应用多克隆抗体建立赭曲霉毒素A时间分辨荧光免疫分析

摘要

采用稀土离子标记技术,应用多克隆抗体建立高灵敏的赭曲霉毒素A(OTA)时间分辨荧光免疫分析法(PTA-TRFIA)。以OTA-KLH为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗OTA抗体;帆OTA与牛血清白蛋白的联结物(OTA-BSA)为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的兔抗OTA抗体;用稀土离子Eu3+标记的羊抗兔抗体进行示踪。该方法的灵敏度为0.02μg/L,测量范围为O.02μg/L-400μg/L,批内和批间变异分别为2.6%和5.2%,平均回收率为95.8%,与赭曲霉毒素B有5.6%交叉反应;黄曲霉毒素B1及BSA不干扰本方法对OTA的检测。不同时间进行的叽ATA-RFIA的效应点值EDS0、ED50、ED20分别为0.195μg/L,1.018μg/L和5.314μg/L。研究表明,OTA-TRFIA是目前报导的OTA检测中最灵敏的方法之一,该分析方法稳定性好、可测范围宽、可大批量检测。具有很好的应用前景。

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