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圆环病毒2型ORF2编码基因原核表达与初步应用

摘要

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列设计一对引物,应用PCR从含有PCV-2的PK-15细胞中扩增出ORF2基因片段,回收PCR产物,将其克隆入pMD18-T载体,获得重组质粒pTORF2,并对其进行序列测定.重组质粒经BamHI、XnolI双酶切,回收ORF2基因,,定向克隆到表达载体pET-32a中并转化大肠杆菌Rosetta,进行原核表达.用此表达产物包被酶标板,建立ELISA诊断方法,并对临床340份送检血清进行了检测,结果表明其阳性率为%.

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