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毒害艾美耳球虫广东株微线蛋白-2基因在大肠杆菌的表达

摘要

根据我们首次克隆的毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株微线蛋白质-2基因(EnMIC-2(Gd))的cDNA序列设计特异性引物,用PCR方法扩增其阅读框架(ORF)后克隆至质粒表达载体pET-32a(+),成功构建了重组表达质粒pET-32a(+)-EnMIC-2,用CaCl<,2>法将其转化至宿主细菌E.coli Bl21(DE3).并用IPTG成功诱导了EnMIC-2重组抗原在大肠杆菌的表达,表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的10.8﹪,其分子量大小约为55kDa.重组蛋白经SDS-PAGE分析后,用E.necatrix(广东株)感染鸡的高免血清进行Western Blotting分析,结果为阳性.

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