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人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体(ScFv)的表达和鉴定

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目的:对从噬菌体抗体库中筛选的人源抗狂犬病毒单链抗体A12进行可溶性表达及特异性鉴定和中和活性检测. 方法:将表达人源单链抗体的菌株A12进行诱导后进行SDS-PAGE及Westernblot检测,用流式细胞仪(FACS)检测其结合感染表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒Vero细胞的能力,用快速荧光灶抑制实验(RFFIT)测定A12表达产物的中和活性. 结果:westernblot显示经诱导的A12ScFv表达产物与抗C-myc抗体在约30KD处有强阳性表达带.FACS结果表明A12与表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染的Vero细胞有特异性反应.RFFIT结果表明,A12ScFv在1:27倍稀释时能完全中和病毒. 结论:A12经诱导后获得了可溶性表达,表达产物能特异性结合狂犬病毒G蛋白,并对狂犬病毒具有一定的中和活性.

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来源
《第八次全国生物制品学术会议》|2005年|59-62|共4页
会议地点昆明
作者
闭兰; 张爱华; 孙可芳; 胡巧玲; 祝玉桃; 王志友; 余模松;
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作者单位

中国微生物学会;

中华预防医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类免疫分子生物学（免疫化学）;其他病毒;
关键词
单链抗体; 狂犬病毒G蛋白; 可溶性表达; 噬菌体抗体库;

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