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IL-4变异体表达载体的构建及其在真核细胞BHK-21的表达

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目的构建具有拮抗IL-4作用的IL-4变异体(IL-4RA)的表达载体,并通过真核宿主细胞表达变异蛋白. 方法设计突变引物,从小鼠的PBMC细胞提取总RNA,R-PCR方法扩增目的片断.将该片断构建在真核表达载体上,并在真核细胞BHK-21中表达,通过Eilsa方法检测变异蛋白的表达. 结果通过测序分析及限制性酶切鉴定,采用RT-PCR成功的完成了IL-4RA的扩增和表达载体的构建,重组载体转染真核细胞后在上清中检测到IL-4RA的表达. 结论经构建含有目的基因的逆转录病毒载体,能够成功的在真核细胞表达出IL-4RA.

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来源
《中华医学会2006年全国儿童过敏性疾病诊断与治疗进展研讨会》|2006年|114-117|共4页
会议地点成都
作者
王桂兰; 鲁继荣;
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作者单位

中华医学会;

四川省医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类变态反应性疾病;免疫学检验;
关键词
过敏性疾病; IL-4变异体; 表达载体; 真核细胞; 逆转录病毒载体; 基因表达;

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