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腈水解酶催化法不对称合成(S)-2-氨基丁酸

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(S)-2-氨基丁酸是抑制人体神经信息传递的非天然氨基酸,具有加强葡萄糖磷酸酯酶的活性,促进脑细胞代谢的作用.同时,(S)-2-氨基丁酸也是一种重要的化工原料和医药中间体,已广泛应用于治疗局限性及继发性全身性癫痫的手性药物左乙拉西坦和抗结核药物盐酸乙胺丁醇药物的合成.以(S)-2-氨基丁酸为原料合成左乙拉西坦的方法合成收率高,是目前国内外的主流生产路线.而(S)-2-氨基丁酸的制备主要来源于化学合成和生物催化,其中生物催化法具有反应条件温和、生产成本低、污染少等优点,具有很大的发展前景.采用以立体选择性腈水解酶为生物催化剂，以外消旋2-氨基丁腈为底物，不对称合成(S)-2-氨基丁酸的技术路线。将40株产睛水解酶的重组大肠杆菌分别进行LB液体培养和IPTG诱导腈水解酶的表达，并离心收集菌体细胞。通过对Nitb116402腈水解酶的“热点”氨基酸进行定点饱和突变改造，构建饱和突变库，通过薄层层析(TCL)检测获得2株酶活提高较为显著的突变株，分别为240-91和251-85。HPLC检测结果表明，突变酶的酶活提高至原始酶的2倍左右。

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来源
《中国生物工程学会2014年学术年会暨全国生物技术大会》|2014年|1-2|共2页
会议地点温州
作者
周海岩; 张旺; 郑裕国;
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作者单位

中国生物工程学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类发酵法制氨基酸;
关键词
(S)-2-氨基丁酸; 腈水解酶; 生物催化法;

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