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首页> 中文会议>浙江省毒理学会第一届学术年会暨食品药品与人类健康论坛 >毒死蜱对牛血清白蛋白和磷脂的光谱学效应

毒死蜱对牛血清白蛋白和磷脂的光谱学效应

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目的:毒死蜱(Chlorpyrifos,简称CPF),是一种具有中等毒性的有机磷杀虫剂,长期暴露于低浓度毒死蜱环境中能引起胚胎神经发育毒性,本文通过磷脂和牛血清白蛋白的荧光光谱以及紫外吸收光谱探讨CPF与磷脂和牛血清白蛋白的作用方式,探讨CPF进入细胞膜时对其上的磷脂及蛋白质结构是否造成扰乱作用.rn 方法:(1)CPF—磷脂反应体系0.325g标准磷脂溶于250ml无水乙醇中配制成磷脂标准溶液,在5个试管中分别加入2×10-4mol/L的CPF溶液,配制为CPF终浓度为0、2.5×10-7mol/L、5.0×10-7mol/L、1.0×10-6mol/L、2.0×10-6mol/L的梯度溶液,常温下反应1h,将上述不同浓度梯度CPF—磷脂混合液加入到1cm比色皿中,30℃下检测磷脂的紫外光谱(200-400nm波段,间隔0.5nm,狭缝宽度5.0nm);(2)CPF—BSA反应体系配制2.0×10-6mol/L BSA标准溶液,在7个试管中分别加入2 ×10-4mol/L的CPF,配制成CPF终浓度分别为0、1.0×10-5、2.0×10-5、4.0×10-5、8.0×10-5、1.6×10-4、3.2×10-4mol/L的梯度溶液,常温下反应1h,将上述不同浓度梯度CPF—BSA混合液加入到1cml比色皿中,30℃下检测BSA的紫外光谱(波长200nm-320nm,间隔0.5nm,狭缝宽度5.0nm)与荧光光谱(300nm-480nm波段,激发光波长为284nm).rn 结果:磷脂的紫外光谱图显示，随着CPF浓度的增加，磷脂在200nm到400nm范围内的吸收值无明显变化，最大吸收峰峰位无红移或蓝移现象，峰值图谱中各CPF浓度组接近重合状态。BSA的荧光光谱显示随着CPF浓度的升高，BSA的荧光发生有规律的猝灭，而荧光的最大吸收峰位置(350nm)未发生明显变化。BSA的紫外光谱图显示，BSA在220nm附近的吸收峰随着CPF浓度的不断升高而增强。且最大吸收峰位(λmax)发生明显红移。rn 结论:在目前检测的浓度下，CPF对磷脂结构未造成显著扰乱作用，但对BSA会造成结构改变，表现为显著的荧光猝灭作用和紫外吸收峰明显红移现象，因此，CPF的细胞毒性更可能主要通过对膜蛋白的影响而发挥作用。

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