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mTORC1和mTORC2在PFOS致心肌发育毒性作用中的表达研究

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目的:利用胚胎干细胞测试(EST)模型,研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1和2(mTORC1和mTORC2)在全氟辛烷磺酸(PFOS)致小鼠胚胎干细胞(mESCs)定向分化为心肌细胞毒性作用中的表达.rn 方法:利用经典的悬滴培养法建立EST模型,加入40M的PFOS,观察其对mESCs定向分化为心肌细胞的影响.同时采用免疫荧光法、流式细胞术和Western-blot法,考察PFOS作用后mESCs定向分化为心肌细胞过程中中胚层标记蛋白brachyury、心肌特异性肌小节蛋白α-actinin、mTORC2重要组成份Rictor及其下游效应器p-Akt(Ser473)、mTORC2重要组成份Raptor及其下游效应器p-p70S6K(Thr389)的表达水平.rn 结果:PFOS能显著抑制mESCs定向分化心肌细胞。流式细胞术结果显示，PFOS组d5+5的细胞团中心肌细胞数量为16.2%，较溶剂对照组36.7%减少。免疫荧光结果显示，由PFOS诱导分化来的心肌细胞中心肌特异性肌小节结构紊乱。在分化的d5时，PFOS作用后显著减少中胚层蛋白brachyury的表达，并且同时抑制了mTORC2和mTORC1以及它们的下游效应器蛋白p-Akt(Set473、p-p70S6K(Thr389)的表达。在分化的d 5+1,d 5+3和d 5+5时，PFOS作用后显著减少心肌特异性蛋白a-actinin的表达，同时增强了mTORC2及其下游效应器蛋白p-Akt(Ser473)的表达，但mTORC 1及其下游效应器蛋白p-p70S6K(Thr89)的表达没有明显变化。rn 结论:PFOS抑制mESCs向中胚层细胞的分化，减少心肌细胞数量和抑制心肌特异性肌小节形成，该毒性作用可能与早期抑制mTORC2和mTORC1表达，后期特异性增强mTORC2表达活性有关。

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来源
《浙江省毒理学会第一届学术年会暨食品药品与人类健康论坛》|2014年|47|共1页
会议地点杭州
作者
汤磊磊; 涂米雪; 陆佳瑜; 王佳丹; 朱丹雁;
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作者单位

浙江省毒理学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类有机毒物;
关键词
全氟辛烷磺酸; 心肌发育; 毒性作用; 雷帕霉素靶蛋白复合物; 表达水平;

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