首页> 中文会议>中国中西医结合学会第十八次全国消化系统疾病学术会议 >粪便H.pylori 23S rRNA基因突变检测方法的建立及临床价值

粪便H.pylori 23S rRNA基因突变检测方法的建立及临床价值

摘要

本文研究消化系统疾病粪便H.pylori 23S rRNA基因突变检测方法的建立及临床价值,病人、粪便标本采集及DNA提取本研究采用14C呼气试验及粪便抗原检测两项均H.pylori阳性,两项均H.pylori阴性的患者,筛选出自2003年12月至2004年7月因上消化道症状而就诊的H.pylori阳性48例,其中慢性浅表性胃炎30例、十二指肠溃疡17例、胃癌1例.H.pylori阴性10例,两组年龄22-68岁,平均45岁.检查前4周内服用过抗生素、铋剂、质子泵抑制剂者;合并有感染需用抗生素治疗者;有活动性胃肠道出血者做为除外标准.收集患者的新鲜粪便,在2小内检测或-20℃保存备用.采用Qigen公司生产的QIAamp DNA Stool Mini Kit提取粪便DNA,按说明书操作并略加改进.为提高DNA的纯度,每个标本称取1000 mg的粪便处理,离心后取100μl上清液,加入5 μl RNase A(10mg/ml)并在37℃孵育1小时以去除任何残余RNA.5μl上清液用于巢式PCR扩增,其余-20℃保存备用。

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