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整合进禽网状内皮增生病病毒基因组片段的鸡马立克氏病毒和禽痘病毒的重组野毒株

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本研究从我国不同地区的经MDV疫苗免疫后仍有肿瘤高发的鸡群中,分离到12个MDV野毒株.用抗REV的单抗做间接荧光抗体试验证明其中3株有REV的共感染.对其余没有REV的9株MDV感染细胞的基因组DNA做斑点分子杂交及PCR显示,有4株MDV基因组中已整合进REV的LTR序列.根据MDV基因组上易插入REV的LTR的高频位点的序列合成7条引物,根据REV的LTR合成4条引物,由此交叉组成28对引物,从广东和广西分离到GD0202和GX0101二个MDV野毒株扩增和克隆已整合进MDV的REV-LTR序列及其相连的MDV序列.测序证明,二株中的REV-LTR插入序列及在MDV基因组中短独特序列(US)上的插入位点完全相同.这表明,这二个毒株很可能是由同一次重组事件在鸡群中形成的流行毒株.将国内5个不同生产厂家来源的禽痘弱毒疫苗株和1株禽痘野毒株在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续传5代,用禽网状内皮增生病病毒(REV)特异性的单克隆抗体,进行间接免疫荧光试验(IFA),均检测不到传染性REV.但是以这6株禽痘病毒(FPV)感染的第2代和第5代细胞基因组提取物为模板,通过PCR均能扩增出REV的长末端重复序列(LTR)和囊膜蛋白(env)基因片段.用特异性核酸探针作分子斑点杂交(Dot-blot),结果显示所扩增的PCR条带为特异的REV-LTR和REV-env基因片段.实验结果表明,我国的一些痘病毒疫苗和野毒株基因组中,已稳定地整合进了REV的基因组成分.这是国内外对从病鸡中分离和鉴定到整合有REV-LTR的重组MDV野毒株的首次报道,也是国内对禽痘病毒天然重组病毒的首次报道.本研究表明,今后应对不同病毒间的天然重组现象在病毒变异中的作用给予高度重视.

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来源
《中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会》|2004年|156-164|共9页
会议地点贵阳
作者
崔治中; 张志; 丁家波; 孙淑红;
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作者单位

中国畜牧兽医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类家畜病毒学;鸡;病毒病;
关键词
禽网状内皮组织增生病病毒; 马立克氏病病毒; 禽痘病毒; 病毒重组; MDV疫苗免疫; 鸡群;

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