穿膜肽rhbFGF的构建及其活性检测

摘要

碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)是成纤维细胞生长因子家族中的23个成员之一,具有较好创伤愈合和神经保护作用.本研究用基因工程的方法将穿膜肽TAT基因与重组人成纤维细胞因子(rhbFGF)基因进行融合,构建pET3c-TAT-rhbFGF重组质粒,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)pLsS菌株.IPTG诱导表达后,融合蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定为高效可溶性表达.经过离子交换和亲和层析两步纯化后,获得了纯度高于95%的融合蛋白,NIH 3T3细胞增殖实验表明,TAT-rhbFGF融合蛋白具有较好的生物学活性。

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