酶联免疫吸附试验(c-ELISA)检测蓝舌病抗体的方法。方法以纯化的BTV为抗原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,以大肠杆菌表达的VP7作为检测抗原,用间接ELISA法筛选杂交瘤细胞。纯化制备的单克隆抗体,以辣根过氧化物酶(HRP)进行标记,作为竞争抗体,Vp7作为包被抗原,组装c-ELISA蓝舌病抗体检测试剂盒,其对不同血清型绵羊抗血清进行了检测,并与美国进口试剂盒进行了比对。结果成功筛选出8株稳定分泌BTV抗体的单克隆细胞瘤,组装了c-ELISA试剂盒,与进口试剂盒检测结果100﹪符合,与其它抗体无交叉反应,具有较高的特异性和敏感性。结论成功研制出BTV单克隆抗体,选择了较好的实验条件,建立了竞争免疫酶联免疫吸附试验(c-ELISA)检测蓝舌病抗体的方法。

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来源
《第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会》|2007年|695-700|共6页
会议地点南京
作者
杨姝; 李文超; 吕茂民; 尹惠琼; 马玉媛; 刘明; 章金刚;
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作者单位

中华预防医学会;

中华医学会微生物学与免疫学分会;

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会议组织
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中图分类
关键词
蓝舌病病毒; 单克隆抗体; 细胞融合; c-ELISA;

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